Estudio del modo de transmisión de la enfermedad de la Hoja Pequeña de Gliricidia sepium causada por un fitoplasma

Cada vez se descubren más enfermedades causadas por fitoplasmas que antes eran atribuidas a virus o de etiología desconocida; estas enfermedades pueden causar considerables pérdidas económicas en los cultivos y en especies forestales. La enfermedad de la Hoja Pequeña de Gliricidia (EHPG), descubierta en Honduras en 1992, es causada por un fitoplasma. Los fitoplasmas no pueden ser transmitidos por semilla y las prácticas de manejo no consideran este tipo de transmisión. Los síntomas de la EHPG muestran una marcada reducción de los foliolos y una muerte regresiva y lenta del árbol. Para la transmisión por insecto se trabajó con la especie Empoasca hastosa (Homoptera: Cicadellidae) que es la especie más predominante en G. sepium en Zamorano. En insectos no se logró detectar el ADN del fitoplasma con pruebas moleculares (nested PCR).También se estudió la transmisión del fitoplasma por Empoasca hastosa con bioensayos. Se trasladaron insectos, previamente expuestos al patógeno en un árbol enfermo, a plántulas sanas puestas en una jaula con malla anti-insectos. El 10% de las plántulas expuestas a Empoasca hastosa resultaron positivas, lo que sugiere que esta especie en capaz de transmitir el fitoplasma a un hospedero sano. También se estudió la transmisión por semilla. Se seleccionaron nueve árboles y se clasificaron en tres diferentes niveles de infección de la enfermedad dentro del campus de Zamorano (sanos, leves y moderadamente enfermos; no se incluyeron los árboles severamente enfermos ya que no produjeron semillas). Se confirmó la transmisión del fitoplasma detectando ADN del patógeno por nested PCR, en 15% de las plántulas provenientes de árboles moderadamente enfermos. Se observó que las plántulas positivas al fitoplasma tenían menos hojas que las plántulas sin fitoplasma (P<0.03). También para comprobar la transmisión del fitoplasma por semilla se realizó un análisis con marcadores moleculares (RFLP´s) utilizando ocho enzimas de restricción. Se observaron perfiles idénticos de restricción entre un árbol progenitor y una plántula hija con las enzimas (Eco RI, Hind III y Rsa I), lo que sugiere que la secuencia de ADN encontrada en ambos casos es la misma. Estos resultados confirman la transmisión del fitoplasma de la EHPG por semilla y constituyen el primer reporte de transmisión por semilla de un fitoplasma.