Analysis of the ketamine binding to total plasma protein from domestic cats | Análise da ligação da cetamina às proteínas plasmáticas totais de gatos domésticos

portugais. A cetamina é um medicamento versátil amplamente utilizado nos ambientes clínico e hospitalar veterinário. A avaliação dos parâmetros de ligação da cetamina às proteínas plasmáticas totais de gatos domésticos fornece informações necessárias na determinação do parâmetro farmacocinético denominado volume de distribuição, o qual é utilizado para a prospecção de concentrações do medicamento em estudos clínicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a taxa de ligação da cetamina às proteínas plasmáticas totais, sua constante (Kb), e modo de ligação à albumina sérica em gatos. Após a aprovação do projeto pelo CEUA/UEM (protocolo 3292020621), uma mistura de plasma de seis animais (n=6) foi reforçada com concentrações de cetamina visando ultrafiltração com membrana de 10 kDa. Os níveis do fármaco antes e depois da ultrafiltração foram analisados pela técnica de Cromatografia Líquida acoplada a Espectrometria de Massas (LC-MS/MS) e os resultados utilizados para calcular a taxa de ligação e a constante de ligação à albumina pelo gráfico de Scatchard. Simulações de docking identificaram os mais prováveis sítios de ligação à proteína. A taxa de ligação da cetamina foi de 65% quando o fármaco atingiu concentrações plasmáticas acima de 300 ng.mL-1, e a constante de ligação foi de 2×106 mol.L–1 com coeficiente de Hill (nH) de 2,3. Estes resultados mostram uma boa correlação entre os parâmetros físico-químicos do fármaco com a avaliação estrutural por meio de docking, além de coerência com os valores relatados por outras metodologias. Este trabalho traz informações sobre o comportamento de ligação da cetamina em proteínas plasmáticas de gatos, parâmetro importante para futuras avaliações farmacocinéticas na busca de melhores protocolos para uso clínico deste medicamento na área veterinária.

anglais. Ketamine is a versatile veterinary, clinical, and hospital drug. Evaluating the binding parameters of ketamine to total plasma proteins from domestic cats provides necessary information in determining the value of the pharmacokinetic parameter named distribution volume, which is used for the consequent prospection of drug concentrations in clinical trials. This work aimed to evaluate the binding rate of ketamine to total plasma proteins, the binding constant, and the binding mode to serum albumin in cats. After approval of the project by CEUA/UEM (protocol 3292020621), a plasma pool from six animals (n=6) was reinforced with ketamine concentrations aiming for ultrafiltration with a 10 kDa cutoff membrane device. The drug levels before and after ultrafiltration were analyzed using the liquid chromatography-mass spectrometry technique (LC- MS/MS). The results were calculated using a Scatchard plot to calculate the binding rate and binding constant to albumin. Docking simulations identified the most likely albumin-binding sites. The ketamine binding rate was 65% when the drug reached a plasma concentration above 300 ng⋅mL-1, and the binding constant (Kb) was 2×106 mol⋅L–1 with a positive Hill coefficient (nH) of 2.3. These results show a good correlation between the physicochemical parameters of the drug with structural evaluation by docking simulations and coherence with the values reported by other methodologies in recent literature. This work brought data on the ketamine-binding behavior in cats, an important parameter for future pharmacokinetic evaluations in the search for better protocols for the clinical use of this drug in veterinary medicine.