Репродукция самонесовместимых линий моркови (Daucus carota L.) с использованием культуры тканей | Maintainance and reproduction of carrot (Daucus carota L.) self-incompatible lines by tissue culture

Английский. Application of micropropagation can solve the problem of reproduction of carrot parental lines in F1 hybrid breeding and seed production scheme, based on carrot self-incompatibility. It was compared two methods and revealed suitable date of micropropagation for the timely obtaining of flowering carrot plants. Root, leaves, shoots were used as tissue explants. The number of obtained in callus culture plants ranged from 0 to 15.3 plants per one Petri dish (approximately 0.2g of callus tissue). The most effective was callus formation on MS with 2mg/l 2,4-D and plant regeneration on B5 medium with no growth regulators. In cell suspension culture number of received seedlings ranged from 0 to 216.7 plants per flask. The most effective medium combination was callus formation on MS with 1 mg/l or 2 mg/l 2,4-D, cell suspensions obtaining in liquid MS medium with reduced content of 2,4-D (0.1 mg/l) and embryogenesis induction on MS without growth regulators. In callus culture plants can be obtained within 2 months from the date of introduction into in vitro culture, but yield of plants will be low. Suspension cell culture provides production of unlimited plants number per one carrot root during 3-3.5 months. The date of parental lines propagation by biotechnological methods is important for integration into the seed production scheme. The optimal date of introduction explants to in vitro culture is December – January, that's provide the seedlings adaptation in May. Plants should be grown in a field until October and then, if their diameter is not lower than 10 mm, transplanted in the heated greenhouse for the winter vernalization, flowering and hybridization.

Русский. Применение метода клонального микроразмножения позволяет решить проблему поддержания и размножения родительских линий моркови в генетико-селекционной схеме селекции F1 гибридов на основе самонесовместимости. Проведено сравнение 2 способов микроклонального размножения и разработан хронологический регламент изоляции эксплантов и введения в культуру для своевременного получения цветущих растений моркови. В качестве эксплантов использовали ткани корнеплода после зимнего хранения, листья, черешки листьев, цветоносные побеги. Число растений, сформировавщихся в каллусной культуре, составило от 0 до 15,3 растений на 1 чашку Петри, содержащую около 0,2 г каллусной ткани. Наиболее эффективным является получение каллуса на питательной среде МS с добавлением 2мг/л 2,4-Д и регенерация на среде В5 без регуляторов роста. В суспензионной культуре клеток выход сеянцев составил от 0 до 216,7 шт. на колбу. Наиболее эффективным является получение каллуса на среде MS с добавлением 1 мг/л или 2 мг/л 2,4-Д, получение клеточной суспензии в жидкой среде MS со сниженным содержанием 2,4-Д (0,1 мг/л) и индукция эмбриогенеза на MS без регуляторов роста. В каллусной культуре растения-регенеранты можно получить за 2 месяца с момента введения в культуру, но выход растений будет низким. Суспензионная культура клеток позволяет получить с одного корнеплода моркови за 3-3,5 месяца неограниченно большое число растений. Для интеграции в семеноводческую схему оптимальным сроком введения в культуру in vitro размножаемых родительских линий является конец декабря – начало января. Адаптация сеянцев достигается к началу мая, далее следуют выращивание в открытом грунте, пересадка штеклингов диаметром не менее 10 мм в октябре в зимнюю теплицу, яровизация, цветение и гибридизация растений.