O objetivo deste trabalho foi relatar o potencial da técnica de MALDI-MS para caracterizar espécies de lipídios presentes em um único embrião equino e estudar algumas estruturas lipídicas detectadas por dissociação induzida por colisão (CID). No espectro de modo íon positivo, pudemos observar espécies, principalmente, protonadas e sodiadas de esfingomielinas (SM), fosfatidileolinas (PC) e triacilgliceróis (TAG). No modo negativo, observamos fosfatidiletanolaminas (PE) e fosfatidilinositos (PI). Espectros de íons de lípidos com maior intensidade foram utilizados para demonstrar o potencial da informação estrutural por MALDI-MS/MS. O espectro no modo positivo de m/z (massa sobre carga) 760,6 (atribuída como PC34:1) apresentou características de fragmentos PC de m/z 184,1 (denominada cabeça polar de colina), além de perda neutral (NL) de m/z 183 (fosforilcolina). Para o íon de m/z 766,6 (atribuída como PE38:5), observou-se a NL de 140, característica do PE. Para o íon de m/z 808,7 (38,5 atribuído como PC), além do fragmento m/z 184,1 na NL de 183, foi possível observar a perda de trimetilamina (íon de m/z 749,6) e o ciclofosfano (íon de m/z 147,0). Finalmente, para o modo de íon negativo, foram isolados e fragmentados o íon de m/z 863,6 que foi atribuído como PI36:1, devido à presença de m/z 153 (fosfato de glicerol – H₂O-H ), 223 (inositol fosfo - 2H₂O-H) , 241 (fosfoinositol – H₂O-H), 281 (ácido oleico) e 581,3 (lisofosfoinositol – H₂O+H). Concluímos que a MALDI - MS permite a detecção de uma ampla gama de espécies de PC, SM, PE, PI e TAG lipídicas, bem como a caracterização rápida e confiante de estruturas lipídicas a partir de um único embrião equino. | The aim of this work was to report the potential of MALDI-MS for the characterization of lipid species present in a single equine embryo, and to study some lipid structures detected by collision induced dissociation (CID) experiments. In the positive ion mode spectrum, we could observe mostly protonated and sodiated species of sphingomyelins (SM), phosphatidylcholines (PC) and triacylglycerols (TAG). In the negative ion mode, we observed phosphatidylethanolamines (PE) and phosphatidylinositols (PI). MS/MS spectrum of most intense lipid ions was performed to show MALDI-MS/MS structural information potential. MS/MS spectrum in the positive mode of <em>m/z</em> 760.6 (attributed as PC34:1) depicted characteristic PC fragments of m/z 184.1 (choline polar head), and the neutral loss (NL) of 183 (phosphorylcholine). For the ion of <em>m/z</em> 766.6 (attributed as PE 38:5), we observed the NL of 140, characteristic of PE. For the ion of <em>m/z</em> 808.7 (attributed as PC 38.5), besides the fragment at m/z 184.1 at the NL of 183, it was possible to observe the loss of trimethylamine (ion of <em>m/z</em> 749.6), and the cyclophosphane (ion of <em>m/z</em> 147.0). Finally, for the negative ion mode, we isolated and fragmented the ion at <em>m/z</em> 863.6, which was attributed as PI 36:1 due to the presence of <em>m/z</em> 153 (glycerol phosphate – H₂O-H), 223 (phospho inositol – 2H₂O-H), 241 (phospho inositol – H₂O-H), 281 (oleic acid), and 581.3 (lysophosphoinositol – H₂O-H). We conclude that MALDI-MS allowed the detection of a broad range of PC, SM, PE, PI and TAG lipid species, as well as a fast and confident characterization of lipid structures from a single equine embryo.

Avaliou-se o cimento de alfa-fosfato tricálcico de dupla pega como implante para o preenchimento de cavidade anoftálmica em cães e gatos. Os animais foram provenientes do Serviço de oftalmologia do Hospital Veterinário, da Universidade Estadual Paulista – Câmpus de Jaboticabal. O estudo foi realizado em dois anos. A idade dos pacientes oscilou entre 2 a 11 anos, com peso de 3 a 50 kg. Os implantes variaram de 15 a 25 mm de diâmetro. Edema local foi observado em todos os animais durante o pós-operatório imediato. Das 11 cirurgias realizadas em 8 animais, sendo 7 cães e 1 gato, em 9 (81,8%) o resultado estético foi satisfatório, enquanto em 2 (18,2%) foi insatisfatório, devido a complicações que levaram a remoção dos implantes. A utilização do cimento de alfa-fosfato tricálcico de dupla pega no preenchimento de cavidade anoftálmica mostrou-se factível e é uma alternativa para melhorar a aparência estética após a enucleação. | The double-setting alpha-tricalcium phosphate bone cement was evaluated as an orbital implant for filling the anophthalmic cavity of dogs. The animals were from the Ophthalmology Unit of the Veterinary Hospital, Universidade Estadual Paulista – Jaboticabal, and from a private veterinary clinic. The study was conducted during two years. The patients’ age ranged from 2-11 years old, and their weight from 9-50 kg. The implants ranged from 19 to 25 mm in diameter. Local edema was observed in all animals during the immediate postoperative period. Of the ten performed surgeries in seven animals, a satisfactory, aesthetic result was observed in nine (90%) while in one (10%) of them it was unsatisfactory due to complications that led to the implant removal. The use of the double-setting alpha-tricalcium phosphate bone cement to fill anophthalmic sockets is feasible and could be an alternative to improve the cosmetic appearance after eyeball removal.

The causative agent of bovine tuberculosis (BTB) is <em>Mycobacterium bovis</em>, a bacteria belonging to <em>M. tuberculosis</em> complex (MTC). The definitive diagnosis is realized by isolation and identification of the <em>M. bovis</em> from clinical samples, using a combination of traditional culture and biochemical methods, which is considered the “gold standard”. This procedure is cumbersome and time-consuming. We evaluated a PCR assay for the direct detection of MTC DNA in naturally contaminated milk, using primers that were previously tested and proven reliable to target the <em>IS6110 </em>element. Milk previously seeded with <em>M. bovis</em> was used as the starting material, for padronization of the technique. The procedure involved extracting the DNA by enzymatic lysis (proteinase K and lysozyme), phenol, chloroform, isoamyl alcohol, followed by ethanol precipitation and PCR. The PCR assay allowed us to detect BTB in artificially contaminated milk, with a detection limit of 100 CFU/mL, and was also able to detect the bacillus in 50% (75/150) of samples from naturally infected animals. This procedure could be used to assist the <em>in vivo</em> diagnosis for BTB, complementing the sorological or microbiological tests and becomes an alternative option for implementation in epidemiological studies of BTB transmission and to prevent contaminated milk from entering the food supply. | O agente causador da tuberculose bovina (BTB) é o <em>Mycobacterium bovis</em>, uma bactéria pertencente ao complexo <em>M. tuberculosis</em> (CMT). O diagnóstico definitivo é realizado através do isolamento e identificação de <em>M. bovis</em> em amostras clínicas, utilizando uma combinação de cultura bacteriológica e métodos bioquímicos, que são considerados como "padrão de ouro". Entretanto esses procedimentos são trabalhosos e demorados. No seguinte estudo avaliamos um ensaio de PCR para a detecção direta de DNA de CMT em leite de vacas positivas ao teste cutâneo, utilizando <em>primers</em> previamente testados e comprovadamente confiáveis, para amplificação da região de interesse <em>IS6110</em>. Leite previamente contaminado com <em>M. bovis</em> foi utilizado como material de partida, para a padronização da técnica. O procedimento envolveu a extração do DNA por lise enzimática (proteinase K e lisozima), fenol, clorofórmio, álcool isoamílico, seguido de precipitação com etanol e PCR. O ensaio de PCR permitiu detectar BTB em leite artificialmente contaminado, com um limite de detecção de 100 UFC/mL, e também foi capaz de detectar o bacilo em 50% (75/150) de amostras de leite testadas. A técnica de PCR pode ser utilizada para auxiliar o diagnóstico <em>in vivo</em> da BTB, além de complementar os testes sorológicos ou microbiológicos, tornando-se uma alternativa para estudos epidemiológicos da transmissão de BTB, prevenindo que o leite contaminado entre na cadeia de alimentos.

Amostras do vírus da raiva (n = 17) isoladas de bovinos (n = 11), equinos (n = 4) e bubalinos (n = 2) procedentes do Pará (n = 7), Tocantins (n = 6) e Rondônia (n = 4) foram submetidas à técnica de RT-PCR para amplificação parcial dos genes da Nucleoproteína (N) e Glicoproteína (G). As sequências nucleotídicas obtidas foram analisadas pelo método de reconstrução filogenética Neighbor-Joining com o modelo evolutivo Kimura 2-parâmetros. Todas as 17 amostras pertenceram ao cluster A, que se encontrou na linhagem associado com morcego hematófago Desmodus rotundus. A análise filogenética baseada nos genes N e G, sugere a presença de cinco sublinhagens (A1-A5) e sete sublinhagens (A1-A7), respectivamente. Quando se compara ambas as filogenias, as sublinhagens A1 até A3 mostram composição e distribuição geográfica concordante, já a diversidade observada na composição das sublinhagens restantes é atribuída ao uso de sequências de diferentes alinhamentos. A glicoproteína mostrou marcadores moleculares nas sublinhagens A2, A3, A4 e A7, o que fornece elementos para melhor compreensão da epidemiologia molecular da raiva das linhagens circulantes na Amazônia Brasileira. | Rabies virus samples (n = 17) isolated from bovines (n = 11), equines (n = 4) and buffalo (n = 2) from Pará State (n = 7), Tocantins (n = 6) and Rondônia (n = 4) were submitted to RT-PCR in order to obtain partial sequences of nucleoprotein (N) and glycoprotein gene (G). Nucleotide sequences were analyzed using Neighbor-Joining model, Kimura 2-parameters evolutionary model. All the 17 samples analyzed were related to cluster A, lineage associated with the hematophagous bat Desmodus rotundus. The phylogenetic analysis based on the N and G genes, suggests the presence of five sub-lineages (A1-A5), while G gene showed seven sub-lineages (A1-A7). In both phylogenies, sublineages A1 to A3 exhibit a similar composition and geographic distribution. Diverse composition of remaining groups of N and G gene is attributable to different sequences used in the alignments for each genomic region. Glycoprotein amino acid sequence showed molecular markers in sub-lineages A2, A3, A4 and A7. This information provides a better comprehension of molecular epidemiology of rabies, starting with the knowledge of viral lineages circulating in the Brazilian Amazon.

O presente trabalho estudou, por meio de dissecações, a origem e distribuição do nervo isquiático em 30 fetos de ovinos (Ovis aries) sem raça definida, machos ou fêmeas, obtidos de abortos, natimortos e mortes naturais de fêmeas gestantes de núcleos criatórios na região do Triângulo Mineiro, estado de Minas Gerais, Brasil. Injetou-se formaldeído a 10% por meio de canulação da aorta descendente torácica e, posteriormente, o material foi mantido submerso na referida solução por um período mínimo de 48 horas antes do início das dissecações. O nervo isquiático originou-se do ramo ventral do último nervo espinhal lombar, ora do sexto nervo espinhal lombar (L6), ora do sétimo (L7), quando presente, e dos ramos ventrais dos primeiro e segundo nervos espinhais sacrais (S1 e S2, respectivamente), podendo apresentar a contribuição do ramo ventral do terceiro nervo espinhal sacral (S3). O nervo isquiático cedeu ramos aos músculos: glúteo superficial, glúteo médio, glúteo acessório, glúteo profundo, gêmeo, quadrado femoral, adutor, bíceps femoral, semitendinoso e semimembranoso. Os ramos terminais do nervo isquiático foram os nervos tibial e fibular comum, tendo suas origens distalmente ao trocânter maior do fêmur. Estatisticamente, através da aplicação do teste de Wilcoxon (0,05), não houve diferenças significativas entre as frequências dos ramos musculares do nervo isquiático e os antímeros, independentemente do número de ramos musculares. | Current research studied, by dissection, the origin and distribution of the ischiatic nerve in 30 fetuses of mixed-breed male or female sheep (Ovis aries), obtained from abortions, stillborns and natural deaths of pregnant females on farms in the Triângulo Mineiro region, state of Minas Gerais, Brazil. Formaldehyde 10% was injected through the cannulation of descending thoracic aorta and the material was kept immersed in the solution for at least 48 hours before dissection. The ischiatic nerve originated from the ventral branch of the last lumbar spinal nerve, either from the sixth lumbar spinal nerve (L6) or from the seventh (L7), when present, and from the ventral branches of first and second sacral spinal<br />nerves (S1 and S2, respectively), and possibly from the ventral branch of third sacral spinal nerve (S3). The ischiatic nerve provided branches to the superficial gluteal, middle gluteal, accessory gluteal, deep gluteal, gemelli, quadratus femoris, adductor, biceps femoris, semitendinosus and semimembranosus muscles. The tibial and common peroneal nerves were the terminal branches of the ischiatic nerve, originating distally towards the greater trochanter of the femur bone. Wilcoxon’s test (0.05) showed that statistically there were no significant differences between the frequencies of the muscular branches of the ischiatic nerve and the antimeres, regardless of the number of muscular branches.

It was aimed with this research to evaluate the performance of broiler chickens fed diets containing increasing levels of acerola meal in replacement of corn and analyze the economic viability of that production system. A total of 980 day-old male Cobb chicks were used, allotted in a completely randomized design, with four treatments - inclusion levels (0%, 5%, 10% and 15%) of acerola meal in replacement of corn – and seven replications with 35 birds per experimental unit. The birds were weighed at 21 and 42 days of age to measure the performance data. In the period between 1 and 21 days of age, differences were observed in the feed intake and feed:gain only, in which the inclusion of acerola meal linearly decreased feed intake and improved feed:gain up to a level of 10.25%. For the total rearing period, the control treatment showed higher body weight. The feed:gain showed linear effect, worsening the results with increasing amounts of acerola meal in the diets. In the same period, there was no significant difference in feed intake and productive efficiency index. With regard to the economic analysis, it was found that the lowest final cost per broiler was observed in diets with 10% of acerola meal inclusion in replacement of corn. | Objetivou-se com a pesquisa avaliar o desempenho de frangos de corte alimentados com dietas contendo níveis crescentes de inclusão de farelo de acerola em substituição ao milho e analisar a viabilidade econômica desse sistema de produção. Foram utilizados 980 pintos de corte com um dia de idade, machos, da linhagem <em>Cobb</em>, distribuídos num delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos - níveis de inclusão (0, 5, 10 e 15%) de farelo de acerola em substituição ao milho - e sete repetições com 35 aves por unidade experimental. Aos 21 e 42 dias de idade as aves foram pesadas para a mensuração dos dados de desempenho. No período de 1 a 21 dias de idade, foram observadas diferenças somente no consumo de ração e na conversão alimentar, onde a inclusão de farelo de acerola diminuiu linearmente o consumo de ração e melhorou a conversão alimentar até o nível de 10,25%. No período total de criação o tratamento controle apresentou maior peso corporal. A conversão alimentar apresentou efeito linear, piorando os resultados com o aumento da quantidade de farelo de acerola nas dietas. Nesse mesmo período, não houve diferença significativa no consumo de ração e no fator de produção. Quanto à análise econômica, verificou-se que o menor custo final por frango foi observado nas dietas com 10% de inclusão de farelo de acerola em substituição ao milho.

Os tumores das glândulas mamárias são as neoplasias mais comuns em cadelas em nosso país; no entanto, são poucos os trabalhos brasileiros dedicados ao estudo clinicopatológico e de sobrevida nesta doença. O presente trabalho teve por objetivo o estudo clínico e patológico dos tumores mamários caninos na Região Metropolitana de Santos, uma área no estado de São Paulo com uma população canina estimada em 120 mil animais. Dados de 14.298 cães foram coletados retrospectivamente dos prontuários médicos do Hospital Veterinário da Universidade Metropolitana de Santos – São Paulo – Brasil. Durante o período do estudo, foram atendidas 317 fêmeas com diagnóstico histopatológico de neoplasia, dos quais, 170 se referiam a lesões mamárias epiteliais distribuídas em 13 tumores benignos, 152 malignos (89,4% dos diagnósticos) e 5 lesões epiteliais não-neoplásicas (hiperplasia ductal). O tumor mais frequente foi o carcinoma tubular (38,2% dos tumores malignos) e tumores de grau I, respondendo por 73,0% do total diagnosticado. Estudos de sobrevida apontaram para o estadiamento clínico das neoplasias mamárias caninas como importante fator prognóstico, e na análise multivariada, diâmetro do tumor, grau histológico, quimioterapia adjuvante e recorrência apresentaram-se como covariáveis com valor preditivo de sobrevida. Levando-se em conta a elevada prevalência de carcinoma tubular simples na população canina de Santos, pode-se considerá-la como promissor modelo translacional para o estudo da doença.<strong></strong> | Tumors of the mammary glands are the most common neoplasms in dogs in our country; however, there are few Brazilian reports dedicated to clinicopathological and survival studies about this disease. This report aims the clinical and pathological study of canine mammary tumors in the Santos Metropolitan Region, an area in Sao Paulo state with an estimated canine population of 120,000 animals. Data of 14,298 dogs were collected retrospectively from the medical records of the Veterinary Medical Teaching Hospital of the Metropolitan University of Santos – São Paulo – Brazil. During the study period, from records of 317 females with histopathological diagnosis of neoplasia, 170 were mammary epithelial lesions distributed in 13 benign tumors, 152 malignant (89.4% of diagnosis) and 5 non-neoplasic epithelial lesions (ductal hyperplasia). The highest prevalent malignant tumor was tubular carcinoma (38.2% of diagnosis) and Grade I tumors, corresponding to 73.0% of all diagnosis. The results have shown clinical staging of canine mammary neoplasms as an important prognostic survival factor and, in a multivariate analysis, tumor diameter, tumor grade, adjuvant chemotherapy and recurrence as covariates with predictive value for survival. Moreover, the high prevalence of tubular carcinoma qualifies the canine population ofSantosas a promising model for the translational study of this disease.

O presente estudo teve como objetivo investigar em camundongos machos e fêmeas o efeito da exposição a uma formulação comercial de glifosato durante o período de pré-pubere em modelos comportamentais de emocionalidade, ansiedade e depressão. Para isto, camundongos foram expostos a partir de 23 dias de idade (dia pós-natal- PND) até o PND 45 ao glifosato (50 mg/kg, oral route) ou solução salina. Dez dias após o término do tratamento, os animais, machos e fêmeas, foram observados no campo aberto (OF), labirinto em cruz elevado (EPM) ou teste de natação forçada (FWT). Os resultados mostraram que a exposição ao glifosato: 1) reduziu de forma similar a frequência de locomoção dos camundongos em ambos os sexos; 2) reduziu a atividade motora tanto no OF como no PM em camundongos machos, sem alterações observadas em fêmeas; 3) no SWT os camundongos machos apresentaram redução no tempo de flutuação similar ao das fêmeas. Concluiu-se que a exposição pré-pubere ao glifosato reduziu em machos a capacidade de exploração no OF e EPM e no tempo de flutuação no FWT sugerindo que o herbicida interferiu com mecanismos centrais relacionados com masculinização do cérebro ligados a exploração e ansiedade. No FWT observou-se menor depressão em machos e exacerbação da resposta em fêmeas. | The present study aims to investigate the effects of pre-pubertal exposure of male and female mice to a commercial formulation of glyphosate on sexual dimorphism observed in animal models of emotionality, anxiety and depression. For this, mice were exposed from 23 days of age (PND) until PND 45 to glyphosate (50 mg/kg, <em>per os</em>) or saline solution, and, ten days after the end of treatments, male and female mice were observed in the open field (OF), elevated plus maze (EPM) or forced swimming test (FWT). Results showed that exposure to glyphosate: 1) reduced the locomotion frequency of male mice similarly to female mice in the OF and female mice had an increase in rearing behavior and in the immobility time; 2) reduced in male mice the motor activity both in the OF and EPM, while no effects were observed in female mice; 3) in the SWT male mice had a decreased time of float similarly female mice. We concluded that pre-pubertal exposure to glyphosate reduced in male mice the capacity of exploration in the OF and EPM tests suggesting that the herbicide interfered with the central mechanism related to brain masculinization of exploratory and anxiety behavioral models. In the FWT it was observed a decreased depressive response in male mice while in female an increased response was detected.

The aim of the study was to evaluate the effect of feeding two levels of crude protein (CP) (low: 142 g CP/kg DM; and high: 156 g CP/kg DM) and two nitrogen sources (soybean meal and urea) to dairy cows using sugar cane as forage on microbial protein synthesis, the composition of the milk nitrogen fraction, nitrogen (N) balance and blood parameters. Twelve Holstein cows with an average milk yield of 22.0 ± 2.3 kg/day, and with 235 ± 40 days in milk were included in this study. The animals were grouped into three balanced and contemporary 4x4 Latin squares for an experimental period of 21 days. On the 15^th day of each period, milk and urine samples were collected for microbial protein synthesis determination. Total excretion of urine (L/day), milk urea nitrogen (MUN) and blood urea were higher for the diets with high CP, regardless of the nitrogen source. Nitrogen efficiency was higher for cows fed diets with low CP. Cows in the final third of lactation can be fed diets with reduced CP levels, regardless of the nitrogen source, soybean meal or urea, without influencing the synthesis of microbial protein or the composition of the nitrogen fraction of milk. | O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de dois teores de proteína bruta (PB) (baixa: 142 g de PB/kg de MS e alta: 156 g de PB/kg de MS) e de duas fontes nitrogenadas (farelo de soja e ureia) na dieta de vacas leiteiras, alimentadas com cana-de-açúcar como volumoso sobre a síntese de proteína microbiana, composição da fração nitrogenada do leite, balanço de nitrogênio (N) e parâmetros sanguíneos. Foram utilizadas 12 vacas Holandesas com produção média de 22,0 ± 2,3 kg leite/dia, no terço final de lactação (235 ± 40 dias em lactação), agrupadas em três quadrados latinos balanceados e contemporâneos 4x4, com período experimental de 21 dias, dos quais 14 para adaptação as dietas e os demais para coleta de amostras. A excreção total de urina (L/dia), o NUL e a ureia sanguínea foram maiores para as dietas com alta PB, independentemente da fonte nitrogenada. A eficiência de utilização do N foi maior para as vacas alimentadas com dietas com baixa PB. Vacas no terço final da lactação podem ser alimentadas com dietas com teores reduzidos de PB, independentemente de a fonte nitrogenada ser farelo de soja ou ureia, sem influenciar a síntese de proteína microbiana, a composição da fração nitrogenada do leite e obter maior eficiência de utilização do N da dieta.

Current research studied, by dissection, the origin and distribution of the ischiatic nerve in 30 fetuses of mixed-breed male or female sheep (Ovis aries), obtained from abortions, stillborns and natural deaths of pregnant females on farms in the Triângulo Mineiro region, state of Minas Gerais, Brazil. Formaldehyde 10% was injected through the cannulation of descending thoracic aorta and the material was kept immersed in the solution for at least 48 hours before dissection. The ischiatic nerve originated from the ventral branch of the last lumbar spinal nerve, either from the sixth lumbar spinal nerve (L6) or from the seventh (L7), when present, and from the ventral branches of first and second sacral spinal nerves (S1 and S2, respectively), and possibly from the ventral branch of third sacral spinal nerve (S3). The ischiatic nerve provided branches to the superficial gluteal, middle gluteal, accessory gluteal, deep gluteal, gemelli, quadratus femoris, adductor, biceps femoris, semitendinosus and semimembranosus muscles. The tibial and common peroneal nerves were the terminal branches of the ischiatic nerve, originating distally towards the greater trochanter of the femur bone. Wilcoxon’s test (0.05) showed that statistically there were no significant differences between the frequencies of the muscular branches of the ischiatic nerve and the antimeres, regardless of the number of muscular branches.