Desmoglein 1 in ovine muzzle skin detected by immunohistochemistry and immunoblotting [autoimmune diseases]
2005
Miragliotta, V. (Pisa Univ. (Italy). Dipartimento di Anatomia, Biochimica e Fisiologia Veterinaria) | Donadio, E. (Pisa Univ. (Italy). Dipartimento di Anatomia, Biochimica e Fisiologia Veterinaria) | Coli, A. (Pisa Univ. (Italy). Dipartimento di Anatomia, Biochimica e Fisiologia Veterinaria) | Stornelli, M.R. (Pisa Univ. (Italy). Dipartimento di Anatomia, Biochimica e Fisiologia Veterinaria) | Giannessi, E. (Pisa Univ. (Italy). Dipartimento di Anatomia, Biochimica e Fisiologia Veterinaria) | Ricciardi, M.P. (Pisa Univ. (Italy). Dipartimento di Anatomia, Biochimica e Fisiologia Veterinaria)
Английский. Desmosomes are epithelial adhesion structures that assure the mechanical cell-cell adhesion, by linking the intermediate filaments of two adjacent cells. Several proteins have been characterised as component of these structures and, among them, desmogleins are known to be the autoantigens in some autoimmune diseases that go by the name of pemphigus complex diseases. In particular, desmoglein 1 is the targeted antigen in Pemphigus foliaceus. This study aims at revealing the presence of desmoglein 1 in the ovine muzzle skin using a commercial monoclonal antibody, raised against human desmoglein-1, on samples obtained from sheep muzzle. Immunohistochemical analyses (streptavidin-peroxidase method) and immunoblotting analyses (chemiluminescence method) have been performed. Immunohistochemical evaluation allowed for detection of a pericellular staining of keratinocyte cell membranes in the spinous and the basal layers of epidermis. A positive immunoreaction was obtained when the anti-Dsg-1 antibody was reacted with human cheek epidermis used as positive control. Specificity of the immune reaction was confirmed by the lack of staining in samples incubated with the anti-vimentin antibody used as negative control. Densitometric analyses of the chemiluminescence film showed three bands. One of them could be referred to desmoglein 1, the second one to desmoglein 3 and the last one to a desmoglein-plakoglobin complex
Показать больше [+] Меньше [-]итальянский. I desmosomi sono strutture di adesione tipiche dei tessuti epiteliali che connettono i filamenti intermedi del citoscheletro di due cellule adiacenti, assicurando la loro adesione meccanica. Tra le proteine che compongono queste strutture, le desmogleine sono note come antigene target in alcune malattie autoimmuni riunite sotto il nome di malattie del complesso del pemfigo. La desmogleina 1, in particolare, si comporta da auto antigene nel pemfigo foliaceo. Lo scopo della presente ricerca è stato quello di mettere in evidenza questa proteina su campioni di cute prelevati da musello di pecora con l'utilizzo di un anticorpo monoclonale indotto contro la desmogleina 1 dell'uomo. Su di essi sono state condotte indagini immunoistochimiche (metodo streptavidina-perossidasi) e di immunoblotting (metodo della chemiluminescenza). L'indagine immunoistochimica ha rilevato una distribuzione della proteina uniforme e pericellulare negli strati basale e spinoso dell'epidermide. La reazione positiva si è ottenuta anche su cute di guancia di uomo usata come controllo positivo. La specificità del test è stata confermata dall'assenza di positività in campioni incubati con un anticorpo antivimentina, utilizzato come controllo negativo. L'indagine di immunoblotting ha evidenziato tre bande di cui una potrebbe corrispondere alla desmogleina 1, la seconda alla desmogleina 3 e la terza a un complesso desmogleina-placoglobina
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