Identificación de mutaciones en los genes HBA2 y HBA1 en pacientes mexicanos con probable talasemia alfa

RESUMEN La talasemia alfa (Tal-α) es una enfermedad genética ocasionada por mutaciones que reducen la expresión de los genes que codifican para la globina α, HBA2 y HBA1; se caracteriza clínicamente por microcitosis (volumen corpuscular medio ˂ 80 fL) e hipocromía (hemoglobina corpuscular media ˂ 27 pg) con un porcentaje normal de HbA2 (≤3.5 %), y su severidad es proporcional al número de genes α afectados. En este estudio, se tamizaron mutaciones frecuentes de los genes HBA2 y HBA1 en 43 pacientes mexicanos con probable Tal-α, por Gap-PCR (-α3.7, -α4.2, --SEA, --FIL, --THAI, --MEDI, -(α)20.5 y αααanti3.7) y ARMS-PCR (αinitGTGα, αIVS1(-5nt)α y αPA(AATAAG)α). Dieciséis de los pacientes presentaron mutaciones (37%): nueve con Tal-α silente (siete αα/-α3.7, uno αα/-α4.2 y uno αα/αIVSI(-5nt)α), cinco con rasgo de Tal-α (dos -α3.7/-α3.7, uno αα/--SEA, uno αα/--FIL y uno αα/--Mex3), uno con enfermedad por HbH (-α3.7/--SEA) y uno con triplicación de genes α (αα/αααanti3.7). Una de las mutaciones se observó por primera vez en nuestra población (-α4.2) y otra es una deleción nueva de 31.1 Kb (--Mex3). La deleción -α3.7 es la mutación más frecuente (60%), y junto a las mutaciones -- SEA, --FIL y αIVSI(-5nt)α comprenden el 90 % de los alelos con mutaciones de los genes HBA2 y HBA1 en México. Aunque la mutación -α3.7 probablemente proviene de diferentes poblaciones, la alta proporción de alelos asiáticos (--SEA y --FIL) y de un alelo mediterráneo (αIVSI(-5nt)α) caracteriza el espectro mutacional de México.

ÍNDICE ÍNDICE DE FIGURAS .............................................................................................................................iii ÍNDICE DE CUADROS ........................................................................................................................... iv ABREVIATURAS, SIGLAS Y SIMBOLOS .................................................................................................. v RESUMEN ............................................................................................................................................ 1 ABSTRACT ............................................................................................................................................ 2 ANTECEDENTES ................................................................................................................................... 3 La hemoglobina ............................................................................................................................... 3 Eritropoyesis .................................................................................................................................... 4 Eritropoyesis adulta ........................................................................................................................ 6 Genes globínicos ............................................................................................................................. 7 Genes globínicos α ...................................................................................................................... 7 Genes globínicos β ...................................................................................................................... 8 Estructura de los genes HBA2 y HBA1 ............................................................................................. 9 Hemoglobinopatías ....................................................................................................................... 11 Talasemia α ................................................................................................................................... 12 Mutaciones causantes de talasemia α ...................................................................................... 12 Fisiopatología de la talasemia α ................................................................................................ 14 Características clínicas de Tal-α ................................................................................................ 16 Síndromes con talasemia α ....................................................................................................... 18 Diagnóstico diferencial de la talasemia α ................................................................................. 19 Diagnóstico molecular de la talasemia α .................................................................................. 20 Epidemiologia de la talasemia α ................................................................................................... 22 Talasemia alfa en América ............................................................................................................ 24 Talasemia α en México .................................................................................................................. 26 Laboratorio Bioquímica II .......................................................................................................... 27 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................................................................... 29 JUSTIFICACIÓN .................................................................................................................................. 29 OBJETIVOS ......................................................................................................................................... 30 Objetivo general ............................................................................................................................ 30 Objetivos particulares ................................................................................................................... 30 MATERIALES Y MÉTODOS .................................................................................................................. 31 Tipo de estudio .............................................................................................................................. 31 ii Universo de estudio ...................................................................................................................... 31 Criterios de inclusión ..................................................................................................................... 31 Criterios de exclusión .................................................................................................................... 31 Pacientes seleccionados ................................................................................................................ 32 Identificación de mutaciones de los genes HBA2 y HBA1 ............................................................. 32 Identificación de la deleción -α3.7 .............................................................................................. 33 Identificación de la deleción -α4.2 .............................................................................................. 35 Identificación de deleciones α0 ................................................................................................. 36 Identificación de triplicación de los genes α ............................................................................. 38 Identificación de alelos no delecionales ................................................................................... 39 RESULTADOS ..................................................................................................................................... 41 Identificación de la deleción -α3.7 .................................................................................................. 41 Identificación de la deleción -α4.2 .................................................................................................. 41 Identificación de deleciones α0 ..................................................................................................... 42 Identificación de la triplicación αααanti3.7 ...................................................................................... 44 Identificación de mutaciones puntuales ....................................................................................... 44 Frecuencias genotípicas ................................................................................................................ 44 Frecuencias alélicas ....................................................................................................................... 46 Actualización del espectro mutacional de Tal-α en México ......................................................... 47 Fenotipo hematológico y bioquímico ........................................................................................... 47 DISCUSIÓN ......................................................................................................................................... 49 CONCLUSIONES ................................................................................................................................. 53 LITERATURA CITADA .......................................................................................................................... 54 ANEXOS ............................................................................................................................................. 61 Anexo 1 .......................................................................................................................................... 61 Anexo 2 .......................................................................................................................................... 62