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<p class="Default">The high susceptibility of sperm to the oxidative stress occurs especially due to high content of poly-unsaturated fattyacids (PUFAs) in its plasma membrane. The PUFAs provide the necessary fluidity to the plasma membrane. Howeverdouble bonds present in those fatty acids are more susceptible to oxidative stress. Studies in human indicate thatcryopreservation may lead to damages to the sperm due to oxidative stress. This study aimed to verify if the antioxidantglutathione (GSH) may protect ovine cryopreserved sperm against damages caused by oxidative stress. Semen samplesof four rams were cryopreserved using Tris-egg yolk extender supplemented with different concentrations of reducedglutathione (control, 1, 5 and 10 mM). After thawing, samples were evaluated using conventional (motility and vigor)and functional tests (membrane integrity and mitochondrial activity). Aliquots of each thawed sample were submitted toprotocol of induced lipid peroxidation using ascorbate (20 mM) and ferrous sulphate (4 mM), with further measurementof tiobarbituric acid reactive substances (TBARS), index of oxidative stress. No effect of GSH was observed on variablesassessed by conventional tests. GSH decreased the proportion of intact acrosomes. Samples treated with 5 mM GSHshowed lower percentage of intact membrane cells when compared to control samples and those treated with 10 mM.The percentage of cells with mitochondrial activity was affected by GSH, but no effect on TBARS. Samples from controlgroup were more susceptible to denaturation of chromatin. In conclusion, the addition of Glutathione (GSH) offersprotection to DNA and mitochondrial activity of ovine sperm.</p> | Os ácidos graxos poli-insaturados garantem fluidez à membrana plasmática do espermatozoide. No entanto, as duplas ligações presentes, os tornam mais susceptíveis aos efeitos nocivos da peroxidação lipídica. A adição do antioxidante Glutationa reduzida (GSH) poderia conferir proteção aos espermatozoides de ovinos submetidos à congelação contra os graves danos causados pelo estresse oxidativo. O objetivo do presente experimento foi avaliar se a GSH protege os espermatozoides ovinos criopreservados contra danos causados pelo estresse oxidativo. Foram colhidos ejaculados de quatro carneiros adultos. As análises convencionais foram: concentração, motilidade, vigor e morfologia. As análises funcionais foram: integridade de membrana, integridade acrossomal, integridade de cromatina e atividade mitocondrial. O sêmen foi criopreservado utilizando o diluidor Tris-gema-critrato, suplementado com GSH (controle, 1, 5 e 10 mM). As amostras foram submetidas ao protocolo de peroxidação lipídica induzida e subsequente quantificação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). As análises estatísticas foram realizadas utilizando o Sistema SAS para Windows. Não houve efeito do tratamento com GSH sobre as variáveis avaliadas pelos testes convencionais. A GSH diminuiu a proporção de acrossomas íntegros. Amostras tratadas com 5mM de GSH apresentaram menor percentual de células com membranas íntegras quando comparadas às amostras controle e aquelas tratadas com 10 mM; o percentual de células sem atividade mitocondrial foi influenciado pela GSH e também não houve efeito nas TBARS. As amostras do grupo controle foram mais susceptíveis à denaturação da cromatina. Em conclusão, a adição do antioxidante Glutationa reduzida confere proteção ao DNA e à atividade mitocondrial de espermatozoides de ovinos.

<p class="Default">Several authors have emphasized the importance of monitoring estrous cycle in bitches and mentioned technique examples of how it can be done. The aim of this study was to evaluate the salivary progesterone quantification technique in order to identify ovulation in this species. To compound the experimental group, 13 bitches of different breeds (no specific breed, English Bulldog, Bernesse Mountain Dog)and different ages (from 11 months to 9 years old) were used. Blood and saliva samples were collected simultaneously in all animals, starting about the first day of proestrus clinical signs. Salivary samples were collected with a specific commercial device (Salivette®). This method was effective, since it has become possible to obtain enough volume in almost all samples to quantify salivary progesterone (100 μLfor duplicate quantification). Serum progesterone was quantified by radioimmunoassay and salivary progesterone by enzyme immunoassay, both of them with commercial kits. There was an increasing, linear and positive correlation between salivary and serum progesterone (r=0.704; p&lt;0.0001) in bitches. One of the animals had an anovulatory cycle, in which, for 13 days, seric progesterone levels were maintained between 1.67 and 3.76 ng/mL and salivary progesterone levels were maintained between 19.55 and 236.77 pg/mL. It was concluded that salivary progesterone levels measured by enzyme immunoassay is a technique that can be used to evaluate the presence or absence of ovulation in bitches.</p> | <p class="Default">Vários autores enfatizaram a importância do monitoramento do ciclo estral em cadelas e citaram exemplos de como realizar tal procedimento. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de dosagem de progesterona salivar em cadelas para identificar a ovulação nesta espécie. Para composição do grupo experimental, foram utilizadas 13 cadelas, de diferentes raças (sem raça definida, Buldogue Inglês, Bernesse Mountain Dog) e diferentes idades (11 meses a 9 anos).Amostras de sangue e saliva foram colhidas simultaneamente em todos os animais, a partir dos primeiros sinais clínicos de proestro. Amostras salivares foram obtidas com o uso de dispositivo comercial específico (Salivette®). Este método foi eficaz, visto ter tornado possível obter volume suficiente para dosagem de progesterona na grande maioria das amostras(100 μL para dosagens em duplicata). As concentrações de progesterona no soro foram determinadas pela técnica de radioimunoensaio e na saliva por enzimaimunoensaio, ambas com kits comerciais. Observou-se uma relação linear crescente e positiva entre a progesterona sérica e salivar (r=0,704; p&lt;0,0001) em cadelas. Uma das cadelas apresentou ciclo anovulatório, no qual, durante 13 dias, as concentrações séricas de progesterona sérica se mantiveram entre 1,67 e3,76 ng/mL e as concentrações salivares de progesterona entre 19,55 e 236,77 pg/mL. Conclui-se que as concentrações de progesterona salivar mensuradas pela técnica de enzimaimunoensaio podem ser utilizadas para avaliar a ocorrência ou ausência de ovulação em cadelas.</p>

Copaiba oleoresin is extracted from the trunk of <em>Copaifera </em>sp genus trees and used for treating wounds in several regions of Brazil. Its antimicrobial and anti-inflammatory effects have been proved, however there are no reports of activity on cell growth. Proliferation of MDBK (<em>Madin Darby Bovine Kidney</em>) cells was evaluated under the influence of different concentrations of Copaiba oleoresin. Control groups consisted of cells in medium without addition of oleoresin (M group) and cells in the medium with application of the solvent Tween 80 at dilution 10-3 (TM group). Decimal dilutions of 10-1 to 10-3 were shown to be toxic and, therefore, the proliferation studies were conducted from dilution 10-4 to 10-7. Cell growth was faster in all groups that received the Copaiba oleoresin dilutions in the first 24 hours, specially the 10-5 dilution group, which proliferation rate was 5,47 higher than that of M group. It was concluded that Copaiba oleoresin stimulates cell multiplication, which may be one mechanism of its positive effect on wound healing, in association with those previously known. | <p class="Default">O óleo de copaíba é uma resina extraída pela perfuração do tronco de árvores do gênero <em>Copaifera </em>sp., usado como cicatrizante em várias regiões do Brasil. São comprovados seus efeitos antimicrobianos e antiinflamatórios, sem relatos de atividade sobre a proliferação celular. No presente trabalho foi observada a dinâmica da proliferação de células MDBK (<em>Madin Darby Bovine Kidney</em>) mantidas em meio de cultivo adicionado de diferentes concentrações do óleo de copaíba, utilizando-se como controle células mantidas em meio sem adição do oleoresina (grupo M) e células no meio com aplicação do solvente tween 80, na diluição 10-3 (grupo MT). Diluições decimais de 10-1 até 10-3 mostraram-se tóxicas e, portanto, os estudos de proliferação partiram da diluição 10-4 até 10-7. Observou-se que houve crescimento mais acelerado em todos os grupos adicionados do óleo-resina nas primeiras 24 horas, com destaque para a diluição 10-5, que teve sua taxa de proliferação 5,47 vezes maior que a do grupo M. Concluiu-se que o óleo-resina de copaíba se mostrou estimulante da multiplicação celular, o que pode ser um dos mecanismos de seu efeito positivo sobre a cicatrização, somado àqueles previamente comprovados na literatura.</p>

<p>The effects of swim bladder injection with thioglycolate, <em>Escherichia coli </em>lipopolysaccharide (LPS) and heat-inactivated <em>Aeromonas hydrophila </em>were assessed on hematological responses in pacu, <em>Piaractus mesopotamicus </em>(Characidae). A quantitative assessment was done on erythrocytes, thrombocytes e leucocytes at 6, 24, and 48 h pos-injection of the inflammatory agents and compared with fish injected with saline solution (control). Fish injected with inactivated <em>A.hydrophila </em>showed a reduction of erythrocytes and hemoglobin, whereas the hematocrit increased 6 h pos-injection.The results show that thioglycolate and LPS also induced a reduction on hemoglobin and an increase on the hematocrit. The thrombocytes count decreased 6 h post <em>A. hydrophila </em>injection, whereas increased 48 hours post LPS injection. The leukocytes count increased after 6 h post <em>A. hydrophila </em>injection, while the lymphocytes and PAS-positive granularleukocytes (PAS-LG) count decreased after 24 h post injection. In fish injected with thioglycolate or with LPS showed an increase in the LG-PAS counts when compared to <em>A. hydrophila </em>or control groups. The monocytes count was not affected by the different inflammatory agents.<strong></strong></p> | <p>Os efeitos da injeção de tioglicolato, lipolissacarídio de <em>Escherichia coli </em>e <em>Aeromonas hydrophila </em>inativada na bexiganatatória de pacus, <em>Piaractus mesopotamicus </em>(Characidae) foram avaliados quanto às respostas de células vermelhas,leucócitos e trombócitos do sangue. Ensaios quantitativos de eritrócitos, leucócitos e trombócitos foram realizados6, 24 e 48 h após os estímulos e comparados com peixes que receberam solução salina 0,65% pela mesma via. Peixes inoculados com <em>A. hydrophila </em>apresentaram redução do número de eritrócitos e da taxa de hemoglobina enquanto ohematócrito aumentou 6 h após o estímulo. Os resultados mostraram que o tioglicolato e o LPS também induziram redução da hemoglobina e aumento do hematócrito. A contagem de trombócitos diminuiu 6 h após a inoculação de<em>A. hydrophila </em>inativada e aumentou 48 horas após a injeção de LPS. A contagem de leucócitos aumentou 6 h após ainoculação de <em>A. hydrophila </em>enquanto a de linfócitos a leucócitos granulares PAS positivos (PAS_LG) diminuiu 24 hdepois. Peixes injetados com tioglicolato o LPS apresentaram aumento do número de LG_PAS em relação aos inoculadoscom <em>A. hydrophila </em>inativada ou grupo controle. A contagem de monócitos não foi afetada pelos diferentes agentes.</p>

<p>Considering the limitations of current methods of anaplasmosis control, the development of a more effective vaccine is required. Previous studies, using proteomic and genomic approaches, have identified new membrane proteinsin Anaplasma marginale that may be vaccine candidates. These include VirB9, VirB10 and elongation factor-Tu (EFTu).Although the role of these proteins in the membrane of A. marginale has not been properly characterized, production of the recombinant proteins rVirB9, rVirB10, and rEF-Tu has been achieved. However, these recombinant proteins have not yet been exploited in vaccine formulations. The present study describes the use of rVirB9, rVirB10and rEF-Tu, emulsificated in adjuvant Montanide, in mice. A strong humoral immune response was induced under these conditions, with both IgG1 and IgG2a production. The IgG2a/IgG1 ratios revealed a predominance of IgG1.However, splenocytes of the animals that received rVirB9 or rVirB10 produced high levels of gamma interferon after in vitro stimulation, indicating a specific cellular immune response to these proteins. Therefore, further studies are required to adjust the profile of the immune response in order to perform tests of protection against A. marginale in cattle.</p> | <p>Considerando as limitações dos atuais métodos de controle contra a anaplasmose bovina, o desenvolvimento de uma vacina efetiva se faz necessário. A partir do advento da análise genômica e proteômica, novas proteínas de membrana de Anaplasma marginale foram identificadas como possíveis candidatas a componentes de uma vacina, tais como, VirB9,VirB10 e Fator Termo Instavél de Elongação de Peptídeos (EF-Tu). Embora estas proteínas ainda não estejam bem caracterizadas na membrana de A. marginale, a produção destas na forma recombinante (rVirB 9, rVirB10 e rEF-Tu)tem sido realizada, mas as mesmas ainda não foram exploradas em formulações vacinais. Neste trabalho, avaliou-se ouso de rVirB9, rVirB10 e rEF-Tu emulsionadas em adjuvante Montanide em camundongos. Nas condições testadas, verificou-se a indução de forte resposta imune humoral com a produção de IgG1 e IgG2a, sendo que as proporções dos níveis de produção destas subclasses indicam predomínio de IgG1. Entretanto, esplenócitos de animais, que foram injetados com rVirB9 ou rVirB10, produziram interferon-gama acima do limite de detecção do ensaio após estimulação in vitro, sinalizando assim resposta celular específica. Assim, novas avaliações serão realizadas com a finalidade de modular o perfil de resposta imune obtido em bovinos e avaliar a proteção contra A. marginale.</p>