Vitrification of bovine in vitro produced embryos in triacetate cellulosic hollow fibers and in open type carriers | Витрификация полученных in vitro эмбрионов крупного рогатого скота в триацетат-целлюлозных полых волокнах и на носителях открытого типа

Английский. Use of triacetate cellulose hollow fibers as a vitrification carrier is a perspective cryoconservation method to preserve groups of mammalian oocytes and in vitro produced (IVP) mammal embryos. Hollow fiber vitrification allows significantly simplifying and standardizing the vitrification/warming procedures. The hollow fiber carrier was compared to two open-type vitrificatinion carriers for efficiency in vitrifying IVP-blastocytes (Cryotop and hemi-straw) and seven-day-old bovine expanded blastocysts. After 24 hours warming, the survival level of the embryos vitrified using hollow fibers (84%, P less than0.05) was lower than in other experimental groups (97% using Cryotop and 94.3% using hemi-straw) and in the control group (100%). However, hatching rates in the hollow fiber group were comparable to those from other groups throughout the culture period and the most drastic drop in viability was observed in the hemi-straw group. For the purpose of testing the aptitude of the triacetate cellulosic hollow fibers for vitrification of cloned zona-free embryos, IVP bovine blastocysts and expanded blastocysts without zona pellucida were vitrified in hollow fibers. Viability of vitrified embryos without zona pellucida 24 hours post warming (84.7%) was comparable to those of intact vitrified embryos. However, the average number of cells with damaged membrane was higher in zona-free embryos.

Русский. Витрификация с использованием в качестве носителя триацетат-целлюлозных полых волокон является перспективным методом криоконсервации групп ооцитов и полученных in vitro (in vitro production, IVP) эмбрионов млекопитающих, позволяющим существенно упростить и стандартизировать процедуры витрификации/отогревания. Проведено сравнение эффективности данного носителя с носителями открытого типа (Cryotop, полусоломинка) при витрификации IVP-бластоцист и расширенных бластоцист крупного рогатого скота в возрасте 7 сут. Уровень выживаемости эмбрионов, витрифицированных в полых волокнах, через 24 ч после отогревания был ниже (84%, P меньше 0,05), чем на других носителях (97% на Cryotop и 94,3% на полусоломинке) и в контрольной группе (100%). Однако уровень выхода из блестящей оболочки эмбрионов из группы полого волокна в течение всего периода культивирования был сопоставим с аналогичными уровнями в других экспериментальных группах, а наибольшее снижение жизнеспособности наблюдалось у эмбрионов, витрифицированных с использованием полусоломинки. С целью оценки пригодности триацетат-целлюлозных волокон в качестве носителя для витрификации эмбрионов, получаемых при клонировании по методу zona-free, была проведена криоконсервация IVP-бластоцист и расширенных бластоцист крупного рогатого скота без блестящей оболочки. Уровень выживаемости витрифицированных эмбрионов без блестящей оболочки через 24 ч после отогревания (84,7%) был сопоставим с аналогичным показателем у витрифицированных интактных эмбрионов, но при этом наблюдалось увеличение среднего количества клеток с поврежденной мембраной.