Efficiency of using O-polysaccharide antigen in ELISA for the rapid differential diagnosis of brucellosis in cattle | Эффективность использования О-ПС антигена в ИФА для дифференциальной экспресс-диагностики бруцеллеза крупного рогатого скота

Английский. There was estimated the efficiency of the express method of combined variant of enzyme-linked immunosorbent assay (c-ELISA-test) for differentiated diagnosis (DD) of brucellosis in vaccinated and unvaccinated cattle. Modification of ELISA was in using for each serum sample (SS) 2 basins of a tray with absorbed antigen Brucella abortus 19, but not 1 like in the conventional ELISA. O-polysaccharide antigen Br. abortus was further brought into the 2-nd basin. Then the investigated SS was brought into the both basins, it was incubated with shaking for 30-60 min at 37 deg. C. The results of reaction were estimated by spectrophotometry and expressed in percents as an epizootic danger coefficient (EDC). If this indicator was higher than 60%, the result was regarded as positive. When studying the SS of wealthy and vaccinated herds negative results were obtained, EDC was not higher than 60%. Of 10 studied SS from brucellosis unhealthy farms 5 gave a positive result both in c-ELISA and immunodiffusion test (EDC was not higher than 61%). Therefore, parallel use of the conventional ELISA and c-ELISA allows highly accurately evaluating the epizootic brucellosis situation, reduces the duration of serological test up t 2 h, eliminates the subjectivity of evaluating the results by automating these stages of the test.

Русский. Оценена эффективность экспресс-метода комбинированного варианта иммуноферментного анализа (к-ИФА) для дифференцированной диагностики (ДД) бруцеллеза (БР) у вакцинированного и невакцинированного КРС. Модификация ИФА заключалась в том, что для каждого образца сывороток (ОC) использовали 2 лунки планшета с сорбированным антигеном Brucella abortus 19, а не 1, как в обычном ИФА. Во 2-ю лунку дополнительно вносили о-ПС антиген Br. abortus. Затем в обе лунки вносили исследуемый ОС, инкубировали со встряхиванием 30-60 мин при 37 град. C. Результаты реакции оценивали спектрофотометрически и выражали в процентах как коэффициент эпизоотической опасности (КЭО). Если этот показатель был более 60%, результат считали положительным. При исследовании ОС из благополучных и вакцинированных стад были получены отрицательные результаты, КЭО не превышал 60%. Из 10 исследованных ОС из неблагополучных по БР хозяйств 5 дали положительный результат и в к-ИФА, и в реакции иммунодиффузии (КЭО не менее 61%); 5 других ОС были отрицательными в обоих методах. Следовательно, параллельное использование обычного ИФА и к-ИФА позволяет с высокой точностью оценить эпизоотическую ситуацию по БР, сокращает продолжительность серологического анализа до 2 ч, устраняет субъективность оценки результатов за счет автоматизации всех этапов теста.