PL: Ocena wybranych funkcji efektorowych przeciwciał mono- oraz poliklonalnych anty-rOMP40 Histophilus somni | EN: Evaluation of selected effector functions of mono- and polyclonal anti-rOMP40 Histophilus somni antibodies

abstractPL: Terapie z wykorzystaniem przeciwciał wypierają antybiotyki, które przyczyniają się do powstawania szczepów antybiotykoodpornych. Celowane zastosowanie przeciwciał pozwala ograniczyć efekty uboczne, stanowiąc bierną immunoterapię. Badane w tej pracy przeciwciała monoklonalne scFv anty-rOMP40 Histophilus somni oraz poliklonalne anty-rOMP40 H. somni wytworzone zostały z zamysłem uzyskania przeciwciała swoistego wobec wysoce zachowawczej wśród bakterii Gram-ujemnych sekwencji białka błonowego OMP o masie 40 kDa pochodzącego od bakterii H. somni. W poniższej pracy ocenie poddano wybrane funkcje efektorowe uzyskanych przeciwciał, wśród których znalazło się rozpoznanie antygenu w formie natywnej, jak i zdenaturowanej, badanie ich wpływu na wzrost bakterii H. somni, zdolność do aktywacji dopełniacza na drodze klasycznej oraz ich wpływ na proces wspomaganej fagocytozy. Wykazano wysokie powinowactwo badanych przeciwciał do rekombinowanego białka OMP40, oraz jego natywnej formy obecnej na powierzchni komórek bakteryjnych. Zaobserwowano także hamujący wpływ obu przeciwciał na wzrost bakterii H. somni w podłożu płynnym. Nie stwierdzono jednak wpływu dodatku żadnego z powyższych przeciwciał na stopień aktywacji składowych dopełniacza na drodze klasycznej oraz ich zdolności do wspomagania fagocytozy we krwi bydlęcej. Uzyskane wyniki badań in vitro, które nie w pełni odzwierciedlają warunki fizjologiczne, nie wykluczają potencjalnych możliwości zastsowania badanych przeciwciał w eksperymentach z wykorzystaniem zwierząt.

abstractEN: Therapies using antibodies are replacing antibiotics, which contribute to the emergence of antibiotic-resistant strains. The targeted use of antibodies allows side effects to be limited, providing passive immunotherapy. In this study, scFv monoclonal antibodies anti-rOMP40 Histophilus somni and polyclonal anti-rOMP40 H. somni were developed with the aim of obtaining a specific antibody against the highly conserved among Gram-negative bacteria sequence of the 40 kDa OMP membrane protein originating from H. somni bacteria. In this study, selected effector functions of the obtained antibodies were evaluated, including antigen recognition in native and denatured form, examination of their effect on the growth of H. somni bacteria, ability to activate complement via the classical pathway, and their effect on the process of complement-enhanced phagocytosis. High affinity of the tested antibodies to recombinant OMP40 protein and its native form present on bacterial cell surfaces was demonstrated. A inhibitory effect of both antibodies on the growth of H. somni bacteria in liquid medium was also observed. However, no effect of either antibody addition was found on the degree of activation of complement components via the classical pathway or their ability to support phagocytosis in bovine blood. The results of in vitro studies, which do not fully reflect physiological conditions, do not exclude the potential use of the tested antibodies in experiments involving animals.

status: finished