Desarrollo de inmunoensayos de flujo lateral para la detección rápida de Legionella pneumophila en aguas de red | Development of lateral flow immunoassays for the rapid detection of Legionella pneumophila in distribution water systems | Desenvolupament d'immunoassaigs de flux lateral per a la detecció ràpida de Legionel·la pneumophila en aigües de xarxa

[ES] La legionelosis es una enfermedad infecciosa causada por Legionella pneumophila, una bacteria gramnegativa que prolifera en instalaciones industriales como torres de refrigeración, sistemas de climatización, spas o redes de agua caliente sanitaria. La necesidad de detectar su presencia de forma rápida y fiable ha impulsado el desarrollo de herramientas bioanalíticas que permitan un control más accesible y descentralizado. Este trabajo se enmarca dentro de un proyecto financiado por Fondos Europeos de Desarrollo Regional 2021-2027 y la Agencia Valenciana de Innovación (INNEST/2023/127) y tiene como objetivo el diseño y desarrollo de herramientas biotecnológicas para la detección de patógenos. En particular el Trabajo de fin de grado se centra en el diseño y desarrollo de inmunoensayos de flujo lateral (LFIA) para la detección de Legionella en aguas de red y aguas industriales. Esta tecnología, ampliamente utilizada en el ámbito clínico por su simplicidad, rapidez, bajo coste y, fácil interpretación, se propone como método de cribado, especialmente, cuando se requiere una respuesta temprana. El presente trabajo aborda la producción de inmunorreactivos, como anticuerpos policlonales, síntesis de nanopartículas de oro, conjugación de anticuerpos a nanomateriales, preparación de tiras reactivas y evaluación analítica del LFIA desarrollado. Este enfoque tiene como objetivo reforzar la vigilancia microbiológica mediante el uso de herramientas de cribado rápido que permitan detectar in situ y de forma temprana posibles contaminaciones, contribuyendo así al cumplimiento de las normativas vigentes en materia de calidad del agua y ofreciendo una solución ágil, fiable y aplicable tanto en entornos industriales como en estrategias de salud pública.

[EN] Legionellosis is an infectious disease caused by Legionella pneumophila, a Gram-negative bacterium that proliferates in industrial facilities such as cooling towers, air conditioning systems, spas, or domestic hot water networks. The need for rapid and reliable detection of its presence has driven the development of bioanalytical tools that enable more accessible and decentralized monitoring. This work is part of a project funded by the European Regional Development Funds 2021–2027 and the Valencian Innovation Agency (INNEST/2023/127), aimed at designing and developing biotechnological tools for pathogen detection. Specifically, this Bachelor’s Thesis focuses on the design and development of lateral flow immunoassays (LFIA) for the detection of Legionella in network and industrial water. This technology, widely used in clinical settings due to its simplicity, speed, low cost, and ease of interpretation, is proposed as a screening method, especially in situations that require an early response. The present work addresses the production of immunoreagents such as polyclonal antibodies, the synthesis of gold nanoparticles, antibody conjugation to nanomaterials, the preparation of test strips, and the analytical evaluation of the developed LFIA system. The final assay achieved detection limits of 36 cfu/mL with gold nanoparticles and 20 cfu/mL with latex nanoparticles, thus falling within the practical range of action established by current regulations. This approach aims to strengthen in situ microbiological monitoring through the use of rapid screening tools that allow early detection of potential contamination, contributing to compliance with water quality regulations and offering a fast, reliable, and applicable solution for both industrial settings and public health strategies. This project aligns with several Sustainable Development Goals (SDGs). In particular, it directly contributes to SDG 3 (Good health and well-being), by improving the response capacity to microbiological risks that affect public health, and to SDG 6 (Clean water and sanitation), through the strengthening of water quality control systems. Additionally, it is related to SDG 9 (Industry, innovation and infrastructure), with a medium level of impact, by promoting the development and application of innovative technologies in the field of environmental monitoring.

Ortolá Valls, R. (2025). Desarrollo de inmunoensayos de flujo lateral para la detección rápida de Legionella pneumophila en aguas de red. https://riunet.upv.es/handle/10251/223868

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