Development of a method for in vitro micropropagation of Thymus pseudonummularius Klok. et Schost. | Разработка методики микроразмножения in vitro Thymus pseudonummularius Klok. et Schost.

Английский. The representatives of the genus Thymus L. are promising medicinal and aromatic plants, the raw materials and essential oil of which are widely used in the pharmaceutical and cosmetic industries, as well as in the food industry. The aim of the research was to study the effect of medium composition and culture conditions on development of explants at the main stages of in vitro propagation; and to develop a technique for the clonal micropropagation of Thymus pseudonummularius Klok. et Schost. The comparison of the thyme explants culturing on six variants of the Murashige - Skoog (MS) culture medium and in different culture vessels (jars, test tubes and flasks) is presented. The analysis of the growth regulator composition effect on the explants development during in vitro culture introduction showed the advantage of kinetin using: the multiplication factor in this case was 1.2–1.7 times higher compared to 6-benzylaminopurine (BAP) and thidiazuron (TDZ). In the optimal culture medium (MS with 1 mg/L of kinetin), a 1.8-fold increase in this index was observed when explants were cultured in foil-covered tubes compared to those with cotton-gauze plugs. When cultivating at the 2-d stage of clonal micropropagation of T. pseudonummularius, when TDZ or BAP were added to the culture medium short 0.5–1.4 cm long vitrified (12.9–40.1%) microshoots were formed. At the stage of micropropagation properly, the maximum multiplication factor (11.2) was obtained on MS medium without growth regulators when explants were cultured in jars. It is revealed that for active root formation of microshoots they should be transferred to a ½ MS medium with 1 mg/L of IBA on which 100% rooting of shoots, and formation of up to 9.2 roots per shoot 2.7 cm long were observed. The ex vitro adaptation frequency of microplants on a substrate consisting of peat and perlite (1:1) was 67.5%. A technique for the T. pseudonummularius micropropagation has been developed, allowing for rapid propagation and deposition of valuable samples in vitro.

Русский. Представители р. Thymus L. являются перспективными лекарственными и ароматическими растениями, сырье и эфирное масло которых широко используется в фармацевтическом и косметологическом производстве, пищевой промышленности. Цель исследования – изучить влияние состава питательной среды и условий культивирования на развитие эксплантов на основных этапах размножения in vitro и разработать методику клонального микроразмножения Thymus pseudonummularius Klok. et Schost. Представлено сравнение культивирования эксплантов тимьяна на шести вариантах питательной среды Мурасиге и Скуга (МС) и в различных культуральных сосудах (банки, пробирки и колбы). Анализ влияния состава регуляторов роста на развитие эксплантов на этапе введения в культуру in vitro показал преимущество использования кинетина – в этом случае коэффициент размножения был выше в 1,2–1,7 раза по сравнению с 6-бензиламинопурином (БАП) и тидиазуроном (ТДЗ). На оптимальной питательной среде (МС с 1,0 мг/л кинетина) отметили увеличение этого показателя в 1,8 раза при культивировании в пробирках, закрытых фольгой, по сравнению с ватно-марлевыми пробками. При культивировании на втором этапе клонального микроразмножения T. pseudonummularius при добавлении в питательную среду ТДЗ или БАП формировались короткие витрифицированные (12,9–40,1%) микропобеги длиной 0,5–1,4 см. На этапе собственно микроразмножения максимальный коэффициент размножения (11,2) был получен на среде МС без регуляторов роста при использовании в качестве культурального сосуда банок. Выявлено, что для активного корнеобразования микропобегов их необходимо переносить на питательную среду ½ МС с 1,0 мг/л ИМК, на которой отмечено 100% укоренение побегов и формирование до 9,2 корней/побег длиной 2,7 см. Частота адаптации микрорастений ex vitro на субстрате, состоящем из торфа и перлита (1:1), составила 67,5%. Разработана методика микроразмножения T. pseudonummularius, которая позволит быстро размножить, а также депонировать ценные образцы in vitro.