Prevalencia de Mycobacterium avium subes. Paratuberculosis en bovinos de Ibagué – Tolima

Con el propósito de determinar la prevalencia de Mycobacterium paratuberculosis, la cual causa la paratuberculosis bovina, una enfermedad infectocontagiosa de distribución mundial es una de las más relevantes desde el punto de vista económico. Adicionalmente se ha estudiado la importancia de esta bacteria en la enfermedad de Crohn en humanos, pero su responsabilidad etiológica no ha sido confirmada. Existen diferentes técnicas diagnósticas utilizadas para la detección del MAP, aunque la técnica molecular PCR es ideal para este tipo de organismo y muestras heterogéneas complejas, cuenta con mejores características de sensibilidad y especificidad, que a diferencia de las pruebas serológicas van a depender del estadio de la enfermedad. Se recolectaron 265 muestras de materia fecal, obtenidas en bovinos ≥ 2 años, el ADN genómico fue extraído mediante el protocolo CTAB + PCI, se verifico la presencia de ADN con un gel de integridad de agarosa al 0.5% y la concentración de ADN fue medida con el equipo NanoDrop Thermo Fisher Scientific™, adicionalmente se corrió PCR convencional usando la enzima GoTaq® Flexi DNA polymerase, para el gen de referencia (e.g. 16s ribosomal). El diagnóstico de MAP se llevó a cabo por medio de la técnica de PCR anidada utilizando los primers específicos para IS900, una secuencia de inserción exclusiva de MAP. La prevalencia de las muestras procesadas fue de un 42.99%, y se identificaron factores de riesgo asociados a la enfermedad, relacionadas la positividad de los individuos mediante chi cuadrado.

In order to determine the prevalence of Mycobacterium paratuberculosis, which causes bovine paratuberculosis, an infectious contagious disease of worldwide distribution, it is one of the most relevant from an economic point of view. Additionally, the importance of this bacteria in Crohn's disease in humans has been studied, but its etiological responsibility has not been confirmed. There are different diagnostic techniques used for the detection of MAP, although the molecular PCR technique is ideal for this type of organism and complex heterogeneous samples, it has better characteristics of sensitivity and specificity, which, unlike serological tests, will depend on the stage of the disease. 265 fecal samples were collected from cattle ≥ 2 years old. Genomic DNA was extracted using the CTAB + PCI protocol. The presence of DNA was verified with a 0.5% agarose integrity gel and the DNA concentration was measured with the Thermo Fisher Scientific™ NanoDrop equipment. Additionally, conventional PCR was run using the GoTaq® Flexi DNA polymerase enzyme for the reference gene (e.g. 16s ribosomal). MAP diagnosis was carried out using the nested PCR technique using specific primers for IS900, an exclusive MAP insertion sequence. The prevalence of the processed samples was 42.99%, and risk factors associated with the disease were identified, related to the positivity of individuals by chi-square.

Resumen -- Introducción -- Planteamiento del Problema -- Justificación -- Objetivo -- Objetivo General -- Objetivos Específicos -- Marco teórico -- Etiología -- Epidemiologia de la enfermedad -- Patogenia y trasmisión -- Diagnóstico -- Tratamiento, control y prevención -- Importancia económica -- Metodología -- Ubicación -- Población de Estudio -- Encuesta Epidemiológica -- Toma de Muestras -- Extracción de ADN y Evaluación de Integridad -- Amplificación de MAP -- Electroforesis -- Secuenciación -- Análisis Estadístico -- Resultados -- Caracterización de la población en bovinos -- Prevalencia de MAP -- Factores de Riesgo -- Secuenciación -- Discusión -- Conclusiones -- Declaraciones -- Referencias Bibliográficas.

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Medico Veterinario