Avaliação dos impactos do pólen de milho geneticamente modificado (Bt) sobre colônias de Apis Mellifera L.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2014.

Estudos que abordam os efeitos de Organismos Geneticamente Modificados (OGMs) sobre a abelha Apis mellifera em sua maioria avaliam os efeitos letais por meio de análises laboratoriais com larvas ou abelhas adultas individualmente, as quais são alimentadas com proteína Cry purificada ou pólen Bt. Poucos estudos avaliam os efeitos subletais dos OGMs sobre as abelhas, especialmente os relacionados com a sanidade apícola. O objetivo deste trabalho foi avaliar os eventuais efeitos da alimentação com pólen de milho Herculex® (Evento TC1507) sobre o desenvolvimento das colônias e sobre a sanidade apícola de A. mellifera. Para tanto foram analisados: o comportamento higiênico das abelhas (CH); a infestação de ácaro Varroa destructor e do fungo Nosema ceranae; o desenvolvimento das colônias e a detecção da presença da proteína Cry1F no pólen e nas larvas. O experimento foi realizado no mês de março de 2014 em um apiário localizado no município de Florianópolis -SC-BR. Ao todo foram utilizadas 20 colméias tipo Langstroth. Utilizou-se pólen do milho Herculex, que expressa a proteína Cry1F, e de sua respectiva linha isogênica, plantados na Fazenda da Ressacada - UFSC. O experimento continha quatro tratamentos: alimento contendo pólen Bt, alimento contendo pólen da linha isogênica, alimento não contendo pólen, e testemunha. Para a avaliação das variáveis foram utilizadas as técnicas de perfuração de células de crias operculadas para o comportamento higiênico, contagem de ácaros em abelhas operárias adultas, contagem de esporos de Nosema ceranae em abelhas adultas utilizando câmara de Neubauer (hemocitômetro), avaliação da quantidade de quadros de mel, pólen, crias e quadros com cera alveolada para avaliação do desenvolvimento da colônia. Por fim, foi realizada a detecção e quantificação da proteína Cry1F presente no pólen e nas larvas utilizando a técnica Western Blotting. Em relação ao comportamento higiênico, as colônias alimentadas com pólen Bt registraram a menor porcentagem de retirada de larvas mortas (83%) em relação àquelas alimentadas com os demais alimentos (P<0,05). Colônias alimentadas com pólen do milho Bt demonstraram maior infestação de V. destructor. Não foram verificadas diferenças significativas em relação ao desenvolvimento das colônias e à infestação e N. ceranae. Foi verificada a presença da proteína Cry1F em todas as amostras de larvas das colônias que receberam alimento contendo pólen Bt. A metodologia empregada no presente trabalho, incluindo a metodologia para amostragem, desenho experimental, fornecimento de alimento e procedimentos para análise dos fatores, mostrou-se eficiente para avaliar os possíveis efeitos subletais sobre as abelhas e os possíveis impactos dos OGMs sobre a sanidade apícola.<br>

Abstract : Studies about the effects of genetically modified organisms (GMOs) the honeybee Apis mellifera mostly evaluate lethal effects by means of laboratory testing with larvae or adult bees individually, which are fed with purified protein Cry or Bt pollen. Very few studies assess the sublethal effects of GMOs on bees, especially those related to apiculture health. In this context, the aim of this study was to evaluate the possible effects of feeding with Bt corn pollen (event TC1507, commercially known as Herculex) on the development of the colonies and about the sanity of bee A. mellifera. For both were analyzed: the hygienic behavior of the bees (CH); the infestation of Varroa destructor mite and Nosema ceranae; the development of the colonies and the presence of Cry1F protein in the pollen and larvae. The experiment was accomplished in March 2014 in an Apiary located in the municipality of Florianópolis. In all, was use 20 beehives of type Langstrot. We used corn pollen Herculex, which expresses the Cry1F protein, and its respective key isogenic line, planted at Fazenda da Ressacada-UFSC. The experiment contained four treatments, being they: food containing Bt pollen, food containing isogenic line pollen, food containing no pollen, and witness treatment. Drilling techniques cell operculated pups for analysis of hygienic behavior, counting mites on adult worker bees, counting Nosema ceranae spores in adult bees using a Neubauer cam (hemocytometer), evaluation of the amount frames of honey, pollen, operculated create and larvae cells and frames with beeswax to evaluate development of the colony, and finally, the detection and quantification of Cry1F protein present in pollen and larvae using Western Blotting. Significant differences (P <0.05) were found in relation to hygienic behavior and V. destructor mite infestation. Regarding the hygienic behavior, colonies fed with Bt pollen had the lowest percentage of removal of dead larvae (83%) compared to those fed other diets. As for V. destructor, Bt pollen fed colonies obtained greater infestation, and those subjected to the other treatments no difference. No significant differences were observed in relation to the development of the colonies and the infestation and n. ceranae. It was verified the presence of Cry1F protein in all samples of larvae of the colonies that received food containing Bt pollen. The methodology employed in this work, including the methodology for sampling, experimental design, supply of food and procedures for analysis of factors, has proved efficient to assess the possible sublethal effects on bees and possible impacts of GMOs on the apiculture health.