Efecto de las técnicas de crioconservación de Mentha aquatica en el control de bacterias endófitas tras la recuperación

La crioconservación es una técnica de gran eficacia para la conservación a largo plazo del germoplasma vegetal, en especial cuando se trata de la conservación de plantas de reproducción vegetativa. Con la crioconservación se mantiene la viabilidad del material vegetal al detener su metabolismo utilizando temperaturas extremadamente bajas, generalmente aquella del nitrógeno líquido. Este trabajo se centra en el estudio de protocolos de crioconservación, basados en la técnica de vitrificación-droplet, para ápices de Mentha aquatica L., utilizando un genotipo con contaminación bacteriana endófita. Se pretende estudiar el efecto de la solución de vitrificación (PVS2 o PVS3) y del uso de un antibiótico (cefotaxima) sobre la recuperación de ápices de menta y el desarrollo bacteriano. PVS3, resultó ser más eficiente para la recuperación de ápices crioconservados en comparación con PVS2. Además, la adición de cefotaxima al medio de cultivo post-crioconservación beneficia la recuperación al reducir la proliferación de bacterias endófitas. La solución de vitrificación PVS2 resultó ser menos efectiva que PVS3 en la inhibición del desarrollo bacteriano cuando no se usaban antibióticos. Los resultados de este estudio demuestran la importancia del uso de antibióticos como la cefotaxima en los protocolos de crioconservación para controlar el crecimiento bacteriano. ABSTRACT Cryopreservation is a highly effective technique for the long-term preservation of plant germplasm, especially for the conservation of plants of vegetative propagation. Cryopreservation maintains the viability of plant material by halting its metabolism using extremely low temperatures, typically that of liquid nitrogen. This work focuses on the study of cryopreservation protocols based on the vitrification-droplet technique for shoot tips of Mentha aquatica L., using a genotype with endophytic bacterial contamination. The aim is to study the effect of the vitrification solution (PVS2 or PVS3) and the use of an antibiotic (cefotaxime) on the recovery of mint shoot tips and bacterial growth. PVS3 proved to be more efficient for the recovery of cryopreserved shoot tips compared to PVS2. Furthermore, the addition of cefotaxime to the post-cryopreservation culture medium benefits recovery by reducing proliferation of endophytic bacteria. The vitrification solution PVS2 was found to be less effective than PVS3 in inhibiting bacterial development when antibiotics were not used. The results of this study demonstrate the importance of using antibiotics such as cefotaxime in cryopreservation protocols to control bacterial growth.