Patógenos transmitidos por carrapatos e micoplasmas hemotrópicos em ouriços-cacheiro (Sphiggurus villosus) e tamanduás-mirim (Tamandua tetradactyla), Paraná, Brasil

Orientador: Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa Vieira

Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 21/07/2021

Inclui referências

Resumo: Os animais silvestres podem desempenhar um papel importante na propagação de carrapatos e patógenos de doenças transmitidas por carrapatos. No Brasil, ouriços-cacheiro (Sphiggurus villosus) e tamanduás-mirim (Tamandua tetradactyla) são amplamente distribuídos no bioma Mata Atlântica, e estão entre os animais mais atingidos e mortos em acidentes nas estradas. O objetivo deste estudo foi pesquisar ouriços-cacheiro e tamanduás-mirim de vida livre do Estado do Paraná, sul do Brasil, para infecção por micoplasmas hemotrópicos, Anaplasma/Ehrlichia spp. e piroplasmas. Amostras de sangue e/ou baço foram coletadas de nove ouriçoscacheiro e quatro tamanduás-mirim atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Paraná, Estado do Paraná, sul do Brasil. Foi realizada pesquisa de ectoparasitas nos animais. O DNA das amostras de sangue e baço foi extraído e testados por PCR para os genes 16S rRNA/23S rRNA de hemoplasmas, gene 16S rRNA de Anaplasma/Ehrlichia spp. e gene 18S rRNA de piroplasmas. Ao todo, 275 carrapatos (34 machos, 11 fêmeas, 7 ninfas e 223 larvas) foram coletados de oito ouriços-cacheiro: Amblyomma longirostre, Amblyomma parkeri e Amblyomma spp. larvas. Dois dos quatro tamanduás estavam infestados por carrapatos A. calcaratum (quatro machos e duas fêmeas). Dois dos nove ouriços-cacheiro foram PCR-positivos para hemoplasmas. Uma das quatro amostras de tamanduá-mirim testou positivo para Anaplasma/Ehrlichia spp. por PCR. Todos os animais apresentaram resultados negativos para piroplasmas. A análise filogenética dos genes 16S e 23S rRNA confirmou que os ouriços-cacheiro foram infectados por um potencial novo Mycoplasma sp. hemotrópico. O nome 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' é proposto para esse novo organismo, que deve ser totalmente caracterizado. Análise filogenética do gene 16S rRNA mostrou que a sequência de Anaplasma spp. de tamanduá posicionada próxima às sequências de Anaplasma spp. de tamanduás de São Paulo, Brasil. Pesquisas envolvendo animais silvestres, principalmente os atropelados, representam importantes ferramentas para detecção de agentes de doenças transmitidas por vetores, uma vez que o acesso a muitos desses animais é limitado.

Abstract: Wild animals may play an important role in the spread of ticks and tick-borne diseases (TBD) pathogens. In Brazil, orange-spined hairy dwarf porcupines (Sphiggurus villosus) and collared anteaters (Tamandua tetradactyla) are widely distributed in the Atlantic Rainforest biome being among the animals most frequently hit and killed by cars on the roads. The aim of this study was to screen free-ranging Brazilian porcupines and collared anteaters from Paraná State, southern Brazil, for hemotropic Mycoplasma, Anaplasma/Ehrlichia spp., and piroplasms infection. Blood and/or spleen samples were collected from nine orange-spined hairy dwarf porcupines and four collared anteaters referred to the Veterinary Teaching Hospital, Universidade Federal do Paraná, Parana State, southern Brazil. The animals were screened for the presence of ectoparasites. DNA was extracted from all samples and further screened by PCR assays targeting the 16S rRNA/23S rRNA genes of hemoplasmas, 16S rRNA gene of Anaplasma/Ehrlichia spp., and 18S r RNA gene of piroplasms. A total of 275 ticks (34 males, 11 females, 7 nymphs and 223 larvae) were collected from eight porcupines: Amblyomma longirostre, Amblyomma parkeri, and Amblyomma spp. larvae. Two out of four anteaters were infested by A. calcaratum ticks (four males, and two females). Two out of nine porcupines were PCR-positive for hemoplasmas. One of four collared anteater sample tested positive for Anaplasma/Ehrlichia spp. by PCR. All animals tested negative for Theileria/Babesia spp. Phylogenetic and network analysis of the 16S and 23S rRNA gene fragments confirmed that porcupines were infected by a potentially novel hemotropic Mycoplasma sp. The name 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' is proposed for this novel organism, that should be further fully characterized. Phylogenetic analysis of Anaplasma spp. 16S rRNA gene showed our anteater sequence positioned close to sequences of Anaplasma spp. of anteaters from São Paulo, Brazil. In conclusion, research involving wild animals, especially those killed by cars on the roads, represents an important tool for detecting vector-borne disease agents, since access to many of these animals is limited.