The aim of the present study was the evaluation of whether the age or the estrous cycle phase would influence the quantity and/or quality of oocytes and in vitro embryo production. Oocytes from ovaries of 63 Holstein- Friesian slaughtered cows, aging between 1 and 15 years old, were divided into 5 groups considering their age and then subdivided according to their phase of estrous cycle. The groups were: <2; [2, 4]; [5, 6]; [7, 8] and >;8 years old. The estrous cycle phase (lutheal or follicular) was evaluated by the presence or absence of a functional corpus luteum. The cumulus-oocyte-complex (COC's) was divided in classes A, B, C and D according to their morphological aspect. The COC's classed as C and D were excluded, being the COC's classed as A and B matured in vitro and fertilized. As result of the study, it was observed that the number of total produced COC's was directly proportional to the age of the cow (R=0,99 - P<0,001). It has also noticed that cows in the lutheal phase produced more COC's than cows in the follicular phase (P<0,001), respectively 7,05 ± 0,11 and 10,87 ± 1,01. The COC's quality augmented from the group of cows aging less than 2 years to cows aging between [7, 8] years old, with a positive correlation (R = 0.94 p<0.01) starting then to decrease. It was also realized that cows in the lutheal phase produced better COC's quality than cows in the follicular phase (6,77 ± 0,64 e 3,84± 0,64; respectively). In what cleavage rate is concerned, better results were achieve with cows in lutheal phase (59,03%) then in follicular phase (45,52%). It was also possible to notice a better embryo production in cows in the lutheal phase (44,23%) then cows in the follicular phase. The results of the present study allow to conclude that there is a relation between the age and the estrous cycle stage in the quality and quantity of COC's and in vitro produced bovine embryos. | O objetivo do presente trabalho, foi o estudo dos efeitos da idade e da fase do ciclo estral dos bovinos na quantidade e qualidade de ovócitos e de embriões produzidos in vitro. Para isso, foram utilizados ovócitos de 63 vacas da raça Holstein-Friesian abatidas em matadouro, com idades compreendidas entre 1 e 15 anos, as quais foram divididas em 5 lotes de acordo com a idade. Cada lote foi subdividido de acordo com a fase do ciclo estral em que o animal se encontrava no dia do abate, pela presença ou não de corpo lúteo funcional na superfície do ovário. Os lotes referentes à idade foram: <2; [2,4]; [5,6]; [7, 8] e >;8 anos. Após punção dos folículos, os ovócitos foram divididos nas classes A, B, C e D, tendo em conta o seu aspecto morfológico, em que apenas os de classe A e B foram usados para a FIV. Observou-se que o número de ovócitos produzidos foi diretamente proporcional à idade das vacas (R=0,99 - P<0,001). Quanto à fase do ciclo estral, as vacas em fase luteínica, produziram maior número de ovócitos que as vacas em fase folicular (P<0,001), respetivamente 7,05 ± 0,11 e 10,87 ± 1,01. Relativamente à qualidade dos ovócitos em função da idade das vacas, observou-se uma correlação positiva (R = 0,94 p<0,01) até aos [7, 8] anos, começando a baixar a partir desta idade. As vacas em fase luteínica produziram ovócitos de melhor qualidade relativamente às vacas em fase folicular (6,77 ± 0,64 e 3,84± 0,64; respetivamente). Quanto à quantidade de zigotos que clivaram, esta foi superior para os lotes de vacas em fase luteínica em comparação com os de vacas em fase folicular (59,03% e 45,52%; respetivamente), observando-se ainda que as vacas em fase luteínica produziram igualmente, em geral, maior número de embriões aos 7 dias após FIV que as vacas em fase folicular(44,23% e 31,48%; respetivamente). Os resultados do presente trabalho permitem concluir que existe uma estreita relação entre a idade e a fase do ciclo estral das vacas e a quantidade e qualidade dos ovócitos e de embriões produzidos in vitro.

No sistema de PIV em bovinos, tem sido obtida uma elevada porcentagem de embriões machos. Este experimento foi realizado para determinar se a presença de glicose no meio de cultivo afeta a proporção macho:fêmea (M:F) dos embriões bovinos PIV a partir da FIV com espermatozóides preparados pelos métodos do swim-up (S) ou do gradiente de Percoll (P). Após a MIV, os COCs foram divididos em dois grupos e inseminados com espermatozóides preparados por um dos métodos. Os zigotos foram cultivados em meio com ou sem 5,56mM de glicose, totalizando 4 tratamentos: S-Gli, S+Gli, P-Gli e P+Gli e 48h após a inseminação, os embriões de cada tratamento foram submetidos à sexagem por PCR (n=845). O efeito da glicose no meio de cultivo sobre a proporção M:F dos embriões PIV a partir dos dois métodos foi semelhante (teste do c²), resultando em uma porcentagem de machos menor do que 50% no estágio de 2-C (S: 30,8%; P: 23,8%: P&lt;0,01) e maior do que 50% no estágio de 8-C (S: 79,4%; P: 68,8%: P&lt;0,01). Estas porcentagens foram diferentes (P&lt;0,05) das observadas quando os embriões foram cultivados sem glicose, tanto no estágio de 2-C (S: 48,5%; P: 41,5%) como no de 8-C (S: 62,5%; P: 50,8%). A presença de glicose não afetou a proporção M:F no total de embriões produzidos (S: 56,7%; P: 49,0%), que foi semelhante à observada na ausência de glicose (S: 55,7%; P: 46,2%). Portanto, a glicose exacerbou a diferença na velocidade de desenvolvimento entre os embriões machos e fêmeas. | In the bovine IVP system, it has been obtained a high percentage of male embryos. This experiment was carried ou to determine if the glucose presence in the culture medium affects the sex ratio of bovine embryos IVP from the IVF with spermatozoa prepared for the swim-up (S) or Percoll gradient (P) methods. After the IVM, the COCs had been divided in two groups and inseminated with spermatozoa prepared for one of the methods. The zygotes had been cultivated in medium with or without 5.56mM of glucose, totalizing 4 treatments: S-Glu, S+Glu, P-Glu and P+Glu, and 48h post-insemination, the embryos of each treatment had been sexed for the PCR method (n=845). The effect of glucose in the culture medium on sex ratio of embryos IVP from the two methods was similar (c² test), resulting in a percentage of males lower than 50% in the 2-C stage (S: 30.8%; P: 23.8%: P&lt;0.01) and higher than 50% in the 8-C stage (S: 79.4%; P: 68.8%: P&lt;0.01). These percentages were different (P&lt;0.05) of the observed when the embryos were cultivated without glucose, as much in the 2-C stage (S: 48.5%; P: 41.5%) as in the 8-C stage (S: 62.5%; P: 50.8%). The glucose presence did not affect the sex ratio in the total of produced embryos (S: 56.7%; P: 49.0%), that was similar to the observed in the glucose absence (S: 55.7%; P: 46.2%). Therefore, the glucose exacerbated the difference in the development speed between the female and male embryos.

No sistema de PIV em bovinos, tem sido obtida uma elevada porcentagem de embriões machos. Este experimento foi realizado para determinar se a presença de glicose no meio de cultivo afeta a proporção macho:fêmea (M:F) dos embriões bovinos PIV a partir da FIV com espermatozóides preparados pelos métodos do swim-up (S) ou do gradiente de Percoll (P). Após a MIV, os COCs foram divididos em dois grupos e inseminados com espermatozóides preparados por um dos métodos. Os zigotos foram cultivados em meio com ou sem 5,56mM de glicose, totalizando 4 tratamentos: S-Gli, S+Gli, P-Gli e P+Gli e 48h após a inseminação, os embriões de cada tratamento foram submetidos à sexagem por PCR (n=845). O efeito da glicose no meio de cultivo sobre a proporção M:F dos embriões PIV a partir dos dois métodos foi semelhante (teste do c²), resultando em uma porcentagem de machos menor do que 50% no estágio de 2-C (S: 30,8%; P: 23,8%: P<0,01) e maior do que 50% no estágio de 8-C (S: 79,4%; P: 68,8%: P<0,01). Estas porcentagens foram diferentes (P<0,05) das observadas quando os embriões foram cultivados sem glicose, tanto no estágio de 2-C (S: 48,5%; P: 41,5%) como no de 8-C (S: 62,5%; P: 50,8%). A presença de glicose não afetou a proporção M:F no total de embriões produzidos (S: 56,7%; P: 49,0%), que foi semelhante à observada na ausência de glicose (S: 55,7%; P: 46,2%). Portanto, a glicose exacerbou a diferença na velocidade de desenvolvimento entre os embriões machos e fêmeas.