Enzyme preparation of microbial origin and evaluation of its effectiveness in the processing of collagen-containing raw materials | Ферментный препарат микробного происхождения и оценка его эффективности при обработке коллагенсодержащего сырья

Русский. Исследования проводили с целью получения ферментного препарата на основе коллагеназы микробного происхождения и оценки его протеолитических свойств. Для этого на питательной среде, содержащий фитопептон из семян люпина, культивировали Clostridium histolyticum с последующим отделением продукта метаболизма – фермента коллагеназы – от питательной среды путем ультрафильтрации на мембранах с селективностью пропускания макромолекул массой до 130 кДа. Степень гидролиза белка люпина в фитопептоне определяли по содержанию аминного азота. Протеолитическую активность ферментного препарата оценивали путем гидролиза коллагенсодержащего сырья – измельченной кожи цыплят-бройлеров. Для эксперимента сформировали 2 партии образцов по 5 кг в каждой. Первая была контрольная, образцы второй партии обрабатывали ферментным препаратом в количестве 0,3% от массы сырья в течение 8 ч. Содержание аминного азота в гидролизате измельченной кожи сильно возрастало в первые часы. Через 2 ч гидролиза оно составляло 2,9 г/л, через 3 ч – 3,8 г/л, через 4 ч – 4,5 г/л и через 5 ч – 5,2 г/л, что выше, чем в контрольных образцах, соответственно в 14,5, 19,0, 22,5 и 26,0 раза. Ферментный препарат обладает высокой протеолитической активностью в отношении коллаген-содержащего сырья о чем свидетельствует высокое содержание аминного азота – 5,4 г/л, азота саркоплазматических и миофибрилярных белков – соответственно 15,9% и 2,7%, небелкового и полипептидного азота – 8,1% и 3,3% к общему азоту гидролизата через 6 ч гидролиза, что в 27, 41, 14, 82 и 66 раз выше, чем в образцах измельченной кожи контрольной партии. В результате гистологического исследовании коллагенсодержащего сырья на фоне внесения фермента отмечено разрыхление волокон и их гомогенизация с образованием полостей белковой массы.

Английский. The purpose of the studies was to obtain an enzyme preparation based on collagenase of microbial origin and to assess its proteolytic properties. For this purpose, Clostridium histolyticum was cultured on a nutrient medium containing phytopeptone from lupine seeds followed by the separation of the metabolic product, i.e. a collagenase enzyme, from the nutrient medium by ultrafiltration on membrane transmitting macromolecules weighing up to 130 kDa. The degree of hydrolysis of the lupine protein in phytopeptone was determined by the content of amine nitrogen. The proteolytic activity of the enzyme preparation was assessed by hydrolysis of collagen-containing raw materials – crushed broiler chicken skin. For the experiment, we formed two batches of samples of 5 kg each. The first was the control one; the samples from the second batch were treated with an enzyme preparation in the amount of 0.3% of the raw material mass for 8 hours. The amine nitrogen content in the crushed skin hydrolyzate increased strongly in the first hours. In 2, 3, 4, and 5 hours of hydrolysis, it was 2.9 g/L, 3.8 g/L, 4.5 g/L, and 5.2 g/L, respectively. These indicators were higher than in control samples 14.5, 19.0, 22.5, and 26.0 times respectively. The enzyme preparation was characterized by a high proteolytic activity against collagen-containing raw materials, as evidenced by the high content of amine nitrogen (5.4 g/L), nitrogen of sarcoplasmic and myofibrillar proteins (15.9% and 2.7%, respectively), non-protein and polypeptide nitrogen (8.1% and 3.3%, respectively) to the total hydrolyzate nitrogen after 6 hours of hydrolysis, which was 27, 41, 14, 82, and 66 times higher than in the samples of crushed skin from the control batch. Histological examination of collagen-containing raw materials against the background of the introduction of the enzyme showed loosening of the fibres and their homogenization with the formation of cavities of the protein mass.