Proteolytic activities - leaf cycle and degradation of ribulose bisphosphate carboxylase (RuBPCase) in alfalfa (Medicago sativa L.)

anglais. Alfalfa (Medicago sativa L.) leaves represent an important source of proteins for animal nutrition. Therefore, one of the main agronomic goals is to improve protein content. Under a physiological point of view, it is helpful to understand the process of protein degradation (proteolysis) during foliar senescence induced by canopy. Several proteolytic activities (aminopeptidases, carboxypeptidases and endopeptidases) were studied using artificial substrates, during the process of senescence. Hence, considering that the most abundant leaf protein is ribulose bisphosphate carboxylase (RuBPCase), proteolytic activities were monitored using denaturing electrophoresis on crude estract, after autodigestion. Evidences for the presence of at least two proteases with different pH optimum degrading the large subunit (LSU) of RuBPCase are shown. The use of several class-specific protease inhibitors indicated that a metal-protease and a serine-protease are likely involved in LSU degradation

italien. Le foglie di erba medica (Medicago sativa L.) rappresentano un'importante fonte di proteine per la nutrizione animale. Pertanto, uno dei principali obiettivi agronomici e' migliorarne il contenuto proteico. Da un punto di vista fisiologico, e' utile comprendere il processo di degradazione proteica (proteolisi) durante la senescenza fogliare indotta dall'ombreggiamento. Varie attivita' proteolitiche (aminopeptidasi, carbossipeptidasi ed endopeptidasi) sono state studiate con l'impiego di substrati artificiali, durante il processo di senescenza. Quindi, considerando che la proteina fogliare piu' abbondante e' la ribulosio bisfosfato carbossilasi (RuBisCO), le attivita' proteolitiche presenti nelle foglie senescenti sono state analizzate mediante elettroforesi denaturante su estratto grezzo, in seguito ad autodigestione. Si sono mostrate evidenze della presenza di almeno due proteasi, con differente optimum di pH, che degradano la subunita' maggiore (LSU) della RuBisCO. L'uso di diversi inibitori proteasici classe-specifici ha indicato che una proteasi metallica e una proteasi serinica sono probabilmente coinvolte nella degradazione della LSU