Flavonoids have been isolated with several biological activities and there are correlations among the consumption of rich foods in flavonoids and heart diseases. The 7-glucosyl-apigenin, 7- bisulfate-apigenin, 7-glucosyl-luteolin, 7-bisulfate-luteolin flavonoids and bixin and norbixin were isolated from urucu seeds. The aim of this study was to test the bixin and norbixin dyes and quercetin flavonoid from urucu and bixin with quercetin association to obtain its hypolipidemic effects in rabbits. Induction of hyperlipidaemia was performed with 1% cholesterol + 0,1% colic acid during 28 days. The substances were applied through the oral route, in capsule, in the doses of 0,01 mol/kg body weight. Total cholesterol, HDL-cholesterol and triacylglycerols have quantified from serum, after 28 days, and showed in mg/dL The best results for total cholesterol reduction and the HDL-cholesterol elevated levels maintenance was obtained with bixin. On the other hand, the best results for triacylglycerols reduction have been obtained with quercetin. The bixin and quercetin association showed efficacy to HDL-cholesterol and triacylglycerols and norbixin to total cholesterol and HDL-cholesterol. These results stimulate further research on the use of these substances as pharmacs in the heart diseases treatment and/or prevention. | Os flavonóides apresentam diversas atividades biológicas (antioxidantes, antiinflamatórios, anticancerígenos, dentre outras) e estreitas correlações entre o consumo de alimentos ricos em flavonóides e doenças cardíacas. Pesquisas mostram que os flavonóides 7-glicosil-apigenina, 7-bissulfato-apigenina, 7-glicosil-luteolina, 7-bissulfato-luteolina e os corantes bixina e norbixina foram isolados e identificadas suas estruturas de sementes de urucum. O objetivo deste estudo foi testar, isoladamente bixina, norbixina e a quercetina, presentes no urucum e a associação da bixina com a quercetina, para verificar seus efeitos hipolipidêmicos em coelhos. A hiperlipidemia foi induzida misturando à ração colesterol 1% + ácido cólico 0,1%, durante 28 dias. As substâncias testadas foram fornecidas na dose de 0,01 mol/kg de peso corporal, por via oral, em cápsulas. Após 28 dias, as dosagens sorológicas foram efetuadas e os resultados expressos em mg/dL de colesterol, colesterol-HDL e triacilgliceróis. De acordo com os resultados obtidos, concluiu-se que a bixina apresentou o maior valor na redução do colesterol total embora não tenha sido significativo na manutenção dos níveis elevados de colesterol-HDL e a quercetina na redução dos triacilgliceróis. A bixina apresentou melhor eficácia em relação ao colesterol-HDL uma vez que a redução deste parâmetro foi menor (-11,43%) ao se comparar o grupo 3 com o grupo 2, sendo vantajoso, já que esta lipoproteína transporta o colesterol da circulação sangüínea para o fígado. Com relação à concentração de triacilgliceróis, a quercetina apresentou a maior percentagem de redução e a associação bixina + quercetina apresentou uma percentagem de --38,92%, que foi maior que a bixina isoladamente. Assim, estas substâncias apresentaram potencial para serem, futuramente, utilizadas como fármacos, no tratamento e/ou na prevenção de doenças cardíacas, diabetes e outras.

Thirty sets of genital organs from adult goats were collected in specialized slaughter houses. Two procedures were utilized in this experiment: 1) injection of red dyed neoprene latex 450 followed by fixation in a 10% formaldehyde water solution; 2) injection of cinabrium dyed gelatin followed by a diafanization process using the method of Spalteholz. It was observed that the vessels responsible for the blood irrigation of the womb tubes come from the ovarian arteries. The ovarian arteries in all samples had their origin in abdominal aortas varying only in their position, uterine, lateral or uterine lateral. Besides being responsible for the blood irrigation of the ovaries, the ovarian arteries also created branches to the womb. The womb tube divides into a mid tube artery, which irrigates the mid portions of the tubes and into a stream tube artery, which is responsible for the irrigation of the caudal portion of the womb tube and the extremity of the uterus. It also irrigates the skull tube artery, that originates from the womb tube artery and arterially supplies the skull portions of the womb tubes. Histologically, all the segments of the tubes (isthmus, phial and inphundibulum) showed a simple, cylindrical, ciliated epithelium and were also constituted by the mucous and the muscular layers by a serous membrane. | Estudaram-se trinta conjuntos de órgãos genitais femininos de cabras sem raça definida, adultas, coletadas em abatedouros especializados. Foram usadas duas técnicas para este experimento: 1) injeção de látex Neoprene 450 corado em vermelho, seguida da fixação em solução aquosa de formol a 10%. 2) injeção de gelatina corada com cinábrio, seguida do processo de diafanização, pelo método de Spaltholz. Observou-se que os vasos destinados à irrigação sangüínea das tubas uterinas provêm das artérias ováricas. Em todos os espécimes (100%) as artérias ováricas tiveram sua origem na aorta abdominal ventralmente, lateralmente e ventrolateralmente ao vaso. As artérias ováricas, além de serem responsáveis pela irrigação sangüínea dos ovários, emitem ramos para as tubas uterinas. A artéria tubouterina subdivide-se em artérias tubárica média, a qual irriga as porções médias das tubas, e tubárica caudal, responsável pela irrigação das porções caudais das tubas uterinas e da extremidade cranial do corno uterino. A artéria tubárica cranial também originária da artéria tubouterina supre as porções craniais das tubas uterinas. Histologicamente, todos os segmentos tubáricos (istmo, ampola e infundíbulo) apresentaram epitélio simples, cilíndrico na mucosa, uma camada muscular e uma serosa.

In vivo internal and external pelvimetry was carried out in 255 mixed female buffaloes. A Menissier-Vissac pelvimeter was used for the internal measurements. The results were compared to age, heart girth, body weight, height and length. In order to compare the pelvic measurements, the animals were equitably divided into 3 groups (n=85) according to parturition occurrence and frequency (nuliparous, primiparous and multiparous). The internal transverse (horizontal) pelvic diameters, dorsal and ventral bi-iliac and the sacro-pubic (vertical) were respectively: 17.1 ± 2.17 cm; 15.7 ± 2.11 cm and 22.3 ± 2.51 cm; and the external bi-iliac (hipwidth), bi-isquiatic (pin width) and ilioisquiatic (rump length): 59.8 ± 6.13 cm; 32.4 ± 3.56 cm and 44.5 ± 3.31 cm, respectively. Significant positive correlations (p < 0.01) were obtained for all measurements but heart girth was found to have the highest correlations to pelvic measurements. Adjusted means by heart girth revealed significant differences (p < 0.05) for the 3 groups in respect to internal pelvimetry. However, as it concerns to external pelvimetry, significant differences were found only between the nuliparous and the other two groups for the bi-iliac and ilioisquiatic; for the bi-isquiatic diameter no significant differences were found. The internal pelvimetry was found to be less correlated to the body size and more evidently affected by the successive parturition occurrence. | Mensurações pélvicas internas e externas foram realizadas in vivo em 255 búfalas mestiças. Para a pelvimetria interna, utilizou-se o pelvímetro de Menissier-Vissac. Os resultados foram confrontados com a idade, perímetro torácico, peso, altura e comprimento. Para comparação das medidas pélvicas, os animais foram divididos equitativamente em 3 grupos (n=85), segundo a ocorrência e freqüência de partos (nulíparas, primíparas e multíparas). Os diâmetros pélvicos internos: biilíacos superior e inferior (horizontais) e sacropúbico (vertical) apresentaram respectivamente as seguintes médias e desvios padrões: 17,1 ± 2,17 cm; 15,7 ± 2,11 cm e 22,3 ± 2,51 cm; e os externos: biilíaco, biisquiático e ilioisquiático, da mesma maneira: 59,8 ± 6,13 cm; 32,4 ± 3,56 cm e 44,5 ± 3,31 cm. Correlações positivas significantes (p < 0,01) foram verificadas entre todas as medidas, porém, dentre as medidas corpóreas gerais, o perímetro torácico revelou o mais alto índice de correlações com as medidas pélvicas internas e externas. Diferenças significativas (p < 0,05) entre os 3 grupos foram observadas em relação à pelvimetria interna, quando comparados através das médias ajustadas em função do perímetro torácico, porém em relação à pelvimetria externa somente entre as nulíparas e os demais grupos para os diâmetros biilíaco e ilioisquiático. Para o diâmetro biisquiático externo nenhum dos grupos revelou tais diferenças. A pelvimetria interna em relação à externa mostrou-se menos correlacionada com o desenvolvimento corpóreo e mais nitidamente influenciada pela ocorrência dos sucessivos partos.

The present study was accomplished in a farm in the municipality of Viradouro, in Northeast region of São Paulo State, aiming at monitoring during a period of 8 month the serum neutralizing antibody titers against BHV-1, in calves born from BHV-1 naturally infected or not infected cows. These cows were vaccinated and revaccinated against Infectious Bovine Rhinotracheitis (IBR) before parturition. The blood serum of 34 calves, separate in four groups, were analysed in this experiment. The results demonstrated that in groups of calves borned from soropositive and unvaccinated cows, the colostral antibodies persisted, in mean, until the calves were 3 months old. Calves borned from vaccinated cows, independent of these cows being infected or not, in general, presented means of antibody titers higher than the means presented by calves from unvaccinated cows. However, not even these antibody titers impeded the calves infection owing to high prevalence of BHV-1 (86.8%) in the locality of the study. The high prevalence of BHV-1 (86.8%) in the locality of the study resulted in the detection of maternal antibodies, by the serum neutralization test, in calves borned from uninfected cows, probably as a result of cows seroconversion in the interval between the screening test and parturition. The high prevalence also led to the infection of the calves from unvaccinated cows after the decline of colostral antibodies. | O presente estudo foi realizado em uma fazenda do município de Viradouro, localizada no Nordeste do Estado de São Paulo. Teve como objetivo monitorar ao longo de 8 meses os títulos de anticorpos neutralizantes para o BHV-1, em bezerros nascidos de vacas que estavam ou não infectadas naturalmente por este vírus e que foram vacinadas e revacinadas contra a Rinotraqueíte Infecciosa Bovina (IBR) antes do parto. Foram analisados, através do teste de soroneutralização, os soros sangüíneos de 34 bezerros, divididos em quatro grupos. Os resultados obtidos demonstraram que nos grupos de bezerros nascidos de vacas reagentes e não vacinadas os anticorpos de origem colostral persistiram, em média, até os 3 meses de idade. De modo geral, bezerros nascidos de vacas vacinadas, independentemente de estarem infectadas ou não, apresentaram médias de títulos de anticorpos maiores que as médias demonstradas por bezerros provenientes de vacas não vacinadas. No entanto, devido à elevada prevalência do BHV-1 (86,8%) no local de estudo, mesmo esses títulos de anticorpos não impediram a infecção desses animais. A alta prevalência do BHV-1 resultou na detecção de anticorpos de origem materna em bezerros nascidos de vacas que, inicialmente, não foram reagentes ao teste de soroneutralização, provavelmente como resultado da soroconversão das respectivas mães no intervalo transcorrido entre a triagem e o momento do parto. A alta prevalência observada também ocasionou a infecção dos bezerros, filhos de vacas não vacinadas, após o declínio dos anticorpos de origem colostral.

Buffalo has peculiar reproductive patterns, which make artificial insemination programs a hard and expensive task. Artificial insemination in fixed time is advantaged because females show low incidence of homosexual behaviour and strong dominance relationships, which leads to a poor accuracy in estrus detection. The aim of this experiment was to compare the efficiency of two different GnRH agonists in the GnRH/PGF2alpha/GnRH protocol (Buserelin vs Lecirelin). Two hundred and seventy buffaloes with 45 to 60 days postpartum were synchronized and fixed-time inseminated. The animals were kept on pasture in two farms at São Paulo and Mato Grosso do Sul (Brazil). Cows in Group 1 (n = 132) received, intramuscularly, 20 µg of Buserelin at a random day of the estrous cycle and, seven days later, 15 mg of prostaglandin F2alpha. Two days after prostaglandin administration, 10 µg Buserelin were intramuscularly injected. Cows in Group 2 (n = 138) were treated with the same protocol, but with intra-muscular administrations of Lecirelin (50 µg in the first administration and 25 µg in the second). Artificial insemination was performed 16 hours after the last injection in both groups. Pregnancies were diagnosed by ultrasonography (Pie Medical 480, 5.0 and 7.5 MHz linear probe), 30 days after artificial insemination. Conception rates were not influenced by farm (P >; 0.05) and were similar in both groups [Group 1: 47.0% (62/132); Group 2: 50.0% (69/138); P >; 0.05]. Results show that Lecirelin is as efficient as Buserelin to synchronize ovulation for fixed-time artificial insemination in buffaloes. | O uso de protocolos de sincronização da ovulação em bubalinos é bastante vantajoso, em virtude de certas peculiaridades apresentadas pela espécie que podem prejudicar programas de inseminação artificial, como a baixa incidência de comportamento homossexual e relações de dominância entre os animais. Com o objetivo de verificar a eficácia da Lecirelina como agonista de GnRH no protocolo GnRH/PGF2alfa/GnRH, 270 búfalas, com período pós-parto entre 45 e 60 dias, mantidas a pasto em duas propriedades, foram submetidas a dois tratamentos de sincronização da ovulação. Os animais do Grupo 1 (n = 132) receberam, em dia desconhecido do ciclo estral, 20 µg de Buserelina IM, sendo aplicados, 7 dias mais tarde, 15 mg de prostaglandina (PGF2a). Dois dias após a administração da PGF2alfa, os animais receberam 10 µg de Buserelina, IM. As fêmeas do Grupo 2 (n = 138) foram tratadas seguindo o mesmo protocolo, com a diferença de que, na primeira e na terceira administrações hormonais, se aplicaram, respectivamente, 50 µg e 25 µg de Lecirelina, IM. A inseminação artificial foi efetuada em tempo fixo, 16 horas após a terceira administração hormonal, em ambos os grupos. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultra-sonografia, 30 dias após a inseminação artificial. As taxas de concepção foram semelhantes [47,0% (62/132) e 50,0% (69/138) nos Grupos 1 e 2 (P >; 0,05)]. Não foi observado efeito da propriedade (P >; 0,05) nas taxas de concepção. Os resultados demonstram que é possível utilizar Lecirelina para promover a sincronização da ovulação de bubalinos, com resultados satisfatórios.

Eleven juvenile green turtles (Chelonia mydas) from Atlantic Ocean, Brazil, with multiple cutaneous papillomatosis were examined. Histologically, the papillomas exhibit stromal hyperplasia proliferation and epithelial proliferation. The epithelial cells had nuclear changes suggestive of viral infection and severe nuclear pleomorphism. A large nuclear halo was present in the cases of epithelial proliferation; in these cells, nuclear features were frequently dyscariotic, without inclusion. All fibropapillomas examined were negative for papillomavirus group-specific antigens (BPV) and herpesvirus group-specific antigens (HSV1 / HSV2) by the peroxidase-antiperoxidase technique. Electronic microscopy investigation was negative for papillomaviruses and herpes-viruses particles. | Onze tartarugas verdes juvenis (Chelonia mydas) originárias do Oceano Atlântico, Brasil, com múltiplas lesões cutâneas papilomatosas foram examinadas. Histologicamente, os papilomas exibiam proliferação estromal hiperplásica e proliferação epidermal. As células epiteliais apresentavam alterações nucleares sugestivas de infecção viral e pleomorfismo nuclear severo. Um halo grande nuclear estava presente nos casos de proliferação epitelial; nessas células, características nucleares foram freqüentemente discarióticos, sem inclusão. Todos os fibropapilomas examinados foram negativos para antígenos grupo-específico para papilomavírus (BPV) e antígenos grupo-específico para herpesvírus (HSV1/HSV2) pela técnica peroxidase-antiperoxidase. Investigação por microscopia eletrônica foi negativa para partículas virais de papilomavírus e herpesvírus.

The cranial and caudal mesenteric arteries of Saanen goats are found in the stomach and intestines of the animals. They were examined in the present study in order to understand the details of the arterial circulation of these organs. Thirty fetuses were examined (19 males and 11 females). To reach the objectives of the study the arteries of the area were dissected after being injected with a solution of Neoprene latex 450 colored with specific pigment. The cranial mesenteric artery originated from the aorta in the lower abdomen, and extended caudally to the celiac artery in 93.3% of the cases or to a common trunk (celiac mesenteric) in the other 6.66% of the cases. From this artery were emitted the following branches: left adrenal branches (100%); right adrenal branches (100%); pancreatic branches (96.66%); the caudal pancreatic duodenal artery (100%); the middle colic artery (96.66%); the ileac colic artery (100%); jejunal arteries (100%) and the pancreatic colic artery (3.33%). The mesenteric caudal artery originated on the ventral face of the aorta in the lower abdomen and extended caudally in 100% of the observations. It emitted the left colic artery and the cranial rectal artery in 100,0% of the cases and, in 3.33% of the cases, gave origin to the left testicular artery. | Estudaram-se as origens e ramificações das artérias mesentéricas cranial e caudal que se destinam às vísceras abdominais, em particular aos estômagos e intestinos de caprinos da raça Saanen, com o intuito de conhecer os pormenores da circulação arterial destes órgãos. Utilizaram-se, para tanto, 30 fetos (19 machos e 11 fêmeas). Adotou-se a metodologia de dissecação dos vasos, previamente injetados com solução de látex Neoprene 450, corada com pigmento específico. A artéria mesentérica cranial originou-se da artéria aorta descendente abdominal, caudalmente à artéria celíaca em 93,33% dos casos e em tronco comum (tronco celiacomesentérico) em 6,66% dos casos, e emitiu, a seguir, os seguintes ramos: ramos adrenais esquerdos (100%), ramos adrenais direitos (100%), ramos pancreáticos (96,66%), artéria pancreático-duodenal caudal (100%), artéria cólica média (96,66%), artéria ileocecólica (100%), artérias jejunais (100%) e artéria pancreaticocólica (3,33%). A artéria mesentérica caudal originou-se da face ventral da artéria aorta descendente abdominal em 100% das observações e emitiu as artérias cólica esquerda e retal cranial em 100% dos casos e, em 3,33% das preparações, deu origem à artéria testicular esquerda.

This paper describes articular lesions induced by inoculation of one-day-old broiler chicks with an avian reovirus strain (S-1133) by oral and foodpad routes. The hock joint of five birds from inoculated and control groups were collected in the periods of 24, 48, 72 hours and at weekly intervals from 1 to 8 weeks post inoculation for histopathological examination. The first inflammatory changes were seen in tendon sheaths one week post inoculation. On the second week postinoculation there were fibroplasia, formation of lymphoid follicles and sinovial membrane cells hyperplasia, progressive lesions seen until the end of experiment. The articular lesions were similar occurring simultaneously in both inoculated groups, nevertheless the lesions were more severe in the group inoculated via footpad. | Este trabalho descreve as lesões articulares induzidas pela inoculação oral e podal de uma amostra de reovírus aviário (S-1133) em pintos de corte de um dia de idade. Realizou-se o exame histopatológico de fragmentos da articulação tibiotársica utilizando-se cinco aves dos grupos inoculados e grupo controle nos períodos de 24, 48, 72 horas e semanalmente até a oitava semana após a inoculação. A primeira alteração observada foi um infiltrado inflamatório misto nas bainhas tendinosas uma semana após a inoculação. Na segunda semana após a inoculação, houve fibroplasia, formação de folículos linfóides e hiperplasia das células da membrana sinovial, alterações progressivas observadas até o final do período experimental. As lesões articulares foram similares, ocorrendo simultaneamente nos dois grupos inoculados, contudo as alterações foram mais severas no grupo inoculado no coxim plantar.

Este trabalho teve como objetivo estudar em animais da raça Mangalarga os efeitos das frações da lavagem uterina, do dia da colheita (D7 ou D8), do tamanho do embrião, da idade do corpo lúteo da receptora e da transferência de embriões pela técnica transcervical sobre os índices de recuperação de embriões e de prenhez. Houve diferença significativa (p < 0,05) nos índices de embriões recuperados sobre os totais de colheitas (154) quanto às frações (F)1 (27,3%), (F)2 (15,6%) e (F)3 (18,2%), mas não quanto às taxas de prenhez ((F)1 76,2%; (F)2 83,3% e (F)3 78,6%). Quanto ao dia da colheita D7 ou D8, houve tendência à significância (p = 0,051) nos índices de embriões recuperados (37,5 e 62,8%), mas não houve diferença nos índices de prenhez (66,7 e 78,3%); entretanto, a diferença foi significativa (p < 0,05) para o tamanho dos embriões coletados no D7 (0,230 mm ± 0,035 mm) e D8 (0,896 mm ± 0,063 mm). A idade do corpo lúteo das receptoras (dias 5, 6, 7 e 8 após a ovulação) não alterou significativamente os índices de prenhez (71,4%, 88,9%, 65,4% e 88,6%), respectivamente. Não foram encontradas diferenças significativas (p >; 0,05) nos índices de embriões recuperados (50,9 e 59,5%), bem como nos de prenhez (72,2 and 77,7%), para os anos hípicos 95/96 e 96/97, quando os embriões foram inovulados pela técnica transcervical. | This study had the objective of evaluating the effect of uterine flushing part, flushing day (D7 or D8), embryo size, age of recipients corpus luteus and transcervical technique on embryos recovery and in the pregnancy rates. There were differences (p < 0.05) in embryos recovery rates on overall flushing (154) in relation to the flushing part (F.P.) 1 (27.3%), 2 (15.6%) and 3 (18.2%), but not statistical differences (p >; 0.05) for the pregnancy rates (F.P.1, 76.2%; F.P.2, 83.3% and F.P.3, 78.6%). There was statistically tendency (p = 0.051) in the number of recovered embryos (37.5 and 62.8%) in the D7 or D8, respectively. However, there was no difference (p >; 0.05) in the pregnancy rates (66.7 and 78.3%), when the embryos were recovered in the D7 or D8. It could be observed statistically differences (p < 0.05) in the embryos size, which were collected at D7 (0.230 mm ± 0.035 mm) and D8 (0.896 mm ± 0.063 mm). It's appropriate to emphasize that the pregnancy rates did not suffer any influence. Considering the age of the recipient corpus luteus at 5, 6, 7 and 8 days after the ovulation, there were no differences in pregnancy rates 71.4, 88.9, 65.4 and 88.6%, respectively, during the breeding season 96/97. There were not found relevant differences (p >; 0.05) in the recovered embryos (50.9 and 59.5%) and pregnancy rates (77.2 and 77.7%), during the breeding season of 95/96 and 96/97, with inovulated embryos by the transcervical technique.

Muitos fatores podem afetar as taxas de gestação após a transferência de embriões em eqüinos. Este estudo teve como objetivo avaliar, em eqüinos da raça Mangalarga e em duas estações reprodutivas, a influência do garanhão e de três diferentes técnicas de inseminação (monta natural, inseminação artificial com sêmen diluído fresco ou resfriado) sobre os índices de recuperação de embriões e de prenhez. No primeiro ano, foram encontradas diferenças significativas (p < 0,05) na recuperação de embriões entre cinco garanhões estudados (28,6; 65,0; 62,9; 66,7 e 84,2%), mas não foram encontradas diferenças significativas (p >; 0,05) nos índices de prenhez (50,0; 80,7; 70,6; 70,0 e 62,5%). No segundo ano, verificou-se uma tendência à significância (p = 0,057), na recuperação de embriões entre quatro garanhões estudados (44,4; 56,2; 71,4 e 73,7%) e não houve diferença significativa (p >; 0,05) nos índices de prenhez (75,0; 55,6; 86,7 e 71,4%). Não houve diferença significativa (p >; 0,05) nos índices de embriões recuperados e de prenhez comparando-se a monta natural (50,0 e 87,5%) e a inseminação artificial com sêmen fresco (60,6 e 73,7%) ou refrigerado (63,8 e 80,3%). | Many factors can affect pregnancy rates after equine embryo transfer. This study had the objective of evaluating the influence of stallion and of three different insemination techniques (natural breed, artificial insemination with fresh or cold semen), on pregnancy and on embryos recovery rates. In the first year, differences were observed (p < 0.05) in embryo recovery rates among the five stallions studied (28.6, 65.0, 62.9, 66.7 and 84.2%), but no statistical differences (p >; 0.05) were detected in pregnancy rates (50.0, 80.7, 70.6, 70.0 and 62.5%). In the second year, it was observed a tendency to statistical significance (p = 0.057) in embryos recovery rates between the stallions (44.4, 56.2, 71.4 and 73.7%), and no statistical differences (p >; 0.05) were detected in pregnancy rates (75.0, 55.6, 86.7 and 71.4%). There were no statistical difference (p >; 0.05) in the number of embryos transferred and in pregnancy rates comparing natural breed (50.0 and 87.5%) and artificial insemination with fresh (60.6 and 73.7%) or cold semen (63.8 and 80.3%).