Identification of peyer's patches in mice by filling their intestine with contrast mass | Выявление пейеровых бляшек мышей путем заполнения кишечника контрастной массой

Английский. Method for identifying grouped lymphoid nodules (Peyer's patches - PP) in mice's small intestine by filling it with contrast mass was developed. Black ink water solution was used as contrast. It is shown that PP are well seen against its background, with their contours outlined more sharply. For PP contrasting, 1.2 ml of ink was intragastrically injected to mice weighing 20–22 g 75 minutes before slaughtering. With that, 1 day before using method animals feeding was stopped, access to water being not limited. It was found that when intestine is filled with ink due to peristaltic movements (in contrast to its filling under pressure in slaughtered mice), intestine wall distension and grouped nodules' size distortion don't occur. 0.01 mg of atropine sulfate was added to ink to ensure equal ink distribution in intestine. Antispasmodic agent use allowed filling small intestine with contrast mass without empty spaces which is necessary for contrasting all PP. The ink and atropine injection in mentioned doses doesn't have negative influence on animals' general condition and behavior. The noticeable effect of atropine on the PP size wasn't detected. The comparison of the results from counting and measuring the PP in the groups with contrasting and without it was done. It has been found that the proposed method allows increasing the number of the detected PP by 45%, thus the index of the average area of one PP increases by 21% (p less than 0.05). The histological examination of the small intestine was carried out after contrasting. No negative impact on the microscopic structure of the intestinal mucosa including the columnar epithelial cells of apexes of the villi and their striated border was found. The soot, which is a part of ink, didn't interfere with the creation of the histological sections.

Русский. Разработан способ выявления сгруппированных лимфоидных узелков (пейеровых бляшек - ПБ) тонкого кишечника мышей путем его заполнения контрастной массой. В качестве контраста использован водный раствор черной туши. Показано, что на ее фоне ПБ хорошо видны, при этом их контуры становятся более четкими. Для контрастирования ПБ мышам массой 20–22 г внутрижелудочно вводили 1,2 мл туши за 75 мин до убоя. При этом за сутки до использования методики кормление животных прекращали, доступ к воде не ограничивали. Установлено, что при заполнении кишечника тушью за счет перистальтических движений (в отличие от его заполнения под давлением у мертвых мышей) не происходит перерастяжения стенок кишки и искажения размеров сгруппированных узелков. Для обеспечения равномерного распределения туши в кишечнике к ней добавляли 0,01 мг атропина сульфата. Применение спазмолитика позволило заполнить тонкую кишку контрастной массой без пустых промежутков, что необходимо для контрастирования всех ПБ. Введение туши и атропина в указанных количествах не оказывает негативного воздействия на общее состояние и поведение животных. Заметного влияния атропина на размеры ПБ не выявлено. Проведено сравнение результатов подсчета и измерений ПБ в группах с контрастированием и без него. Установлено, что предложенный метод позволяет увеличить количество выявляемых ПБ на 45%, показатель средней площади одной ПБ при этом возрастает на 21% (p меньше чем 0,05). Проведено гистологическое исследование тонкого кишечника после выполнения контрастирования. Не выявлено какого-либо негативного влияния на микроскопическую структуру слизистой оболочки, включая столбчатые эпителиоциты вершин ворсин и их щеточную каемку. Сажа, входящая в состав туши, не препятствовала изготовлению гистологических срезов.