Разработка методики оценки сырьевого состава готовой молочной продукции с применением ПЦР-анализа | Development of a methodology for assessing the raw material composition of finished dairy products using PCR analysis

Английский. In dairy products of mixed raw material composition (from cow and goat milk, cow and sheep milk, etc.), identification parameters have not been established, and there are no generally accepted approaches to the analysis. The lack of methodological developments in the application of the PCR analysis method for assessing the composition of dairy products that have undergone heat treatment led to the need to develop a method for the extraction of high-quality DNA, which affects the PCR analysis in general. Methodological approaches to DNA extraction from thermally processed dairy products are considered. Model samples of whole milk powder mixes containing both cow's milk and goat's milk in various ratios were studied. Evaluation of the results was based on the application of real-time PCR analysis using primers targeting the mitochondrial 12S rRNA gene. The quality of the obtained DNA was assessed by monitoring the yield, purity and integrity of the obtained biological material. The used procedure allows defining an admixture of cow milk in goat milk at the level of 1.0% in increments of 0.1%. This method can be used to isolate the required amount of DNA, the quality of which allows real-time PCR analysis.

Русский. В молочных продуктах смешанного сырьевого состава (из молока коровьего и козьего, коровьего и овечьего и т.д.) не установлены идентификационные параметры и нет общепринятых подходов к выполнению анализа. Отсутствие методических наработок по применению метода ПЦР анализа для оценки состава молочной продукции, прошедшей термическую обработку, привело к необходимости разработки методики экстракции высококачественной ДНК, влияющей на проведение ПЦР-анализа в целом. Рассмотрены методические подходы по извлечению ДНК из термически обработанной молочной продукции. Исследованы модельные образцы смесей из молока сухого цельного, содержащих как коровье молоко, так и козье в различных соотношениях. Оценка результатов основывалась на применении ПЦР-анализа в реальном времени с использованием праймеров, нацеленных на митохондриальный ген 12S рРНК. Качество полученной ДНК оценивалось путем мониторинга выхода, чистоты и целостности полученного биологического материала. Используемая методика позволяет определять примесь коровьего молока в козьем молоке на уровне 1,0% с шагом 0,1%. Данным методом можно выделить необходимое количество ДНК, качество которой позволяет проводить ПЦР-анализ в реальном времени.