Quantificação do interferon-tau durante o reconhecimento materno da gestação em fêmeas bovinas Bos taurus indicus | Quantification of interferon-tau during the maternal recognition of pregnancy in Bos taurus indicus cows

Durante o período crítico do reconhecimento materno, compreendido entre o 15º e 19º dias da gestação, o concepto deve sintetizar competentemente moléculas capazes de bloquear a síntese de prostaglandina F2α (PGF2α) e a luteólise. Em bovinos, a principal macromolécula protéica envolvida em tal bloqueio é o interferon-tau (IFN-τ). Durante o período crítico, falhas neste reconhecimento determinam à mortalidade embrionária em até 40% das fêmeas inseminadas. Informações sobre o IFN-τ em animais Bos taurus indicus, ainda são restritas. Este estudo objetivou uma avaliação quantitativa do IFN-τ durante o período crítico do reconhecimento materno, em lavados uterinos obtidos por sonda de Foley (dias 14, 16 e 18 pósestro) ou post-mortem (dia 18 pós-estro). Para tanto, foram utilizadas fêmeas multíparas azebuadas (Bos taurus indicus), cíclicas ou prenhes, nos dias 14, 16 e 18 pós-estro. Para a obtenção dos lavados, os úteros foram infundidos com solução de Ringer Simples. Os lavados foram concentrados por ultra-filtração e liofilizados. As macromoléculas protéicas foram separadas por Eletroforese Unidimensional SDSPAGE, em gel com 15% de poliacrilamida. A quantificação do IFN-τ nos lavados uterinos foi realizada por Western-Blotting e densitometria. Tanto nos lavados obtidos por sonda de Foley quanto nos post-mortem foi possível observar bandas de proteínas que apresentaram reação cruzada com os anticorpos utilizados no Western-Blotting. O IFN-τ foi detectado apenas nos lavados uterinos post-mortem de vacas prenhes (P<0,05). A densidade óptica não foi afetada pelo dia do período crítico, estado (cíclico ou prenhe) ou interação dia x estado. Nos lavados post-mortem não houve efeito de peso do concepto ou concentração de progesterona plasmática no dia do lavado na densidade da banda protéica referente ao IFN-τ . Concluiu-se que a detecção e quantificação do IFN-τ no ambiente uterino de vacas azebuadas, nestas condições experimentais, é possível apenas em lavados uterinos obtidos post-mortem.

During the critical period of the maternal recognition, which occurs between days 15 and 19 of pregnancy, the conceptus must competently synthesize molecules capable of blocking the synthesis of prostaglandin F2α (PGF2α) and luteolysis. In cattle, the major macromolecule involved in suck blockage is the protein interferon-tau (IFN-τ). During the critical period, failures in the recognition of pregnancy determine embryonic mortality on up to 40% of inseminated cows. Data about IFN-τ in Bos taurus indicus are still scarce. Objective of this study was to quantitatively evaluate the presence of IFN-τ during the critical period for maternal recognition of pregnancy in uterine flushings obtained in vivo by Foley catheter (Days 14, 16 and 18 post estrus) or post-mortem (Day 18 post estrus). Multiparous, cyclic or pregnant zebu cows (Bos taurus indicus) on days 14, 16 and 18 post estrus were used for in vivo or post mortem uterine flushing collection. In both cases, a Ringer solution was used to wash the uterus of cows. Uterine flushings were concentrated by ultra-filtration and lyophilized. Proteins were separated by one-dimensional electrophoresis (SDS-PAGE) in a 15% polyacrilamide gel. Interferon-tau quantification in uterine flushings was performed by western blotting and densitometry. Non-specific protein bands were observed in both in vivo and post mortem uterine flushings. Interferon-tau was detected only in uterine flushings obtained from pregnant cows post-mortem (P<0.05). Optical density of protein bands was not affected by the day of the critical period, state (cyclic or pregnant) or interaction day x state. There was no effect of the conceptus weight or progesterone concentration on the day of uterine flushing collection in the optical density of the IFN-τ protein band. It was concluded that the detection and quantification of IFN-τ in the uterine environment of zebu cows, in these experimental?conditions, is only possible in uterine flushings obtained post-mortem.