Toxoplasmosis is a zoonotic infection caused by Toxoplasma gondii that affects a wide range of vertebrates. Rodents are intermediate hosts and serve as food for felids, the definitive hosts. However, because of the high variety of species in the order Rodentia, the serological diagnosis is difficult to perform, since the most used techniques require the use of specific antibody conjugated to fluorescein or enzymes. The aim of this study was to evaluate the use of a heterologous secondary antibody conjugate in Immunofluorescence Antibody Test (IFAT) for diagnosis of anti-T. gondii antibodies in two species of wild rodents: Euryoryzomys russatus (WAGNER, 1848) and Calomys callosus (RENGGER, 1830). The specie Mus musculus (Linnaeus, 1758) was used as control conjugate. The animals were experimentally infected with five cysts of T. gondii (strain ME 49) per animal. The Modified Agglutination Test (MAT), which does not require the use of conjugates, and the presence of T. gondii cysts in the rodents were used to confirm the infection. For each animal species, serum samples were collected weekly for five weeks and tested (50 samples per rodent specie, total of 150 samples). None of the samples from C. callosus and E. russatus were positive in the IFAT when anti-mouse heterologous conjugate was used. Brain cysts of T. gondii were microscopically observed in all animals, except in one of the E. russatus. Positive results were found in the MAT 14 days after T. gondii infection in all three species of rodents and IFAT of the control group (M. musculus) was also positive 14 days after infection using anti-mouse (homologous) conjugate. The use of heterologous secondary antibody conjugates should be used with caution and the MAT had a good agreement for serological diagnosis of T. gondii in the studied rodent species. | A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo Toxoplasma gondii, que afeta uma grande variedade de vertebrados. Os roedores são hospedeiros intermediários e servem de alimento para felinos, os hospedeiros definitivos. No entanto, por causa da elevada variedade de espécies na ordem Rodentia, o diagnóstico serológico é difícil de ser realizado, uma vez que as técnicas mais empregadas requerem a utilização de um anticorpo específico conjugado com fluoresceína ou enzimas. O objetivo deste estudo foi avaliar o uso de um conjugado secundário heterólogo na Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para diagnóstico de anticorpos anti-T. gondii em duas espécies de roedores silvestres: Euryoryzomys russatus (WAGNER, 1848) e Calomys callosus (RENGGER, 1830). A espécie Mus musculus (Linnaeus, 1758) foi utilizada como controle do conjugado. As três espécies de roedores foram experimentalmente infectadas com cinco cistos de T. gondii (cepas ME 49) por animal. O Teste de Aglutinação Modificado (MAT), que não requer o uso de conjugados, bem como, a presença de cistos de T. gondii nos roedores foram usados para confirmar a infecção. Para cada espécie de animal, amostras de soro foram coletadas durante cinco semanas e testadas (50 amostras por espécie de roedor, total de 150 amostras). Nenhuma das amostras de C. callosus e E. russatus foram positivas na RIFI, quando foi usado o conjugado heterólogo anti-camundongo. Cistos cerebrais de T. gondii foram microscopicamente observados em todos os animais, exceto em um dos E. russatus. Resultados positivos foram encontrados pelo MAT após 14 dias de inoculação em todas as três espécies estudadas e pela RIFI no grupo controle (M. musculus), também no dia 14 após a infecção utilizando conjugado anti-camundongo. O uso de conjugados secundários heterólogos deve ser empregado com cautela e o MAT apresentou uma boa concordância para o diagnóstico sorológico de T. gondii nas espécies de roedores estudadas.

O fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) é um fator angiogênico com papel importante em processos patológicos e fisiológicos. O VEGF pode ser quantificado em diversos fluidos orgânicos, incluindo amostras de soro e plasma. O presente trabalho investigou a concentração do VEGF no soro e no plasma de cães saudáveis a fim de recomendar o manejo ótimo de amostras biológicas para a determinação dos níveis do VEGF. Amostras de sangue de 30 cães saudáveis foram coletadas em tubos estéreis contendo EDTA para análise do plasma e em tubos com ativador de coagulação para análise do soro. Os tubos foram centrifugados após 90 minutos da coleta a 1.400 x g por 10 minutos. A concentração do VEGF foi determinada com o método quantitativo de ELISA. O nível sérico médio de VEGF foi de 26,5+13,3pg/mL e o plasmático foi 11,7 + 16.4 pg/mL (p = 0,0003). Houve correlação positiva entre o VEGF do soro com as plaquetas (r = 0,37, p = 0,03) e correlação negativa entre o VEGF do soro com hemoglobina (r = -0,38, p = 0,03) e entre VEGF do plasma com hemoglobina (r = -0,34, p = 0,06). A comparação dos resultado obtidos nos exames de plasma e soro indicou que amostras de plasma podem ser utilizadas como ótimo fluido para quantificação do VEGF de cães. | Vascular endothelial growth factor (VEGF) is an angiogenic factor with a key role in physiological and pathological process. It can be measured in several organic fluids, including serum and plasma samples. The aim of this work was to investigate the concentration of serum and plasma VEGF of healthy dogs in order to recommend optimal handling of biological samples for accurate measurement of VEGF. Blood samples of thirty dogs were collected into sterile EDTA tube for plasma analysis and into clot activator tubes for serum analysis. The tubes were centrifuged within 90 minutes of collection at 1400 xg for 10 minutes. VEGF concentration was determined using the quantitative method (ELISA). Serum VEGF level was 26.5 + 13.3pg/mL and plasma VEGF was 11.7 + 16.4 pg/mL (p = 0.0003). There was a positive correlation between serum VEGF and platelets (r = 0.37, p = 0.03) and a negative correlation between serum VEGF and hemoglobin (r = -0.38, p = 0.03) and between plasma VEGF and  hemoglobin (r = -0.34, p = 0.06). When compared with serum samples it was concluded that plasma samples could be used as an optimal fluid for measuring VEGF in dogs.

The evaluation of the degree of attachment of owners to pets is an important resource to study the influence of the pets to different physical and psychosocial  factors to humans. The current study applied the LAPS (Lexington Attachment to Pets Scales) test to evaluate attachment degree of owners to their pets. The test was performed in 95 subjects, males and females from different age groups, in Minas Gerais and São Paulo state. Most of the questions were correlated to the total score (p < 0.0001). Women and elderly subjects had lower scores, demonstrating a greater degree of attachment when compared to males and  younger individuals, respectively. In conclusion, the age and gender differ to the degree of attachment. The use of negative questions in a test composed mostly by positive issues may inhibit the interviewer responses. | A avaliação do grau de apego de proprietários com os seus cães e gatos é um importante recurso para o estudo da influência dos animais em diferentes fatores físicos e psicossociais dos humanos. O presente trabalho empregou o teste LAPS (Lexington Attachment to Pets Scales) para a análise do grau de apego de proprietários com os seus cães e gatos. O teste foi aplicado em 95  indivíduos, dos sexos masculino e feminino de diferentes faixas etárias, dos estados de Minas Gerais e São Paulo. A maior parte das questões apresentou correlação com o escore total (p < 0,0001). As mulheres apresentaram menores escores quando  comparadas aos indivíduos do sexo masculino, assim como pessoas mais velhas em comparação aos indivíduos mais jovens. Concluiu-se que tanto o gênero como a faixa etária apresentam diferenças para o grau de apego. O emprego de questões negativas, em um teste composto em sua maior parte por questões positivas, pode inibir as respostas dos entrevistados.

Foi efetuada a comparação em hamsters da proteção conferida e dos níveis de anticorpos induzidos por duas bacterinas comerciais antileptospirose. Os ensaios empregados foram o teste oficial de potência com desafio (TP), o ensaio proposto, teste de inibição de crescimento de leptospiras in vitro (ICLIV) e a soroaglutinação microscópica (SAM). O protocolo de imunização foi representado por duas aplicações individuais de 0,25 mL das bacterinas, puras ou de suas diluições geométricas de razão dois variando de 200 a 51.200 para a bacterina A e de 200 a 3.200 para a bacterina B, por via subcutânea com o intervalo de 15 dias. Decorridos 15 dias da segunda aplicação de vacina, um grupo de animais foi desafiado com 0,2 mL de cultivos de leptospiras, por indivíduo, respectivamente dos sorovares Canicola (bacterinas A e B) ou Kennewicki (bacterina A). Os números de doses infectantes empregados nos desafios foram de 100 e 631 respectivamente, para os sorovares Canicola e Kennewicki. Decorridos 21 dias do desafio, os grupos de animais utilizados nos testes de ICLIV e SAM foram sangrados e os seus soros foram reunidos em pools (n = 5). No TP, adotando-se os critérios internacionais, as bacterinas foram aprovadas. A comparação do desempenho das bacterinas para os sorovares adotados, segundo sua concentração, por meio das proporções de animais sobreviventes ao TP e a média dos títulos de anticorpos identificados no teste de ICLIV, indicou que um título igual ou superior a 0,77 log corresponde ao nível de aprovação da bacterina no TP. | It was performed a comparison between the protection afforded in hamsters and the antibody levels induced by two commercial vaccines against leptospirosis. The assays used were the official challenge test (TP), the in vitro leptospires growth inhibition test (ICLIV) and microscopic agglutination test (MAT). The immunization protocol consisted of two single applications, 15 days from each other, of 0.25 mL of the bacterins, pure or its two-fold serial dilutions: 200 to 51,200 for bacterin A and 200 to 3.200 bacterin B, both of them administered subcutaneously. A group of animals was challenged, after 15 days from the second vaccine application, with 0.2 mL/animal of live leptospire cultures, with Canicola (bacterin A and B) or Kennewicki (bacterin A) serovars. The numbers of infective doses employed in the challenges were 100 and 631 for Canicola and Kennewicki serovars, respectively. After 15 days from the second vaccine dose the groups of animals used in ICLIV and SAM tests were bled and their sera were collected in pools (n = 5). In TP, adopting the criteria established by the Code Federal Regulation, both bacterins were approved. The comparison of the performance of the tested bacterins with the adopted serovars, according to its concentration, by the proportions of surviving animals to the challenge assay and the average of the neutralizing antibodies titers, established a neutralizing antibodies titer equal or higher than 0.77 log corresponding with the bacterin level of approval in the potency assay.

This study evaluated the use of hipoosmotic swelling test (HOST) with deionized water (0 mOsmol), as a method of post thaw ram semen evaluation and correlate their findings with different techniques of semen evaluation. Therefore, twenty semen samples of 20 different adult rams were assessed as for kinetic sperm parameters through computerized system (IVOS 12, Hamiton Thorn Biosciences, Beverly, MA, EUA) and subjective analysis. The sperm membranes viability was carried out by the association of fluorescent probes (propidium iodide, JC-1 and FITC-PSA). The structural integrity of the plasma membrane was also studied through supravital test with eosin and the functional integrity of membrane evaluated by doing the hipoosmotic swelling test with deionized water (0 mOsmol), in the following proportions: One part of semen for 10 (HOST 10), 50 (HOST 50) and 100 (HOST 100) parts of water. After semen dilution in the different proportions it was fixed in formalin-buffered saline and analyzed with regard to percentage of HOST reactive sperm (bent/coiled). The percentage of reaction obtained for HOST 10 (33,1%); HOST 50 (32,8%) and HOST 100 (31,8%) did not differ significantly. HOST 10 presented positive correlation with the plasma membrane integrity by the EOS (r = 0,80; p < 0,05). Positive correlations between HOST 50 and HOST 100 with sperm subpopulation with membrane integrity by fluorescence were observed (r = 0,83 and r = 0,85; p < 0,01). The findings suggest that the HOST with deionized water can provide additional information for post thawing ram sperm viability evaluation. | O presente trabalho analisou o emprego do choque osmótico (HOST) com o uso da água deionizada (0 mOsmol), como método de avaliação do sêmen ovino descongelado e correlacionou os resultado obtidos com aqueles encontrados em diferentes técnicas de avaliação de sêmen. Para tanto, vinte amostras de sêmen criopreservado (20 reprodutores), foram avaliadas quanto aos parâmetros de cinética espermática pelo sistema computadorizado (IVOS 12, Hamilton Thorne Biosciences, Beverly, MA, EUA) e análise subjetiva. A análise da viabilidade das membranas espermáticas foi efetuada com a associação de sondas fluorescentes (PI, JC-1 e FITC-PSA). A integridade estrutural da membrana plasmática foi estudada com o teste supravital com eosina (EOS) e, por fim, a integridade funcional da membrana foi avaliada pelo choque osmótico, com a utilização da água deionizada nas seguintes proporções: uma parte de sêmen para 10 (HOST 10), 50 (HOST 50) e para 100 (HOST 100) partes de água. Após a diluição do sêmen, nas diferentes proporções, as amostras foram analisadas quanto ao percentual de espermatozoides reativos ao HOST. Os valores de positividade obtidos para o HOST 10 (33,1%), HOST 50 (32,8%) e HOST 100 (31,8%) não diferiram significativamente. O HOST 10 apresentou importante correlação positiva com a integridade da membrana plasmática pela EOS (r = 0,8; p < 0,05). Os HOST 50 e 100 demonstraram correlações positivas com subpopulações espermáticas com membrana plasmática íntegra pela fluorescência (r = 0,83 e r = 0,85; p < 0,01). Os resultados obtidos revelaram que o HOST com água deionizada pode fornecer informações complementares para a avaliação da viabilidade do sêmen ovino pós-descongelação.

No presente trabalho, foi pesquisada infecção riquetsial em amostras de sangue de 108 cães e 22 carrapatos Rhipicephalussanguineus (Ixodida, Ixodidae) coletados destes animais durante 2011 e 2012, em Patos, Estado da Paraíba, Nordestedo Brasil. As amostras de sangue foram examinadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) utilizando-seantígenos de seis isolados de Rickettsia do Brasil. Todos os 108 cães foram soronegativos para os antígenos de R.rickettsii, R. parkeri, R. amblyommii, R. felis, R. rhipicephali e R. bellii, sugerindo que a região estudada não é endêmicapara riquetsioses do grupo da febre maculosa. Dos 22 carrapatos R. sanguineus, R. felis foi detectada em um (4,5%)espécime por PCR do gene riquetsial gltA. São discutidas as possíveis implicações desse achado incomum na PCR. | In this study, rickettsial infection was searched in 108 canine blood samples and 22 Rhipicephalus sanguineus (Ixodida,Ixodidae) ticks collected on these dogs during 2011 and 2012 in Patos municipality, state of Paraíba, northeasternBrazil. Blood samples were tested through indirect immunofluorescence assay (IFA) by using antigens of six Rickettsiaspecies isolates from Brazil. All 108 dogs tested seronegative for R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommii, R. felis, R.rhipicephali, and R. bellii antigens, suggesting a non-endemic status of the studied region for spotted fever ricketsiosis.Among 22 R. sanguineus ticks, R. felis was detected in one (4.5%) specimen by PCR targeting a portion of the rickettsialgltA gene. The possible implications of this unusual PCR finding are discussed.

Na espécie canina as taxas de maturação oocitária são baixas e a porcentagem de oócitos que permanecem em estagio de vesícula germinativa (VG), independente das condições de cultivo, e alta. Durante a maturação oocitária, a VG sofre modificação e remodelamento da cromatina, que se manifesta por alterações na sua configuração e posicionamento. Assim, o objetivo deste trabalho e avaliar a configuração e o posicionamento da cromatina de oócitos em estagio de VG durante o anestro e diestro de cadelas. Os ovários de 33 fêmeas (20 cadelas em anestro e 13 em diestro) foram isolados, fatiados e os complexos cumulus-oócitos (COCs) foram submetidos à solução de hialuronidase 0,2% para a liberação das células do cumulus. Apos esse processo, os oócitos selecionados foram corados, avaliados e apenas COCs grau 1 foram utilizados. De um total de 920 oócitos, 566 foram classificados como grau 1 e os estágios de configuração da cromatina identificados como VG-1, VG-2, VG-3 e VG-4. As alterações observadas na configuração da cromatina foram caracterizadas como transição de uma cromatina dispersa (VG-1, VG-2) para parcialmente condensada (VG-3) ate atingir um estagio totalmente condensado (VG-4). Os dados analisados da configuração da cromatina mostraram uma diferença significativa entre as fases de anestro e diestro, com maior proporção de VG-1 e VG-2 durante o anestro e de VG-3 e VG-4 durante o diestro. Ha necessidade de novos estudos para uma compreensão adequada da influencia da configuração da cromatina de oócitos no estagio de VG na retomada da meiose e na competência meiótica do oócito. | In canine specie, oocyte maturation rates are low and the percentage of oocytes that remain in the stage of germinal vesicle (GV) regardless of culture conditions is high. During maturation oocyte undergoes modification and the GV chromatin remodeling manifested by changes in the configuration and positioning. The objective of this work is to evaluate the configuration and positioning of chromatin of oocytes in GV stage during anestrus and diestrus bitches. The ovaries of 33 females (20 bitches in anestrous and 13 in diestrus) were isolated, sliced and only cumulus-oocyte complexes (COCs) grade 1 were subjected to solution of 0.2% hyaluronidase for release in cumulus cells. After this process, the selected oocytes were stained and evaluated. From a total of 920 oocytes, 566 were classified as grade 1 and the stages of chromatin configuration identified as GV-1, GV-2, GV-3 and GV-4. The observed changes in chromatin configuration been characterized as a transition dispersed chromatin (GV-1, GV-2) for partially condensed (GV-3) until it reaches a fully condensed stage (GV-4). The data analyzed from the chromatin configuration showed a significant difference between the stages with a higher proportion of GV-1 and GV-2 for the anoestrus and GV-3 and GV-4 during diestrus. There is need for further studies to be able to have a proper understanding of the influence of chromatin configuration of oocytes in GV stage in resumption of meiosis and consequently in oocyte meiotic competence.

<p class="MsoNormal" style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: 150%;">Doze ovelhas hígidas, não prenhes e não lactentes foram submetidas a um protocolo de indução experimental de cetose nervosa para a avaliação de sintomatologia nos quadros de cetose e Toxemia da Prenhez. Neste protocolo, oito animais foram submetidos a infusão de 150 mL de solução de isopropanol a 35% na veia jugular, constituindo o grupo Tratado (GT), e quatro ovinos foram tratados identicamente com solução salina isotônica (NaCl 0,9%), constituindo o grupo Controle (GC) no decorrer de 40 minutos. Os animais do GT apresentaram aumento da frequência cardíaca (FC) aos 40 minutos de infusão e redução no movimento ruminal a partir dos 10 minutos de infusão com isopropanol, o qual permaneceu diminuído ate 10 minutos do termino da infusão. A atonia ruminal ocorreu em três animais, que manifestaram em seguida leve meteorismo gasoso. A infusão de isopropanol provocou o surgimento de sintomas nervosos como, depressão e sonolência, cambaleios, adução de membros posteriores, pressão da cabeça em obstáculo, ranger de dentes e cegueira quase sempre acompanhada de diminuição do reflexo pupilar e nistagmo. Todos os animais exalaram forte odor cetótico com poucos minutos do inicio da indução, fato que ajudou a eliminação do isopropanol do organismo. Os presentes resultados sugerem que parte dos sintomas nervosos verificados na Toxemia da Prenhez possa ser oriunda da ação do isopropanol. Estes resultados abrem novas perspectivas para o melhor entendimento da patogenia da Toxemia da Prenhez em ovinos. | Twelve healthy Santa Ines sheep, non-pregnant and non-lactating underwent a protocol of experimental induction of nervous ketosis for studying the symptoms in ketosis and Pregnancy Toxaemia (PT) disease. Eight animals were subjected to infusion of 150 mL of isopropanol (IPA) at 35% in the jugular vein and four sheep were treated identically with isotonic saline solution (NaCl 0.9%) during 40 minutes. The animals treated with IPA showed increased heart rate (HR) after 40 minutes of infusion and decreased ruminal movement from the 10 minutes infusion with IPA and remaining low up to 10 minutes from the end of the infusion. Ruminal atony appeared in three animals, which showed slight meteorism gas. Infusion of IPA caused the appearance of nervous symptoms as depression, staggering, adduction of hind limbs, head pressing, teeth grind and blindness almost always accompanied by a decreased pupillary reflex and nystagmus. All the animals exhaled ketosis breath with strong odor within few minutes of the start of induction that helped the elimination of the IPA from the organism. The present results strongly suggest that part of the nervous symptoms observed in PT may be derived from the action of IPA. These present findings open new perspectives for a better understanding of the pathogenesis of PT in sheep.

A prolactina (PRL) influencia o crescimento prostático, entretanto poucos estudos investigaram o papel da PRL na inflamação prostática. Ratos Wistar jovens (45 ± 5 dias de idade) e adultos (75 ± 5 dias de idade) receberam injeções subcutâneas diárias de domperidona (4,0 mg.kg-1) para manter níveis séricos altos de PRL. Os animais foram tratados por 15, 30, 45 ou 60 dias. Amostras de sangue e próstata foram coletadas ao final dos tratamentos para dosagem de PRL e análise histológica, respectivamente. Apenas os animais jovens tratados com domperidona por 15 e 30 dias apresentaram infiltrado inflamatório na próstata. Esses resultados confirmaram a participação da PRL na indução da inflamação prostática. A conclusão obtida foi que animais jovens são mais susceptíveis à ação da PRL na inflamação da próstata que os adultos. | Several reports have shown that prolactin (PRL) plays a role in prostatic growth, but few studies considered the role of PRL in the process of prostatic inflammation. Young (45 ± 5 days old) and adult (75 ± 5 days old) male Wistar rats were subcutaneously injected daily with domperidone (4.0 mg.kg-1) to maintain high serum PRL levels. The animals were treated for 15, 30, 45 or 60 days. Blood and prostate samples were collected at the end of each treatment for PRL dosage and histological analysis, respectively. Only young animals treated with DOMP for 15 and 30 days displayed inflammatory infiltrate in the prostate. These results confirm literature data in regards to PRL involvement in inducing prostate inflammation. Moreover, it was concluded that young animals are more susceptible then adults to the PRL action concerning prostate inflammation.

Biogenic amines (BAs) are formed as a result of specific free amino acid decarboxylation. Analysis of these metabolites may be of great importance to determine food quality and for monitoring the levels of biogenic amines such as histamine and tyramine related to intoxication episodes in humans. Chromatography is a chemistry separation technique used to characterize biogenic amines in foods. Variations of this technique (liquid, thin layer and gas chromatography) have been widely applied; however, the food matrix complex requires that changes in the methodology of extraction, derivatization and detection must be performed according to each group of foods. High-performance liquid chromatography is the most widely used chromatographic method applied for biogenic amines in foods. However, due to the current importance of biogenic amines in quality control and consumer safety, researchers try to develop new methods for a fast, reliable analysis of foods in the market. This review presents some chromatographic techniques applied to monitoring BAs in different foods of animal origin. | Aminas biogenicas sao formadas como resultado da descarboxilacao de aminoacidos livres especificos. A analise desses metabolitos e de grande importancia na determinacao da qualidade e monitoramento de biogenicas como histamina e tiramina relacionadas com episodios de intoxicacao em humanos. A cromatografia e uma tecnica de separacao química usada para caracterizar aminas biogenicas. Variacoes da tecnica (cromatografia liquida, em camada delgada e gasosa) tem sido amplamente usadas, porem a complexidade da matriz alimentar faz com que sejam realizadas mudancas nos processos de extracao, derivatizacao e deteccao em concordancia com cada grupo de alimento. A cromatografia liquida de alta eficiencia (CLAE) e o metodo mais utilizado na determinacao de aminas biogenicas em alimentos. Contudo, devido a importancia das aminas biogenicas no controle da qualidade e a seguranca do consumidor, os pesquisadores tentam desenvolver novos metodos com o intuito de uma analise mais rapida e precisa para o controle de alimentos no mercado. O objetivo da revisao e apresentar algumas tecnicas cromatograficas aplicadas no monitoramento de aminas biogenicas em produtos de origem animal.