Development of tools for the detection of Ditylenchus dipsaci on alfalfa seeds | Dityluz - Acquisition d’outils méthodologiques pour la détection et la quantification du nématode des tiges, Ditylenchus dipsaci, sur semences de luzerne (Medicago sativa L.). Mise au point d’un test de viabilité, adaptation de l’échantillonnage et de l’échantillon analysé.

Ce volume regroupe les textes issus du programme Casdar « Semence et Sélection Variétale » finalisés en 2015, 2017 et 2019. Le numéro a été coordonné par le Comité Scientifique du Comité Technique Permanent de la Sélection des plantes cultivées (CTPS).Qualité sanitaire des semences et plants

anglais. In Europe the stem nematode, Ditylenchus dipsaci was, until 14 December 2019, a quarantine pest onalfalfa seeds (then it will be a RNQP, Regulated Non-Quarantine Pests), and only nematode free-seedscould be marketed. The Dityluz project was based on a multiple and innovative partnership involving thestakeholders from the Seed sector (UFS and GNIS) and Public Research (ANSES, Laboratories ofPathology and Molecular Biology of GEVES) as well as scientific and technical experts (INRAE andFNAMS). A detection method on seed extracts by PCR (SE-PCR) was developed which involves thepooling of all the nematodes from a seed sample into a small volume and then to analyze it by PCR. Themethod was validated in a ring test where performance criteria were evaluated: the detection thresholdwas determined to be 1 D. dipsaci and sensitivity, specificity, accordance and concordance weredetermined at 100%. In addition, a method for assessing the viability of D. dipsaci was also developedand validated according to the evaluation of performance criteria. The results of this project were madeavailable to seed companies and the Official Control Service through the organization of a workshop.Following numerous exchanges between GEVES, SOC, DGAL and ANSES, the method was made officialin the Official Bulletin of the Ministry of Agriculture in November 2020 and applied to GEVES.

français. En Europe, le nématode de la tige, Ditylenchus dipsaci, était jusqu’au 14 décembre 2019, un organismede quarantaine sur les semences de Luzerne (passé cette date, son statut évolue en ORNQ, OrganismeRéglementés Non de Quarantaine) et seules les semences exemptes de nématodes libres pouvaient êtrecommercialisées. Le projet Dityluz repose sur un partenariat multiple et innovant associant les acteurs dusecteur semencier (UFS et GNIS) et de la recherche publique (ANSES, Laboratoires de pathologie etbiologie moléculaire du GEVES) ainsi que des experts scientifiques et techniques (INRAE et FNAMS).Une méthode de détection directe sur semences par PCR (SE-PCR) a été mise au point et consiste àcollecter toute la population de nématodes présents dans un échantillon dans un petit volume et àl'analyser par PCR. La méthode a été validée à travers un test interlaboratoire où les critères deperformance ont été évalués : le seuil de détection a été déterminé à 1 D. dipsaci, la sensibilité, laspécificité, la justesse et la concordance ont été déterminées à 100%. De plus, une méthode d'évaluationde la viabilité de D. dipsaci a également été développée et validée selon l'évaluation des critères deperformance. Les résultats de ce projet ont été mis à la disposition des entreprises semencières et duService Officiel de Contrôle par l'organisation d'un workshop. Suite à de nombreux échanges entre leGEVES, le SOC, la DGAL et l’ANSES, la méthode été officialisée au Bulletin Officiel du ministère encharge de l’Agriculture en Novembre 2020 et appliquée au GEVES