Histological studies on induction of somatic embryogenesis in mangabeira.

The Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), is a fruit tree known as mangabeira and officially listed as a genetic resource with food potential in Brazil. The aim of this investigation was to conduct histological studies on inducing maturation of somatic embryos from explants of Hancornia speciosa Gomes. For callus induction, leaf and nodal segments of the Terra Caída accession were cultured in media with different concentrations of putrescine (0, 250, 500, 750, and 1000 μM) in MS medium with 10 mg/L of 2,4D, 5 mg/L of BAP, 1 g/L of activated carbon, and 30 g/L of sucrose, and gelled with 3 g/L of Phytagel®. At 90 days of culture in multiplication medium, the embryogenic calluses were identified and selected for the maturation phase of somatic embryos in media composed of MS salts combined with two concentrations of BAP (10 and 15 mg/L) and two concentrations of polyethylene glycol – PEG 2000 (0% and 2%) with 30 g/L of sucrose, 1 g/L of activated carbon, and 4 g/L of Phytagel®. At 90 days of culture in multiplication medium (medium II) and at 60 days of culture in maturation medium (medium IV), the callus samples were fixed in FAA. After that, the samples were infiltrated in 100% ethanol + liquid resin (1:1) for 2 hours and then in activated resin = infiltration solution for 24 hours in the refrigerator. After drying, the slides were fixed with glass varnish and then evaluated in an optical microscope (Zeiss/Jenamed2), and photomicrographs (Axiocam software) were taken of the prepared slides. The results obtained in the different histological analyses of the Terra Caída accession of Hancornia speciosa Gomes are important to show the response of the nodal and leaf segments in inducing embryogenic calluses and possible maturation of somatic embryos, providing information that collaborates in validation of future protocols of somatic embryogenesis for this species. A Hancornia speciosa Gomes (Apocynaceae), árvore frutífera conhecida como mangabeira e oficialmente listada como recurso genético com potencial alimentar no Brasil. O objetivo desta investigação foi realizar estudos histológicos sobre a indução da maturação de embriões somáticos provenientes de explantes de Hancornia speciosa Gomes. Para indução de calos, segmentos foliares e nodais do acesso Terra Caída foram cultivados em meios com diferentes concentrações de putrescina (0, 250, 500, 750 e 1000 μM) em meio MS com 10 mg/L de 2,4D, 5 mg /L de BAP, 1 g/L de carvão ativado e 30 g/L de sacarose, e gelificado com 3 g/L de Phytagel®. Aos 90 dias de cultivo em meio de multiplicação, os calos embriogênicos foram identificados e selecionados para a fase de maturação dos embriões somáticos em meio composto por sais de MS combinados com duas concentrações de BAP (10 e 15 mg/L) e duas concentrações de polietilenoglicol – PEG 2000 (0% e 2%) com 30 g/L de sacarose, 1 g/L de carvão ativado e 4 g/L de Phytagel®. Aos 90 dias de cultivo em meio de multiplicação (meio II) e aos 60 dias de cultivo em meio de maturação (meio IV), as amostras de calos foram fixadas em FAA. Em seguida, as amostras foram infiltradas em etanol 100% + resina líquida (1:1) por 2 horas e depois em resina ativada = solução de infiltração por 24 horas na geladeira. Após a secagem, as lâminas foram fixadas com verniz vítreo e posteriormente avaliadas em microscópio óptico, sendo realizadas fotomicrografias das lâminas preparadas. Os resultados obtidos nas diferentes análises histológicas do acesso de mangabeira Terra Caída são importantes para mostrar a resposta dos segmentos nodais e foliares na indução de calos embriogênicos e possível maturação de embriões somáticos, fornecendo informações que colaboram na validação de futuros protocolos de embriogênese somática para esta espécie.