Estudios inmunológicos en cabritos suplementados con la levadura probiótica Debaryomyces hansenii CBS 8339

"La diarrea inducida por Escherichia coli es una de las principales afecciones en cabritos destetados, provocando del 15 al 40% de mortalidad y pérdidas económicas. Los tratamientos empleados es la aplicación de antibióticos, sin embargo E. coli ha generado una rápida resistencia a los antibióticos por su uso desmedido. Una de las alternativas para combatir esta afección es el uso de probióticos, como la levadura Debaryomyces hansenii CBS 8339 que ha demostrado la capacidad de modular el sistema inmune e inducir protección contra infecciones en animales. Por ello, el objetivo de este trabajo fue evaluar la inclusión de D. hansenii en la dieta sobre la respuesta inmune y protección contra la infección ex vivo por E. coli 25 en cabritos al destete. Primeramente, la levadura D. hansenii se cultivó en medio YPD suplementada con 1 μL/mL de cloranfenicol (50mg/mL) a 30 °C en agitación constante (120 rpm) de 24 a 48 h. Posteriormente, la biomasa fue obtenida mediante centrifugación (5000 rpm, 4 °C, 15 min) e incorporada en la dieta (0.3%) y ofrecida diariamente a cabritos Sannen ✕ Nubia destetados durante 14 días. Muestras de sangre periférica y heces de los cabritos en experimentación se obtuvieron el primer y decimocuarto día del tratamiento. Finalmente, se analizaron parámetros inmunológicos en leucocitos de sangre periférica como la actividad fagocítica, explosión respiratoria, óxido nítrico, actividad mieloperoxidasa, evaluación de genes relacionados al sistema inmune y producción de anticuerpos IgA totales en heces de cabritos. La producción de anticuerpos aumentó (p <0.05) en el grupo suplementado con D. hansenii en el primer y segundo muestreo comparado con el control. La suplementación con la levadura D. hansenii estimuló la sobreexpresión (p <0.05) de los genes receptores TLR2 y TLR6, moduladores SYK y RAF1 y factor de transcripción AP1 al decimocuarto día del experimento. La viabilidad no mostró evidencia de inmunoprotección en leucocitos de cabritos suplementados con D. hansenii antes y después de un reto con E. coli 25. En conclusión, la suplementación con D. hansenii incrementó la producción total de IgA y la expresión de los genes relacionados al sistema inmune en leucocitos de sangre periférica de cabritos, sin embargo, los resultados obtenidos en esta investigación mostraron que el uso de D. hansenii CBS 8339 no es la mejor opción para la suplementación en cabritos en esta etapa productiva."

"Diarrhea induced by Escherichia coli is one of the main diseases in weaned kids, causing 15 to 40% mortality and economic losses. The treatments used are the application of antibiotics; however, E. coli has generated a rapid resistance to antibiotics due to their excessive use. One of the alternatives to combat this condition is probiotics, such as the yeast Debaryomyces hansenii CBS 8339, which has demonstrated the ability to modulate the immune system and induce protection against animal infections. Therefore, this work aimed to evaluate the inclusion of D. hansenii in the diet on the immune response and protection against ex vivo E. coli 25 infection in weaned kids. First, D. hansenii yeast was cultured in a YPD medium supplemented with 1 μL/mL of chloramphenicol (50mg/mL) at 30 °C under constant agitation (120 rpm) from 24 to 48 h. Subsequently, the biomass was obtained by centrifugation (5000 rpm, 4 °C, 15 min), incorporated into the diet (0.3%), and offered daily to weaned Sannen ✕ Nubia goats for 14 days. Samples of peripheral blood and feces of the experimental kids were obtained on the first and fourteenth day of treatment. Finally, immunological parameters were analyzed in peripheral blood leukocytes such as phagocytic activity, respiratory burst, nitric oxide, myeloperoxidase activity, evaluation of immune-related genes, and total IgA antibody production in kid feces. Antibody production increased (p <0.05) in the group supplemented with D. hansenii in the first and second sampling compared to the control. Supplementation with D. hansenii yeast stimulated overexpression (p <0.05) of TLR2 and TLR6 receptor genes, SYK and RAF1 modulators, and AP1 transcription factor on the 14th day of the experiment. Viability showed no evidence of immunoprotection in leukocytes from goat kids supplemented with D. hansenii before and after the challenge with E. coli 25. In conclusion, supplementation with D. hansenii increased total IgA production and the expression of immune system-related genes in goat peripheral blood leukocytes, however, the results obtained in this research showed that the use of D. hansenii CBS 8339 is not the best option for supplementation in goats at this productive stage."