Optimization of cell lines growth parameters of some dicotyledonous plants cultured in suspension culture | Оптимизация параметров роста клеточных линий некоторых видов двудольных растений в условиях суспензионной культуры

Английский. Seven species of dicotyledonous plants selected for their higher ability to accumulate of total soluble protein in vegetative tissues were introduced into in vitro culture. To obtain an intensively growing loose callus, suitable for the preparation of a suspension culture, nutrient media compositions were optimized and the morphogenetic reactions of various types of explants were evaluated. After screening for the ability of callus formation of seven species of dicotyledonous plants, it was established that fast-growing suspension lines can be obtained for the cells of three plant species – Nicotiana tabacum, Daucus сarota, Amaranthus hypochondriacus, using the developed protocols of media and explant types. Based on the evaluation of the growth characteristics of the suspension cultures obtained from the calli of the three isolated plant species, it was established that all of them were characterized by high viability and intensive biomass increment. The cell density increased most quickly in the suspension culture of A. hypochondriacus. Using the reporter gfp-gene, the selected cell lines were evaluated for their ability to accumulate a recombinant protein. A direct correlation was observed between the accumulation of total soluble and recombinant proteins in the cells of the suspension culture. Cell cultures obtained on the basis of these plant species are of interest for biotechnology and will be used to create production lines for recombinant proteins, including medicinal products.

Русский. Введены в культуру in vitro семь видов двудольных растений, отобранных по повышенной способности к накоплению в вегетативных тканях общего растворимого белка. Для получения интенсивно растущего рыхлого каллуса, пригодного для получения суспензионной культуры, оптимизированы составы питательных сред и проведена оценка морфогенетических реакций различных типов эксплантов. При скрининге по способности к каллусообразованию семи видов двудольных растений установлено, что быстрорастущие суспензионные линии могут быть получены для клеток трех видов растений – Nicotiana tabacum, Daucus сarota, Amaranthus hypochondriacus с применением разработанных протоколов сред и типов эксплантов. На основании оценки ростовых характеристик суспензионных культур, полученных из каллусов трех выделенных видов растений, установлено, что все они характеризовались высокими показателями жизнеспособности и интенсивным приростом биомассы. Быстрее всего плотность клеток возрастала в суспензионной культуре A. hypochondriacus. С применением репортерного gfp-гена отобранные клеточные линии оценены по способности к накоплению рекомбинантного белка. Отмечена прямая корреляция между накоплением общего растворимого и рекомбинантного белков в клетках суспензионной культуры. Клеточные культуры, полученные на основе указанных трех видов растений, представляют интерес для биотехнологии и будут использованы при создании линий-продуцентов рекомбинантных белков, в том числе и медицинского назначения.