Etude expressionnelle de gènes impliqués dans la fusion des myocytes au cours de la régénération musculaire chez la truite

Engineering school

anglais. The muscle is composed of myofibers, having a remarkable growth and regenerationcapacity. This capacity require a particular type of stem cells : the satellites cells. These cellsgenerate muscular precursors (myoblasts) that will proliferate in myocytes and merge, either withexisting fibers : hypertrophy phenomenon in which the fiber grow, or with other myocytes :hyperplasia phenomenon in which new fibers are formed.The identification of genes involved in the merge of myocytes (Naa15a and Wisp1a) wascarried out. My purpose in this internship was to caracterize the kinetics of expression of thesegenes and the fibers regeneration evolution in a phenotypic point of view, by measuring these genesexpression by qPCR and by observing under a microscope some muscular injured fibers, atdifferent times of completion of the regeneration.Our results show that destroyed fibers degenerate during 16 days, and that after theirdisappearance, new fibers are formed by hyperplasia. Studied genes express themselves from day16 and keep expressing more and more.In conclusion, our results show that during a muscle injury in fish, the muscle regenerate bynew fibers formation. These results allow to confirm the implication of the new identified genes inthe merge of myocytes.

français. Le muscle est constitué de myofibres qui possèdent une capacité remarquable de croissanceet régénération. Cette capacité nécessite un type particulier de cellules souches : les cellulessatellites. Celles-ci génèrent des précurseurs musculaires (myoblastes) qui vont proliférer enmyocytes et fusionner, soit avec des fibres existantes : phénomène d'hypertrophie où la fibre grossit,soit entre eux : phénomène d'hyperplasie où il y a formation de nouvelles fibres.L'identification de gènes impliqués dans la fusion des myocytes (Naa15a et Wisp1a) a étéeffectuée. L'objectif de mon stage est de caractériser la cinétique d'expression de ces gènes etl'évolution de la régénération des fibres musculaires d'un point de vue phénotypique, et ce enmesurant l'expression de ces gènes par qPCR et en observant au microscope des fibres musculaireslésées, à différents temps d'avancement de la régénération.Nos résultats montrent que les fibres détruites dégénèrent pendant 16 jours, puis qu'aprèsleur disparition de nouvelles fibres sont formée par hyperplasie. Les gènes étudiés quand à eux,s'expriment à partir du 16ème jour et continuent de s'exprimer de plus en plus.En conclusion, nos résultats montrent que lors d'une lésion du muscle chez le poisson, celuicise régénère par formation de nouvelle fibres. Ces résultats permettent également de confirmerl'implication des gènes nouvellement identifiés dans la fusion des myocytes.