Effect of 0.9% saline solution and phosphate buffer saline at different temperatures and incubation times on the morphology of goat preantral follicles | Efeito da solução salina 0,9% e tampão fosfato salina em diferentes temperaturas e tempos de incubação sobre a morfologia de folículos pré-antrais caprinos

The present work investigated the efficiency of 0.9% saline solution and Phosphate Buffered Saline (PBS) in the preservation of goat preantral follicles in situ at different temperatures and incubation times. The ovarian pair of each animal was divided into 19 fragments. One ovarian fragment was taken randomly and fixed (control). The other 18 fragments were randomly distributed in tubes containing 0.9% saline solution or PBS at 4, 20 or 39 ºC for 4, 12 or 24 h. A total of 5,921 preantral follicles were examined. The quality of preantral follicles was evaluated by classical histology. The storage of ovarian fragments in 0.9% saline solution or PBS at 4 ºC did not reduce significantly the percentage of morphologically normal follicles when compared with the control, except after preservation in 0.9% saline solution for 24 h. The storage of ovarian fragments at 20 or 39°C reduced the percentage of normal preantral follicles when compared to the control, except after preservation in PBS at 20°C for 4 h. In conclusion, this study showed for the first time that goat preantral follicles can be stored in situ successfully at 4 ºC in 0.9% saline solution for 12 h and in PBS for 24 h, and at 20 ºC in PBS for 4 h.

O presente trabalho investigou a eficiência da solução salina 0,9% e tampão fosfato salina (PBS) na conservação de folículos pré-antrais caprinos in situ a diferentes temperaturas e tempos de incubação. O par ovariano de cada animal foi dividido em 19 fragmentos. Um fragmento foi escolhido aleatoriamente e fixado (controle). Os outros 18 fragmentos foram distribuídos aleatoriamente em tubos contendo solução salina 0,9% ou PBS a 4, 20 ou 39 °C por 4, 12 ou 24 h. Um total de 5.921 folículos pré-antrais foram analisados. A qualidade dos folículos pré-antrais foi avaliada através de histologia clássica. A incubação de fragmentos ovarianos em solução salina 0,9% ou PBS a 4 ºC não reduziu significativamente a percentagem de folículos morfologicamente normais quando comparados com o controle, exceto após a conservação em solução salina 0,9% por 24 h. A incubação de fragmentos ovarianos a 20 ou 39°C reduziu a percentagem de folículos pré-antrais normais quando comparados com o controle, exceto após conservação em PBS a 20°C por 4 h. Em conclusão, este estudo mostrou pela primeira vez que folículos pré-antrais caprinos podem ser conservados in situ com sucesso a 4 ºC em solução salina 0,9% por 12 h e em PBS por 24 h, e a 20 ºC em PBS por 4 h.