Toxocara vitulorum is a nematode parasite of the small intestine of cattle and water buffaloes, particularly buffalo calves between one and three months old, causing high morbidity and mortality. The purpose of this research was the characterization of soluble larval extract (Ex) antigen of T. vitulorum by Sds-page and Western blotting (WB) using immune sera and colostrum of buffaloes naturally infected by T. vitulorum. The parasitological status of the buffalo calves was also evaluated using sequential fecal examinations. The results showed that this antigen revealed eleven (11, 13, 16, 22, 25, 32, 43, 53, 68, 82 and 96 kDa) polypeptide bands by SDS-PAGE. Five polypeptide bands of higher molecular weight (43, 53, 68, 82 and 96 kDa) were recognized by sera and colostrum of all groups of infected animals when analyzed by WB. But only the fractions of 53, 68, 82, and 96 kDa that were more prominent persisted in the groups of buffalo calves during the beginning of the infection, at the peak of egg output, as well as during the period of rejection and post-rejection of T. vitulorum by the feces of the calves. On the other hand, sera of buffalo calves at one day old, after suckling the colostrum and at the beginning of infection, reacted with the same bands detected by serum and by colostrum of the buffalo cows. | Toxacara vitulorum é um nematódeo que acomete principalmente bezerros búfalos na faixa etária de um a três meses de vida, causando grande morbidade ou mortalidade quando não tratados. A pesquisa objetivou a obtenção do antígeno extrato larval solúvel bruto (Ex) de larvas infectantes de T. vitulorum, bem como a separação das frações antigênicas pelo SDS-PAGE e pelo "Western blotting" (WB), utilizando-se soros imunes e colostros de búfalos naturalmente infectados com T. vitulorum. O acompanhamento do quadro parasitário dos bezerros búfalos também foi realizado. Pôde-se verificar que o antígeno revelou 11 (11, 13, 16, 22, 25, 32, 43, 53, 68, 82 e 96 kDa) bandas protéicas. Quando analisadas pelo WB, cinco dessas bandas (43, 53, 68, 82 e 96 kDa) foram reconhecidas pelos anticorpos presentes nas amostras de soros e de colostros das búfalas e de soros dos bezerros búfalos com um de vida após mamarem o colostro. No entanto, somente as bandas de 53 a 96 kDa que foram as mais evidentes persistiram nos grupos de bezerros búfalos que se encontravam tanto no pico da infecção como no período de expulsão ou pós-expulsão dos helmintos adultos do intestino. As bandas antigênicas de 68 e de 92 kDa, por serem as mais proeminentes podem ser consideradas componentes para futuras vacinas contra T. vitulorum em búfalos.

Três grupos de camundongos foram imunizados com os seguintes antígenos de Toxocara vitulorum : fluido perientérico (Pe) do parasita adulto, antígenos extrato solúvel bruto (Ex) e excretor/secretor (ES) de larvas infectantes. Estes três grupos foram comparados com o grupo controle, não imunizado. Todos os grupos foram desafiados uma semana após a imunização com ovos infectantes deste parasita e necropsiados em três períodos diferentes após o desafio: sete horas, quatro dias e 30 dias pós-infecção. Realizou-se a contagem de ovos e de larvas nas fezes dos camundongos e o grupo imunizado com antígeno do fluído perientérico (Pe) foi o que eliminou a maior quantidade de larvas. Após a necropsia, realizou-se a retirada do intestino delgado, intestino grosso, fígado, pulmão, coração, cérebro e músculos (diafragma, língua e quadríceps femoral). Estes tecidos sofrearam digestão péptica e as larvas foram identificadas e contadas em cada um deles. O maior número de larvas foi encontrado no intestino grosso no período de sete horas após o desafio, em todos os grupos examinados, porém, este número foi significativamente inferior nos grupos imunizados. Com quatro dias após o desafio, as larvas concentravam-se, preferencialmente, no fígado e pulmões, e os grupos imunizados apresentaram uma quantidade muito menor de larvas, significativo para o fígado e pulmão em relação ao grupo controle. No período de 30 dias após o desafio, as larvas recuperadas no cérebro e no músculo, mesmo que em pequena quantidade, demonstraram capacidade de alcançar estes tecidos. A efetividade desta imunização baseou-se na redução do número de larvas de T. vitulorum no fígado no quarto dia pós-infecção em relação ao controle, que foi de 86%, 79% e 58% para o antígeno Ex, Pe e ES, respectivamente. O camundongo foi considerado um modelo apropriado para estudar a relação parasita-hospedeiro das infecções por T. vitulorum.

Três grupos de camundongos foram imunizados com os seguintes antígenos de Toxocara vitulorum : fluido perientérico (Pe) do parasita adulto, antígenos extrato solúvel bruto (Ex) e excretor/secretor (ES) de larvas infectantes. Estes três grupos foram comparados com o grupo controle, não imunizado. Todos os grupos foram desafiados uma semana após a imunização com ovos infectantes deste parasita e necropsiados em três períodos diferentes após o desafio: sete horas, quatro dias e 30 dias pós-infecção. Realizou-se a contagem de ovos e de larvas nas fezes dos camundongos e o grupo imunizado com antígeno do fluído perientérico (Pe) foi o que eliminou a maior quantidade de larvas. Após a necropsia, realizou-se a retirada do intestino delgado, intestino grosso, fígado, pulmão, coração, cérebro e músculos (diafragma, língua e quadríceps femoral). Estes tecidos sofrearam digestão péptica e as larvas foram identificadas e contadas em cada um deles. O maior número de larvas foi encontrado no intestino grosso no período de sete horas após o desafio, em todos os grupos examinados, porém, este número foi significativamente inferior nos grupos imunizados. Com quatro dias após o desafio, as larvas concentravam-se, preferencialmente, no fígado e pulmões, e os grupos imunizados apresentaram uma quantidade muito menor de larvas, significativo para o fígado e pulmão em relação ao grupo controle. No período de 30 dias após o desafio, as larvas recuperadas no cérebro e no músculo, mesmo que em pequena quantidade, demonstraram capacidade de alcançar estes tecidos. A efetividade desta imunização baseou-se na redução do número de larvas de T. vitulorum no fígado no quarto dia pós-infecção em relação ao controle, que foi de 86%, 79% e 58% para o antígeno Ex, Pe e ES, respectivamente. O camundongo foi considerado um modelo apropriado para estudar a relação parasita-hospedeiro das infecções por T. vitulorum. | Three groups of mice were immunized agaisnt three different Toxocara vitulorum antigens: perienteric fluid (Pe) of adults and excretory/secretory (ES) and soluble extracts (Ex) of infective larvae. A group of non-immunized animals was considered the control group. All groups were challenged one week after the third immunization with T. vitulorum infective eggs and necropsied at three different periods after the challenge: seven hours, four and 30 days. Eggs and larvae counts in the feces of mice were accomplished and revealed that Pe immunized group eliminated the highest number of larvae. Small and large intestines, liver, lungs, heart, brain and muscle (diaphragm, tongue e quadriceps femoris) were removed, digested by peptical digestion and larvae were identified and counted. The higher number of larvae was found in the large intestine seven hours after the challenge in all examined groups; however, this number was significantly lower in animals of the immunized groups. On day four after the challenge, larvae were more often found in the liver and lungs, and the immunized groups had lower numbers of larvae than in the control groups. On day 30 after the challenge low numbers of larvae were recovered in the brain and muscle. The effective immunization against larval migration based on the rate of reduction of the larvae present in the liver on day four after infection was of 82%, 79% and 58% for Ex, Pe and ES antigen, respectively.

Toxacara vitulorum é um nematódeo que acomete principalmente bezerros búfalos na faixa etária de um a três meses de vida, causando grande morbidade ou mortalidade quando não tratados. A pesquisa objetivou a obtenção do antígeno extrato larval solúvel bruto (Ex) de larvas infectantes de T. vitulorum, bem como a separação das frações antigênicas pelo SDS-PAGE e pelo "Western blotting" (WB), utilizando-se soros imunes e colostros de búfalos naturalmente infectados com T. vitulorum. O acompanhamento do quadro parasitário dos bezerros búfalos também foi realizado. Pôde-se verificar que o antígeno revelou 11 (11, 13, 16, 22, 25, 32, 43, 53, 68, 82 e 96 kDa) bandas protéicas. Quando analisadas pelo WB, cinco dessas bandas (43, 53, 68, 82 e 96 kDa) foram reconhecidas pelos anticorpos presentes nas amostras de soros e de colostros das búfalas e de soros dos bezerros búfalos com um de vida após mamarem o colostro. No entanto, somente as bandas de 53 a 96 kDa que foram as mais evidentes persistiram nos grupos de bezerros búfalos que se encontravam tanto no pico da infecção como no período de expulsão ou pós-expulsão dos helmintos adultos do intestino. As bandas antigênicas de 68 e de 92 kDa, por serem as mais proeminentes podem ser consideradas componentes para futuras vacinas contra T. vitulorum em búfalos.