Оценка эффективности метода ИФА для выявления антител к вирусу ССЯ-76 | Evaluation of efficiency of ELISA for detection of antibodies to EDS-76 virus

Английский. Egg drop syndrome-76 (EDS-76) is an infectious disease in layer hens caused by Duck adenovirus A. EDS-76 is manifested in soft-shelled or shell-less eggs and depigmentation and by a quick drop in egg production. The indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and hemagglutination inhibition (HI) are used to detect and quantify antibodies to EDS-76 virus in chicken sera. The goal of this study was the definition of the main validation parameters ELISA method for detection of antibodies to EDS-76 virus according ISO 17025 and estimation of efficiency of using this method in the laboratory. The humoral immune responses were determined by means of ELISA and hemagglutination inhibition test (FGBI "ARRIAH"). Specificity and sensitivity of this method compared to HI is 99.36 and 98.88% accordingly. During estimation of reproducibility of the method the coefficient of variation between different lots of the analysis did not exceed 8%. The accuracy of the detection of antibodies in the ELISA was 99.25% in comparison with HI. High repeatability and reproducibility, as well as great compliance of ELISA with HI, allow using EDS -76-ELISA for serological assays with a goal of laboratory diagnosis of EDS -76, evaluation of immune status of birds and control of postvaccinal immunity.

Русский. Синдром снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76) — инфекционная болезнь кур-несушек, вызываемая Duck adenovirus A. ССЯ-76 характеризуется размягчением, отсутствием или депигментацией скорлупы яиц и приводит к значительному снижению яичной продуктивности. В лабораторной практике для выявления антител к вирусу ССЯ-76 в сыворотках крови кур широко используют иммуноферментный анализ (ИФА) и реакцию торможения гемагглютинации (РТГА). Цель исследования — определить основные валидационные характеристики метода ИФА для выявления антител к вирусу ССЯ-76 в сыворотках крови кур в рамках подготовки к аккредитации лаборатории по ГОСТ ИСО/МЭК 17025 и оценить эффективность его применения в лабораторных условиях. Для выявления антител к вирусу ССЯ-76 в сыворотках крови кур методом РТГА и ИФА использовали коммерческие наборы производства ФГБУ "ВНИИЗЖ". Специфичность и чувствительность метода ИФА относительно РТГА составила 99,36 и 98,88%, соответственно. При оценке воспроизводимости метода коэффициент вариации между разными сериями анализа не превышал 8%. Точность выявления антител в ИФА составляла 99,25% от точности РТГА. Высокая повторяемость и воспроизводимость, а также хорошая согласованность результатов ИФА с РТГА позволяет использовать ССЯ-76-ИФА для серологических исследований с целью лабораторной диагностики ССЯ-76, оценки иммунного статуса птиц и контроля поствакцинального иммунитета.