Sunflower [Helianthus annuus] cytoplasmic hybrids revealed by PCR [polymerase chain reaction] assay using male sterility as selectable marker

anglais. Hypocotyl protoplasts of Helianthus annuus L. were obtained and fused using polyethylene glycol. Cytoplasmatic male sterility and high oleic content were combined in fusion experiments with the aim to overcome extensive backcross in traditional breeding. Protoplasm isolated from etiolated and green hypocotyls were used to identify early fusion products. Calli were analyzed by chromosome counting showing a low frequency of aneuploidy in parental lines. Embryogenic calli were cultured onto MS regeneration medium supplemented with 0.1 mg/l NAA and 2.2 mg/l BAP and regenerated shoots were obtained. Calli were screened for mitochondrial genome differences between fertile and sterile sunflower mitochondrial by Polymerase Chain Reaction and 29.6 of calli were demonstrated to be hybrid. Moreover, two regenerate sterile plants were obtained

italien. [Protoplasti da ipocotili di Helianthus annuus L. sono stati ottenuti e fusi utilizzando il glicol polietilenico. In esperimenti di fusione sono stati combinati la sterilita' citoplasmatica maschile e il contenuto elevato di acido oleico allo scopo di superare il problema degli incroci di ritorno su vasta scala utilizzati nel miglioramento genetico tradizionale. Per identificare i prodotti della fusione precoce sono stati utilizzati protoplasti isolati da ipocotili eziolati e verdi. I calli, analizzati mediante la conta dei cromosomi, evidenziavano una bassa frequenza di aneuploidi nelle linee parentali. I calli embriogenici sono stati coltivati in un substrato di rigenerazione MS addizionato con 0.1 mg/l di NAA e 2.2 mg/l di BAP; in tal modo sono stati ottenuti germogli rigenerati. I calli sono stati controllati per quanto riguardava le differenze del genoma mitocondriale fra fertili e sterili mediante PCR e si e' dimostrato che il 29.6% degli stessi era ibrido. Inoltre, sono state ottenute due piante rigenerate sterili]