With the intention of evaluating the influence of pregnancy and puerperium in the leucogram of Saanen goats (Capra hircus), blood samples were taken from 150 goats bred on the State of São Paulo and were allotted into 5 experimental groups of 30 goats each as described: non-pregnant; initial pregnancy (30 to 60 days of pregnancy); middle pregnancy (60 to 120 days of pregnancy); late pregnancy (more than 120 days of pregnancy); kidding goats (until 30 days after parturition). The blood samples were collected with EDTA and submitted to the following tests: total leukocyte counts (in the modified Neubauer hemocytometer, using Thoma's liquid as a dilute); and differential leukocyte count (made up with blood smears and stained with Rosenfeld method). The influence of pregnancy and puerperium on the leucogram was verified due to a gradual decrease on the number of leucocytes further on in pregnancy, reaching its lower values at the end of pregnancy and puerperium. This decrease occurred due to behavior observed on the absolute number of lymphocytes that also decreased further on in pregnancy. Therefore the leucograma became mostly neutrophilic at the end of pregnancy and puerperium. | Para avaliar a influência da gestação e do puerpério sobre os constituintes do leucograma de caprinos da raça Saanen foram colhidas 150 amostras de sangue, distribuídas em 5 grupos com 30 animais cada: cabras não prenhes; fase inicial da gestação (30 -| 60 dias de prenhez); fase média da gestação (60 -| 120 dias de prenhez); fase final da gestação (>; 120 dias de prenhez); e recém-paridas (< 30 dias de puerpério). Nas amostras de sangue, colhidas em frascos contendo EDTA, foi realizada a contagem do número total de leucócitos em câmara de Neubauer, utilizando-se o líquido de Thoma como diluidor e a contagem diferencial de leucócitos,efetuada em esfregaços sangüíneos, corados pelo Método de Rosenfeld. Observou-se a influência da gestação sobre o leucograma, pois o quadro leucocitário foi caracterizado por uma diminuição gradual do número de leucócitos com o avançar da gestação, atingindo seus menores valores no final da gestação e no puerpério. Essa diminuição ocorreu devido ao comportamento observado para o número absoluto de linfócitos, que também diminuiu com a evolução da gestação. Dessa forma, o quadro leucocitário tornou-se, predominantemente, neutrofílico na fase final da gestação e no puerpério.

The improvement of techniques to maximize reproductive potential of females needs the whole comprehension of the controlling mechanisms of follicular development. An alternative for this purpose is the quantification of relative gene expression from those genes involved in recruitment, selection and follicular development, using reverse transcriptase - polymerase chain reaction (RT - PCR). The present study aimed to quantify relative gene expression from insulin-like growth factor I (IGF-I) and follicle stimulating hormone receptor (FSHR) in cattle (Bos primigenius indicus), using as internal control the gliceraldheyde 3 phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene. Ovaries in different estral cycle stages were obtained from slaughtered animals. Total RNA from follicles and ovarian tissue was purified and the RT-PCR conditions were standardized. PCR products were analyzed in ethydium bromide agarose gels and the bands submitted to densitometric analysis. Exponential amplification curves were constructed and the method's validation was performed using regression analysis to determine the amplification coefficient (E) for each of the three genes. Relative expression for each gene was calculated using the formula described by Prelle et al.12. In every sample there was gene expression detected for each gene showing differences related to cycle temperature. Amplification coefficient (E) was similar between control gene (GAPDH) and IGFI, independently of the class analyzed. IGFI linear amplification could be related to the constitutive characteristic of this protein since the transcripts are not dependents of FSH levels. It was observed difference in FSHR mRNA expression between the classes analyzed. It could be due to the variation of the receptor number in granulosa cells for each different phase of estral cycle. Semi-quantitative RT-PCR has a large application in biotechnology since it is useful to help us the better understanding of follicular dynamics. However these studies must be conducted using other genes in order to provide new clues for the physiology of folliculogenesis. | O aperfeiçoamento das técnicas que objetivam a exploração do potencial reprodutivo das fêmeas requer a compreensão mais ampla dos mecanismos de controle de desenvolvimento folicular. Uma alternativa de estudo nesta esfera, é a quantificação da expressão relativa de genes envolvidos nos processos de recrutamento, seleção e desenvolvimento folicular, pelo emprego da técnica de transcrição - reversa associado a reação em cadeia pela polimerase (RT - PCR). O presente trabalho objetivou quantificar a expressão relativa dos genes insulin-like growth factor I (IGF-I) e do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR), tendo como controle interno o gene da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase (GAPDH). Foram utilizados ovários bovinos de animais de matadouro em diferentes fases do ciclo estral. O RNA total dos folículos e tecido ovarianos foi purificado por TRIZOL. As reações de RT-PCR foram realizadas com o "kit" SuperScriptTM First-Strand. Os produtos de PCR foram analisados em gel de agarose e as bandas submetidas à análise densitométrica. Todos os genes foram amplificados observando-se a curva exponencial de amplificação, a validação do método foi realizada através de análise de regressão, sendo estabelecido o coeficiente de amplificação (E). A expressão relativa de mRNA para cada gene de interesse foi calculada pela fórmula estabelecida por Prelle et al.12. Em todos os tecidos analisados, todos os genes foram expressos, sobressaltando-se diferenças nos diferentes ciclos estudados. Com relação os dados referentes ao coeficiente de amplificação (E), observou-se tanto para gene controle (GAPDH), como para o gene IGF-I concordância nos valores encontrados para as diferentes classes analisadas. Quanto ao gene IGF-I, a interpretação dos achados para a expressão relativa de mRNA pode está relacionada ao caráter constitutivo dessa proteína ou devido os transcritos não serem dependentes dos níveis de FSH. Observou-se diferenças na expressão relativa de mRNA de FSHR entre as classes de tecidos analisados, o que pode ser explicado pela variação do número de receptores nas células da granulosa nas diferentes fases do ciclo estral. Pode-se perceber a partir desse estudo que a técnica de RT-PCR semi quantitativo é de grande importância biotecnológica, possibilitando auxílio na compreensão da dinâmica folicular. Entretanto esses estudos devem ser ampliados com outros genes para melhor compreensão das etapas fisiológicas envolvidas na foliculogênese.

The neotropical teleost fish Colossoma macropomun an active swimming species showed cardiac ventricle with pyramidal shape and myocardium with mixed structure. The myocardium presented an outer compact layer and an inner spongy layer whose particular bilaminar structure hitherto has been correlated to swimmer habit as well as to ventricular shape. | O Colossoma macropomun, peixe teleósteo com hábito natatório intenso, apresentou ventrículo cardíaco com forma piramidal e miocárdio com estrutura mista, sendo formada por uma camada compacta externa e outra esponjosa interna. Esta estrutura bilaminar diferenciada, atualmente, tem sido correlacionada com o hábito natatório e com a morfologia ventricular.

The present study involved thirty femeale adult dogs coming from the kennel of the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. The thoracic cavity of the animal was opened and the aorta astery (thoracic part) was locared and canulated. A 450 Neoprene latex solution was used to injet the aorta astery in caudal direction. The specimens were then fixed in a 10 % formol aqueous solution. The results showed that the ovaric, uterine and vaginal arteries supply the uterus as follows : (1) the ovaric artery, in all the cases, arose from the aorta artery, either cranially to the caudal mesenteric artery (98,33%) or at same level of this artery (1,67%). In 83,33% of the cases, it gave off a branch to the uterine corns, which was distributed on the dorsal (8,00%), on the ventral (12,00%) and ond the both (80,00%) surfaces. In addition, two uterine branches distributed on the ventral (66,67%) and the dorsal (33,33%) surfaces were found in 10,00% of the cases; (2) the uterine artery, in all the cases, arose from the vaginal artery. In all the specimens the artery uterine supplied the uterine corns, with the ventral surfaces receiving greater mean number of branches than the dorsal surface. Concerning the uterine body the mean number of branches from the uterine artery showed to be greater on the dorsal surface. In 70, 00% of the cases, the uterine cervix received branches from directly from the uterine artery, with greater number of these arterial vessels being found on the ventral surface. | Para o presente trabalho utilizamos 30 (trinta) cadelas adultas, provenientes dos canis do Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia, em Uberlândia, Minas Gerais - Brasil. Os animais, tiveram a cavidade torácica aberta e localizada a artéria aorta (porção torácica), que foi canulada e injetada com Neoprene Latex "450"(4) em sentido caudal. As peças foram, posteriormente, fixadas em solução aquosa de formol a 10%. Verificamos que as artérias ovárica, uterina e vaginal suprem o útero da seguinte forma - A artéria ovárica em todos dos casos origina-se da artéria aorta, cranialmente a artéria mesentérica caudal (98,33%) ou ao mesmo nível desta (1,67%). Em 83,33% das observações ela emite 1 ramo para os cornos uterinos, que distribui-se ora na face dorsal (8,00%), ora na face ventral (12,00%) e ora em ambas as faces (80,00%) ou ainda 2 ramos uterinos em 10,00% dos casos, distribuídos ora na face ventral (66,67%) e ora na face dorsal (33,33%). - A artéria uterina origina-se em todos os casos da artéria vaginal. Em todas as peças observamos que ela irriga os cornos uterinos, sendo que em média a face ventral recebe maior número de ramos que a dorsal. Com relação ao corpo do útero a média do número de ramos da artéria uterina mostrou-se maior na face dorsal. Em 70,00% dos casos a cervix uterina recebeu ramos diretos da artéria uterina, sendo que na face ventral encontrou-se maior número desses vasos arteriais.

Foram realizadas avaliações clínicas, colpo-citológicas e endocrinológicas de duas fêmeas de cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) pertencentes à Fundação RIOZOO, Rio de Janeiro, Brasil, durante um período de 10 meses. As fêmeas, consideradas clinicamente saudáveis, foram alojadas em recintos diferentes, cada uma com dois machos. Os recintos, de substrato arenoso distavam cerca de 500 m um do outro. A técnica colpo-citológica utilizada nas fêmeas de cachorro-do-mato segue os mesmos métodos para cachorros domésticos. É interessante ressaltar que não foi observado nenhum eritrócito nos esfregaços vaginais analisados, em qualquer fase do ciclo estral, em ambas as fêmeas. A diferenciação dos tipos celulares vaginais durante as diferentes fases do ciclo estral segue os mesmos padrões demonstrados por cadelas domésticas. Os níveis de estradiol e progesterona seguiram os mesmos padrões que ocorre nas fêmeas de cachorros domésticos. A progesterona atingiu níveis máximos (46 ng/ml) por volta do décimo dia de gestação. A variação do estradiol demonstrou que, ainda que as fêmeas possam apresentar picos deste hormônio, durante o ano, tão altos como durante a época reprodutiva, a reprodução ocorre, realmente, no final do inverno e primavera. É impossível inferir, neste trabalho, se a presença do macho próximo à fêmea durante o ano todo poderia induzir a produção de estradiol, redundando no que seria considerado um artifício de cativeiro. | Serial clinical, colpo-cytological and endocrinological examinations of two five-year-old females of the crab-eating dog (Cerdocyon thous), from the RIOZOO Foundation in the State of Rio de Janeiro - Brazil, were carried out over a 10-month period. Clinically healthy animals were kept in sand substratum enclosures, located 500m apart from each other. They were each housed with two males. The colpo-cytological technique employed for Cerdocyon thous used methods similar to those developed for domestic bitches. Unlike domestic dogs, blood cells were absent in all phases of the estrus cycle, including the pro-estrus phase. Differentiation of each type of vaginal cells during the estrus cycle phases in this species follows the same patterns shown by domestic bitches. The estradiol and progesterone levels were similar to those occurring in domestic bitches. The progesterone levels reach their maximum (46 ng/ml) around the 10th day of pregnancy. The estradiol analysis demonstrated that, although levels of this hormone could be high at various times throughout the year, mating actually occurs in late winter and in spring. It was impossible to evaluate whether males and females kept in close proximity throughout the entire year would stimulate the production of estradiol, resulting in what would be considered a captivity artifice.

Recentemente, foco de leishmaniose visceral canina (CVL) foi descrito na região noroeste do Estado de São Paulo - Brasil. O Hospital Veterinário - UNESP - Araçatuba, no ano de 2.000, desenvolveu 60 testes citopatológicos de casos suspeitos de leishmaniose usando aspirado por agulha fina (FNA). Os esfregaços de linfonodo foram corados pelo método de Romanowsky (Diff-Quik®) e observados em microscopia de luz. Os casos positivos mostraram formas amastigotas típicas de Leishmania livres ou em vacúolos de macrófagos. Sinais citopatológicos de reatividade do sistema linfo-histiocitário com ausência de parasitos foram também observados. Com o objetivo de implementar o diagnóstico da CVL, detectando parasitos e material antigênico nos esfregaços, aplicou-se a reação de imunofluorescência direta (IFD) usando anticorpo policlonal anti-Leishmania produzido em camundongo. Comparamos o método de IFD com a pesquisa direta do parasito em esfregaços corados pelo método de Romanowsky. Dos 60 cães com sinais clínicos da doença, o exame direto foi positivo em 50% (n=30), duvidoso em 36,7% (n=22) e negativo com reatividade do linfonodo em 13,3% (n=8). Quando os linfonodos foram submetidos a reação de IFD observamos reação positiva em 93,3% (n=56) e reação negativa em 6,7% (n=4). Nossos resultados mostraram que a reação de IFD apresentou alta sensibilidade quando comparada a pesquisa direta do parasito pela coloração de Romanowsky. A reação de IFD pode ser um método útil para confirmar os casos duvidosos da doença, onde as formas amastigotas não são identificadas com facilidade. | Recently, canine visceral leishmaniasis (CVL) was detected in the northwest of São Paulo State - Brazil. The Veterinary Hospital - UNESP - Araçatuba, in 2.000, carried out 60 cytopathological test of suspected cases of leishmaniasis using the fine-needle aspiration (FNA). The smears of the FNA popliteal lymph nodes were stained by the Romanowsky stain (Diff-Quik®) and observed using a light microscope. The positive cases showed typical amastigotes forms of Leishmania either free or in macrophage vacuoles. Cytopathological signs of reactivity of the lymph-hystiocitary system with the absence of parasites were also detected. In order to improve the diagnosis of CVL, looking for parasites and antigenic material detection in smears, we standardized the direct immunofluorescence assay (IFD) using mouse anti-Leishmania policlonal antibodies. We compared the IFD assay with the direct search of parasites in smears stained by Romanowsky stain. From the 60 dogs with clinical signs of the disease, the direct exam was positive in 50% (n=30), uncertain in 36,7% (n=22) and negative with lymph node reativity in 13,3% (n=8). When the lymph node smears were submitted to IFD assay we observed positive reaction in 93,3% (n=56) and negative reaction in 6,7% (n=4). Our results showed that IFD assay presented a high sensibility compared to parasite direct search by Romanowsky stain. The IFD assay could be useful method to confirm the uncertain cases of the disease, where amastigotes forms were not clearly identified.

Two experiments were conducted to determine the serum antibody (IgG) dynamic in calves infected with Haemonchus placei. At Experiment 1, the IgG level during the first and second experimental infection were measured and at Experiment 2, the influence of dietary protein and immunization on IgG levels. The calves were immunized using successive H. placei infection truncated by the use of anthelmintic and challenged with 100,000 L3. The infected calves developed a high level of protection, with a significant reduction on fecal egg counts (EPG) at the second infection. However, at the same period, the IgG values continue to presented high levels, independent of the EPG decrease. It was also observed that calves submitted to an adequate protein diet presented a higher IgG level, suggesting an influence on immune response to the infection when compared to the low protein diet calves. | Dois experimentos foram realizados para se conhecer a dinâmica dos anticorpos séricos (IgG) em bezerros após infecção com Haemonchus placei. No Experimento 1 estudou-se os níveis de IgG ao longo da primeira e segunda infecção. No Experimento 2 a influência de diferentes níveis protéicos da dieta e a resposta à infecção, medida através dos níveis de IgG séricos, foi observada em bezerros imunizados e não imunizados, através de infecções sucessivas e experimentalmente desafiados com L3 de H. placei. Observou-se que os bezerros infectados desenvolveram resistência a reinfecções, com acentuado decréscimo nos valores de ovos por grama de fezes (OPG) na segunda infecção. Entretanto, nesse mesmo período, os níveis de IgG séricos mantiveram-se elevados, independentes do decréscimo do OPG. Observou-se também que bezerros submetidos a dieta protéica adequada apresentaram maior produção de IgG sérico, sugerindo uma melhor resposta às infecções quando comparados aos submetidos a dietas com níveis protéicos mais baixos.

Single-strand conformational polymorphism (SSCP) was applied to analyse the occurence of BLV proviral variants in cattle naturally infected with BLV. A 444-bp fragment of BLV env gene was amplified and subjected to SSCP analysis. Twenty one DNA samples with different migration patterns, representing eight migration profiles, were found in a total of 72 analysed samples from BLV-infected cattle. SSCP analysis of 48 samples of the same restriction type (Belgian subgroup) revealed 34 and 14 samples with identical and different migration patterns, respectively. Nucleotide sequencing of two samples with distinct SSCP patterns confirmed sequence differences. SSCP analysis provides a facile and discriminatory tool for the differentiation of BLV variants, including those previously indistinguishable by RFLP