Viabilidade do uso de ovos de Mythimna sequax (Franclemont, 1951) (Lepidoptera: Noctuidae) e Anticarsia gemmatalis Hubner (Lepidoptera: Erebidae) estocados em nitrogênio líquido para a produção massal de Trichogramma Westwood (Hymenoptera: Trichogrammatidae)

Orientador : Dr. Luis Amilton Foerster

Co-orientada : Profa. Dra. Marion do Rocio Foerster

Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 11/03/2016

Inclui referências : f. 103-112

Área de concentração: Produção vegetal

Resumo: Este estudo teve por objetivo avaliar a viabilidade da estocagem de ovos de Mythimna sequax em nitrogênio líquido visando a produção massal de Trichogramma. A tese foi dividida em quatro capítulos, sendo o primeiro destinado à realização de estudos de base visando incrementar os índices de parasitismo e emergência de Trichogramma em ovos de M. sequax estocados em nitrogênio líquido. Foram avaliadas a influência da densidade de fêmeas de Trichogramma pretiosum no parasitismo de ovos estocados por 15 dias e o desempenho de fêmeas criadas em ovos estocados durante três gerações e comparadas com fêmeas criadas em ovos não estocados, a fim de verificar a necessidade de manter uma linhagem de Trichogramma criada em ovos estocados. No segundo capítulo, foi estudado a influência de ovos de M. sequax, tratados com crioprotetores antes do congelamento em nitrogênio líquido e ofertados ao parasitismo por T. pretiosum. Os ovos foram tratados com dimetilsulfóxido (DMSO), glicerol, sacarose, etilenoglicol e leite desnatado para criopreservação. O parasitismo destes ovos foi comparado com ovos não tratados estocados e não estocados. No terceiro capítulo, avaliou-se a capacidade reprodutiva de Trichogramma atopovirilia, Trichogramma exiguum, Trichogramma galloi e T. pretiosum em ovos de M. sequax estocados em nitrogênio líquido para determinar as espécies que apresentam melhor aceitação dos ovos estocados em nitrogênio líquido. Enquanto que no quarto capítulo, foram comparados os índices de parasitismo e emergência de T. pretiosum em ovos de Anticarsia gemmatalis e M. sequax estocados em nitrogênio líquido. Posteriormente foram determinados e quantificados por meio de espectroscopia de ressonância magnética nuclear (RMN) os metabólitos trealose, fosfocolina e maltodextrina presentes nos ovos desses dois hospedeiros. Após esses experimentos foram avaliadas a influência do tempo de estocagem (um, três, seis, nove e 12 meses) de ovos de M. sequax em nitrogênio líquido no parasitismo por T. atopovirilia e T. pretiosum. Com base nesses estudos verificou-se que a densidade ideal para os experimentos com T. pretiosum foi de uma fêmea para dez ovos; e que não há necessidade de manter uma linhagem de Trichogramma a partir de ovos estocados, pois não houve diferença nos parâmetros biológicos. Não há necessidade da adição de crioprotetores antes da estocagem dos ovos, uma vez que os maiores índices de parasitismo foram obtidos em ovos sem tratamento prévio. As espécies que mais se destacaram no parasitismo de ovos estocados foram T. atopovirilia e T. pretiosum. Ovos de A. gemmatalis não são viáveis à estocagem em nitrogênio líquido e apresentaram menor quantidade de trealose e maltodextrina do que os ovos de M. sequax, sendo que estes foram viáveis para estocagem em nitrogênio líquido por até 12 meses sem afetar os parâmetros biológicos das espécies de Trichogramma avaliadas.

Abstract: This study aimed to evaluate the viability of Mythimna sequax stored eggs in liquid nitrogen for the mass production of Trichogramma. The thesis was divided into four chapters, the first for the performing baseline studies to increase the parasitism and emergence of Trichogramma on M. sequax eggs stored in liquid nitrogen. The influence of the density of Trichogramma pretiosum females on parasitism of eggs stored for 15 days was evaluated. The performance of females reared for three generations on stored eggs was compared to females reared on nonstored eggs, to identify possible alterations in the parasitism capacity of stored produced adults in relation to non-stored ones. In the second chapter, has studied the influence of M. sequax eggs treated with cryoprotectants before freezing in liquid nitrogen and offered to parasitism by T. pretiosum. The eggs were treated with dimethyl sulfoxide (DMSO), glycerol, sucrose, ethylene glycol and skim milk for cryopreservation. The parasitism of the eggs was compared to eggs untreated stored and non- stored. In the third chapter, we evaluated the reproductive capacity of Trichogramma atopovirilia, Trichogramma exiguum, Trichogramma galloi and T. pretiosum from eggs of M. sequax stored in liquid nitrogen to determine the species with better acceptance of eggs stored in liquid nitrogen. In the fourth chapter the parasitism and emergence of T. pretiosum was compared on Anticarsia gemmatalis and M. sequax eggs stored in liquid nitrogen. After The trehalose metabolites, phosphocholine and maltodetrina present in eggs of these two hosts were determined and quantified by means of nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). After these experiments were evaluated the influence of storage time (one, three, six, nine and 12 months) of M. sequax eggs in liquid nitrogen in parasitism by T. atopovirilia and T. pretiosum. Based on these studies it was found that the ideal density for the experiments with T. pretiosum was a female per ten eggs; and there is no need to maintain a Trichogramma strain from eggs stored because there was no difference in biological parameters. There is no need for the addition of cryoprotectant prior to storage of eggs, since the larger parasitism were obtained from untreated eggs.The species that stood out in the parasitism of stored eggs were T. atopovirilia and T. pretiosum. Anticarsia gemmatalis eggs are not viable for storage in liquid nitrogen and had lower amount of trehalose and maltodextrin than the M. sequax eggs, and these were viable for storage in liquid nitrogen for up to 12 months without affecting the biological parameters of assessed species of Trichogramma.