Leptospira spp detection by Polymerase Chain Reaction (PCR) in clinical samples of captive black-capped Capuchin monkey (Cebus apella)

Английский. Leptospirosis is a widely distributed zoonosis that affects domestic and wild animals, and that has the man as the end point of its epidemiological chain. Leptospirosis diagnosis in primates is more difficult than in other animal species, as clinical signs and lesions are less evident and antibody response is detected only for short periods. The aim of this article was to describe the detection of Leptospira spp using polymerase chain reaction (PCR), in clinical samples from one captive black-capped Capuchin monkey (Cebus apella), which presented characteristics compatible with leptospirosis (jaundice and haemorrhagic kdney) in the macroscopic post-mortem examination. A friable kidney fragment and urine sample were cultured and submitted to experimental inoculation in guinea pigs and PCR using genus specific primer pair targeting the 16S rRNA region from Leptospira interrogans serovar canicola. Isolation of the agent was negative both in culture and experimental inoculation. The PCR amplification of the clinical samples showed a 330 pb amplified fragment that corresponds to the Leptospira genus. Based on these results PCR was considered an important tool for leptospira detection in nonhumam primates, more sensitive and specific than other techniques, especially considering that the viability of the pathogen was not possible. These advantages enable the detection of the leptospiras in urine and kidney, even when autolysed, frozen or badly conserved, which prevented the isolation and experimental inoculation from positive results.

португальский. A leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição geográfica que acomete os animais domésticos e silvestres, tendo o homem como ponto final da cadeia epidemiológica. O diagnóstico da leptospirose em primatas é dificultado em relação a outras espécies animais, porque os sinais clínicos e lesões são menos evidentes e a resposta de anticorpos é detectada apenas em curtos períodos. O presente trabalho tem por objetivo descrever a detecção de Leptospira spp empregando-se a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) em amostras clínicas provenientes de um macaco prego (Cebus apella) criado em cativeiro, que apresentou ao exame macroscópico realizado durante a necrópsia, características sugestivas de leptospirose (icterícia e rins hemorrágicos). Amostras de urina e fragmento de rim friável foram submetidas às técnicas cultivo e inoculação experimental em cobaias e PCR empregando-se primers gênero específicos da seqüência do gene 16S rRNA de Leptospira interrogans sorovar canicola. Na PCR as amostras clínicas revelaram um fragmento amplificado de 330 pb correspondente ao gênero Leptospira. O isolamento do agente foi negativo nas demais técnicas empregadas. Pelos resultados obtidos, verifica-se que a técnica de PCR representou uma importante ferramenta de detecção de leptospiras em primatas não-humanos, principalmente considerando-se que não foi necessária a viabilidade do patógeno, permitindo a detecção do agente em amostras autolisadas, congeladas ou amostras mal conservadas, que prejudicaram o isolamento e a inoculação experimental.