The aim of this study was to evaluate isolated sheep preantral follicles (PF) after exposure and cryopreservation using glycerol (GLI), ethylene glycol (EG), propanediol (PROH) or dimethyl sulfoxide (DMSO) at 1.5 and 3.0 M. Each ovarian pair from 5 mixed breed adult sheeps was obtained at a local slaughterhouse and submited to follicular isolation. From the obtained suspension, one aliquot was immediately analysed with trypan blue. The remaining suspension was divided in 16 aliquots of 0.9 mL, suspended in (v/v) in MEM+ with EG, DMSO, GLI or PROH at 1.5 or 3.0 M to the toxicity test and cryopreservation. After the end of each treatment, the follicular viability was analysed and the PF were classified as viable if not dyed or not viable if dyed with trypan blue. The analysis of the results showed that after the toxicity test and cryopreservation, using all cryoprotectants and at both concentrations, the percentage of viable PF was significantly reduced when compared to the control. At the toxicity test, when the cryoprotectants were compared at the same concentrations, the lowest percentage of viable preantral follicles was obtained when 3.0 M PROH (38,9%) was used, being, more toxic when compared to the others cryoprotectants. After cryopreservation, significantly higher percentual of viable PF was observed when the EG and DMSO were used. In conclusion, sheep PF can be cryopreserved successfully using DMSO and EG at 1.5 and 3.0 M. | O objetivo deste estudo foi avaliar folículos pré-antrais (FOPA) ovinos isolados após sua exposição e criopreservação utilizando glicerol (GLI), etilenoglicol (EG), propanodiol (PROH) ou dimetilsulfóxido (DMSO) a 1,5 e 3,0 M. Cada par ovariano de 5 ovelhas sem raça definida foi coletado em abatedouro local e submetido ao isolamento folicular. Da suspensão obtida, uma alíquota foi imediatamente destinada à análise da viabilidade folicular com o auxílio do corante vital azul de trypan. O restante da suspensão foi dividida em 16 alíquotas de 0,9 mL, suspensas (v/v) em MEM+ com EG, DMSO, GLI ou PROH a 1,5 ou 3,0 M, para teste de toxicidade e criopreservação. Após o término de cada tratamento, a viabilidade folicular foi analisada e os FOPA considerados viáveis se não corados ou não viáveis, quando corados. A análise dos dados mostrou que após o teste de toxicidade e criopreservação, em todos os crioprotetores e em ambas as concentrações, a percentagem de FOPA viáveis foi significativamente reduzida quando comparada ao controle. No teste de toxicidade, quando os crioprotetores foram comparados entre si nas mesmas concentrações, foram observadas percentagens significativamente menores de FOPA viáveis no PROH 3,0 M (38,9%), apresentando-se, portanto, mais tóxico quando comparado aos demais crioprotetores. Após criopreservação, obteve-se percentagens significativamente maiores de folículos pré-antrais viáveis quando o EG e o DMSO foram utilizados. Em conclusão, FOPA ovinos isolados podem ser criopreservados com sucesso utilizando-se DMSO e EG a 1,5 e 3,0 M.

The detection of infected animals is one of the main factors involved in tuberculosis control and, with some variations, is performed through intradermal tuberculin tests. Nevertheless, skin test-negative animals may be infected and represent an important threat to bovine tuberculosis eradication programs. Despite this well-known phenomenon, ELISA testing did not become a routine in tuberculosis control programs. Our purpose was to describe field applications of ELISA in the detection of anergic animals in Rio de Janeiro, Brazil. From 18 herds involved on a tuberculosis control program, two presented skin test-negative infected animals what have delayed and compromised the success of the program, with severe economic losses. Infection in those animals was identified through ELISA and confirmed by isolation of M. bovis from lung lesions. Therefore they were considered to be the most probable source of continuing infection and responsible for the maintenance of the disease in their herds. Without the use of serological tests as ELISA those cows would probably stay in their herds perpetuating the disease and the eradication of the disease in those herds would become impossible. In conclusion, we suggest the use of ELISA as a valuable complementary tool in order to identify possible anergic cows that may be acting as reservoirs of the agent in the herd. | A detecção de animais infectados é um dos mais importantes fatores envolvidos no controle da tuberculose e, com algumas variações, é realizado através de testes intradérmicos de tuberculinização. No entanto, animais negativos aos testes intradérmicos podem estar infectados e representam uma importante ameaça aos programas de erradicação da tuberculose. Apesar deste conhecido fenômeno, o uso de ELISA não é rotina nestes programas. Nosso objetivo foi o de descrever experiências do uso a campo de ELISA na detecção de animais anérgicos no Rio de Janeiro, Brasil. Dentre 18 rebanhos envolvidos em um programa de controle da tuberculose, dois apresentaram animais infectados negativos aos testes intradérmicos, o que atrasou e comprometeu o sucesso do programa, com severas perdas econômicas. A infecção nestes animais foi identificada através de ELISA e confirmada pelo isolamento de M.bovis nas lesões pulmonares. Desta forma foram considerados como a mais provável fonte de infecção e responsáveis pela manutenção da enfermidade nos rebanhos. Sem o uso de testes sorológicos como ELISA estes animais provavelmente permaneceriam nos rebanhos perpetuando a infecção e a erradicação da enfermidade seria impossível. Em conclusão, sugere-se o uso de ELISA como uma valiosa ferramenta complementar para identificar animais anérgicos que possam atuar como reservatórios do agente nos rebanhos.

Diseases, breeding and production intensity, as well as inadequate handling were factors considered as stressful to milk cows, determining milk retention. Four healthy adult cows and in full milking period and without any prior mamits and/or intra-mammary treatment were experimentally submitted to 10% milk retention of which milk samples were collected at the following times: before milk retention, 12, 24, 36, 48, 60 hours during retention and 168 and 180 hours after the initial procedure, or being, 108 and 120 hours after retention ceased. The milk samples were previously submitted to physic-chemical and microbiological exams. The whey was obtained by milk coagulation with renin and the proteinogram determined by biuret method and fractionizing by polyacrymalide gel electrophoresis. A gradual and significant increase of some fractions of the whey was observed: serum albumin and immunoglobulin bovine, lactoferrin; ±1-antitrypsin; ²-lactoglobulin and; ±-lactoalbumin. At the end of the experiment, the proteic fractions returned to their initial state, the moment previous to the initial milk retention. | Doenças, intensidade na criação e produção, bem como o manejo inadequado foram fatores considerados estressantes para vacas leiteiras, determinando a retenção de leite. Quatro vacas adultas, sadias e em plena lactação e sem antecedentes de mamites e/ou tratamento intra-mamário foram submetidas experimentalmente a 10% de retenção de leite, das quais colheram-se amostras de leite nos seguintes momentos (Tempos): antes da retenção, 12, 24, 36, 48, 60 horas durante a retenção e, 168 e 180 horas após o início do procedimento, ou seja, 108 e 120 horas após cessada a retenção. As amostras de leite foram, previamente, submetidas a exames físico-químico e microbiológico. O soro lácteo era obtido por coagulação do leite com renina e o proteinograma determinado por biureto e fracionamento por eletroforese em gel de poliacrilamida. Observou-se um gradativo e significativo aumento de algumas frações do soro lácteo: albumina e imunoglobulina sérica bovina; lactoferrina; ±1-antitripsina; ²-lactoglobulina e; ±-lactoalbumina. Ao final da experimentação os valores das frações protéicas, retornaram aos iniciais, momento anterior ao início da retenção láctea.

O Centro de Resgate de Mamíferos Aquáticos (CRMA) tem trabalhado desde 1999 com o resgate e a reabilitação de cetáceos e pinípedes em situação de encalhe no litoral do Estado da Bahia. O presente trabalho objetiva apresentar e avaliar os resultados de hemogramas e dosagens séricas de alanina aminotranferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e creatinina realizados em um exemplar de elefante-marinho-do-sul, Mirounga leonina (LINNAEUS, 1758), encontrado no dia 11 de fevereiro de 2002 na praia da Barra, litoral de Salvador, BA. Tratava-se de um filhote macho, com 137cm de comprimento e peso aproximado de 49kg, com estado nutricional debilitado, um ferimento no lado direito na altura da escápula. O exemplar permaneceu em acompanhamento clínico por 56 dias, sendo vermifugado com Febendazole, o ferimento suturado e tratado com álcool iodado, Nitrofurazona solução e Tartarato de Ketanserina, simultaneamente com Enrofloxacina 10%, Potenay®, Complexo B e Benerva®. No dia 16 seguinte apresentou um quadro de conjuntivite unilateral direita, sendo tratado até o final de sua estadia com pomada oftálmica à base de Cloridrato de Cloranfenicol. Durante este período colheu-se um total de seis amostras de sangue, sendo três para a realização de hemograma e as demais para dosagem de ALT, AST e creatinina. De acordo com os resultados dos eritrogramas o filhote desenvolveu um quadro de anemia, classificada como microcítica e normocrômica. Com relação aos leucogramas, destacou-se linfopenia, eosinopenia e monocitopenia, possivelmente influenciado pelas condições de estresse e o manejo. Constatou-se nos exames bioquímicos valores diminuídos para a AST e creatinina, porém não representando a existência de um quadro patológico de significância clínica. | Since 1999 the Aquatic Mammals Rescue Center - AMRC has been working in the rescue and rehabilitation of stranded cetaceans and pinnipeds on the coast of Bahia, Brazil. This paper presents and analyses the blood cells count and clinical chemistry of alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and creatinine of a southern elephant seal, Mirounga leonina (LINNAEUS, 1758), found on February the 11th at Barra Beach, Salvador, BA. The specimen was an orphan male calf, with 137cm of length and estimated weight of 49kg. It presented bad nutritional conditions and a shark bite on the right shoulder area. Clinical management was performed for 56 days, anthelmintic Febendazole was utilized, and the bite was treated with iodined alcohol, Nitrofurazone solution and Kethanserin, simultaneously with Enrofloxacin 10%, Potenay®, Vitamin B Complex and Benerva®. On the 16th the animal presented a right unilateral conjuntivitis, treated with Cloranphenicol oftalmic pomade until the end of its stay in the captive. During this period a total of six blood samples were collected, three for total blood counts and the others for the biochemistry determination of ALT, AST and creatinine. According to the haematological analysis the seal developed an anaemia which was classified as microcytic and normochromic. Lymphopenia, eosinopenia and monocytopenia were also observed, possibly due to its handling and stress conditions. The clinical chemistry presented low values for AST and creatinine, although this did not represent the existence of any pathologic context or disease with clinical significance.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito analgésico da administração prévia de cetamina S(+) ou cetamina, na dor pós-inciosal em eqüinos. Utilizaram-se, em um estudo duplo-cego ao acaso, 16 éguas com idade de 6±2 anos, pesando 273,2 ± 42,0 kg. 24 horas antes do início do experimento introduziu-se um cateter epidural. No dia seguinte, as regiões isquiáticas direita e esquerda foram tricotomizadas e, a sensibilidade cutânea aferida utilizando-se os filamentos de Von Frey, tempo -30 (T-30). Realizou-se bloqueio anestésico em linha, no lado direito e, 25 minutos após administrou-se através do cateter epidural cetamina S(+) no G1 e cetamina no G2. Cinco minutos após a injeção de cetamina, realizou-se uma incisão de pele de 10 cm no lado direito, seguida de sutura. Avaliou-se a dor pós-incisional, utilizando-se os filamentos de Von Frey, a 1, 3 e 5 cm ao redor da incisão (lado incindido) e a sensibilidade cutânea (lado controle), em intervalos de 15 minutos, por 2 horas e então, 4, 6 e 8 horas após a sutura de pele. Não foram observadas alterações nas freqüências cardíaca ou respiratória e temperatura retal entre os grupos ou entre os tempos de cada grupo. Observou-se ataxia de membros pélvicos em 62,5% e 12,5% dos animais, para o G1 e G2, respectivamente. A cetamina S(+) e cetamina reduziram a sensibilidade cutânea no lado direito e esquerdo, para os estímulos mecânicos produzidos pelos filamentos de Von Frey, durante todo os período experimental. A cetamina S(+) e cetamina produziram duração de efeito analgésico similares e não interferiram nos parâmetros cardiorrespiratórios. Observou-se ataxia mais intensa e potência anestésica superior nos primeiros 60 minutos após a administração de cetamina S(+). | The aim of this study was to evaluate the pre-emptive effect of epidural ketamine S (+) (SK) or racemic ketamine (RK) administration, in post-incisional pain in horses. Were used in a blinded, randomized experimental study, sixteen mixed breed mares, 6±2 years old, weighting 273.2±42.0 kg. An epidural catheter was inserted 24 hours before the trials. The thigh region was shaved bilaterally, and mechanical cutaneous sensibility was measured using von Frey filaments (T-30). Using the left side as the control one, local anesthesia was performed at the right side. Twenty-five minutes later, SK was injected in G1 or RK in G2 through the epidural catheter. Five minutes after the ketamine injection, a 10 cm skin incision was made on the right side, and then sutured. Mechanical post-incisional pain was measured using von Frey filaments, at 1, 3 and 5 cm around the incision at 15 minutes intervals, for 2 hours, then 4, 6 and 8 hours after suturing. No changes were observed in the heart and respiratory rate and rectal temperature among groups or times of each group. Hind limb ataxia was observed in 62.5% and 12.5% of G1 and G2 respectively. SK and RK reduced cutaneous sensibility in the right and the left sides to mechanical postincisional pain during all time of experiment. Epidural SK and RK produce similar post-incisional analgesic effects, did not interfere in the cardio-respiratory parameters. The SK induces more intense ataxia in mares and presents a larger analgesic potency in the first 60 minutes after the administration.

Avaliou-se o metabolismo ruminal de bovinos submetidos ou não a dietas carentes em energia, por meio de provas bioquímicas e funcionais no fluido ruminal e urinário com finalidade diagnóstica. Para tal, foram utilizados 10 garrotes mestiços providos de cânula ruminal que foram divididos em dois grupos, ou seja: controle (C; n=4) dieta balanceada para ganho diário de 900 g e carência pronunciada de energia (CP; n=6) recebendo 30% a menos do nível de mantença em energia. Após os bovinos serem alimentados por 140 d foram coletadas amostras de fluido ruminal e urina antes da alimentação e nas 1ª, 3ª, 6ª e 9ª h seguintes. A carência energética provocou diminuição significativa nos teores ruminais de AGVs totais, ácidos propiônico e butírico, amônio, elevando-se o tempo da prova de redução do azul de metileno (RAM) e menor produção de gases no teste de fermentação de glicose (FG); o índice de excreção urinária de alantoína (IEUA) também foi menor. A carência provocou aumento na porcentagem molar de ácido acético. Não se verificou efeito dos tratamentos sobre o pH ruminal. Existiram correlações positivas de grande intensidade entre FG e AGVs e amônia, e de média intensidade entre FG e amônia e IEUA, assim como de correlação negativa, de média intensidade, entre RAM e AGVs, amônia, FG e IEUA. Com exceção do pH todas as análises estudadas detectaram alterações no metabolismo ruminal provocada pela carência energética. Porém, considerando-se a praticidade dos testes, recomenda-se a prova do RAM, seguida pela FG para um diagnóstico rápido e sensível deste quadro carencial. | Ten yearling crossbred rumen-cannulated steers were randomly divided in two equal groups for studying some ruminal metabolism tests in cattle fed adequate or deficient diets on energy. The control group (C) was fed a diet to gain 900 g/BW/d, while to the very deficient group (VD) was given a diet with 30 % less than the maintenance level of dietary energy. On the 140th d ruminal fluid and urine samples were collected at the basal and in the 1st, 3rd, 6th, and 9th h after the morning feeding. The energy deficiency caused significant decrease in the ruminal levels of total volatile fatty acids (VFA), propionic and butyric acids, and ammonium, an increase in time of methilene blue reduction test (MBRT) and decrease in the gas production in the glucose fermentation test (GFT); the urinary allantoin excretion rate (UAER) was also lower. The deficiency caused an increased in the molar proportion of acetic acid. There was no diet effect on the ruminal fluid pH. There were high positive correlation between GFT and VFAs and ammonium, medium positive correlation between MBRT and VFAs, ammonium, GFT and UAER. All studied variables were able to detect changes in the ruminal metabolism in cattle fed energy deficient diet, but the rumen fluid pH. Nevertheless, as far as the feasibility is concerned the MBRT, followed by the GFT should be adopted to allow a rapid and sensible diagnosis of dietary energy deficiency.

The aim of this study was to evaluate the dilution of cryoprotectant in 2 or steps of bovine in vitro-produced embryos after quick-freezing. A total of 1329 expanded blastocyst were kept in co-culture as control group or cryopreserved by 3 quick-freezing protocols. The embryos were exposed to 10% EG for 10 minutes then to 17%, 22% or 28% for 30 seconds. After loading, the straws were held in nitrogen vapor for 2 minutes and then plunged and stored in liquid nitrogen. After warming, cryoprotectants were diluted in two steps using 0.3 M sucrose and isotonic solution, or three steps using 0.3 M sucrose + 10% EG then 0.3 M sucrose and isotonic solution. Embryos were co-cultured on a granulosa cell monolayer and evaluated after 24 hours for re-expansion and at 24, 48, 72 and 96 hours of co-culture for hatching rates. The in vitro survival rates of embryos cryopreserved by the quick-freezing method and two-step cryoprotectant dilution were 1.94; 11.88 and 6.06%, for EG 17, EG22 and EG28 groups, respectively. At the three step dilution, the in vitro survival rates were 4.67; 9.90 and 10.78% for EG 17, EG22 and EG28 groups, respectively. | O objetivo deste trabalho foi estudar a remoção do crioprotetor, em duas ou três etapas, em embriões bovinos produzidos in vitro após a congelação em vapor de Nirtogênio. Blastocistos expandidos (1329) foram mantidos em co-cultivo (controle) ou criopreservados em 3 protocolos de congelação em vapor de nitrogênio. Os embriões foram equilibrados na solução de 10% de EG por 10 minutos e em 17%, 22% ou 28% de EG por 30 segundos. Após o envase, as palhetas foram mantidas em vapor de nitrogênio por 2 minutos e armazenadas em nitrogênio líquido. Após a descongelação, os crioprotetores foram diluídos em duas etapas, usando 0,3M de sacarose e solução isotônica ou em três etapas usando 0,3M de sacarose + 10% de EG; 0,3M de sacarose e solução isotônica. Os embriões foram co-cultivados com células da granulosa, avaliando as taxas de re-expansão após 24 horas e de eclosão após 24, 48, 72 e 96 horas. Para os grupos congelados no vapor e diluição do crioprotetor em duas etapas, as taxas de eclosão foram de 1,94; 11,88 e 6,06% para EG17, EG22 e EG28, respectivamente. Já para os grupos com diluição do crioprotetor em três etapas, as taxas de eclosão foram de 4,67; 9,90 e 10,78% para EG17, EG22 e EG28, respectivamente.

The aging is characterized by a progressive decline of neuronal function that involves both the central and the peripheral nervous system. Aging process is accompanied by changes in the number and size of neurons. However, these data are controvesial and poorly known in the peripheral ganglia. In this way, the present investigation aimed to study the dog's caudal mesenteric ganglion (CMG) in two different phases of aging (maturation and aging), looking for morphometric alterations in the neurons. The importance of the CMG is associated with the innervation of the lower large intestine, internal anal sphincter and partially the urogenital system. To the study, was used nine males, mongrel, domestic dogs, divided into three different well defined aged groups (1-2 months, 1-3 years old, 5-10 years old). The ganglia were processed for light microscopy study and the morphometric analyses were done using morphometric analyses software KS 400 Zeiss®. The increase of age was caractherized by an increased in size of neuron and nucleu. Concerning about nucleus-citoplasmic relation, this decrease with the age. | O envelhecimento é caracterizado por um progressivo declínio na função neuronal envolvendo tanto o sistema nervoso central como o periférico. O aumento da idade é verificado por alterações no número e no tamanho do neurônios. Contudo, estes dados são controversos e pouco conhecidos nos gânglios periféricos. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo estudar o gânglio mesentérico caudal (GMC) de cães em dois períodos distintos do desenvolvimento (maturação e envelhecimento), a procura de alterações morfométricas nos neurônios. A importância do GMC esta ligada à inervação simpática do intestino grosso, esfíncter anal interno e parcialmente o aparelho urogenital. Para o estudo, foram utilizados nove cães domésticos sem raça definida e machos, divididos em três grupos etários com idades bem definidas (1-2 meses, 1-3 anos e 5-10 anos). Os gânglios foram processados para o estudo da microscopia e luz e as análises morfométricas (área seccional do neurônio e do núcleo) foram realizadas por meio do software de análise morfométrica KS 400 ZEISS®. O aumento da idade foi caracterizado por um aumento no tamanho do neurônio e do núcleo. Quanto a relação núcleo-citoplasma, esta diminuiu com o aumento da idade.

Prostatic diseases have been a common problem in middle age and older intact male dogs. Among these, benign prostatic hyperplasia (BHP) is the most frequent, age-related and hormonal-dependent condition of human and canine prostate. Blood samples were collected from 37 male intact dogs, tree years old dogs or more to determine androgens, estrogen, prostatic acid phosphatase (PAP) and prostatic specific antigen (PSA) according to histopathological aspects. Low levels of estrogen and high levels of prostatic specific antigen (PSA) were founded in dogs with BHP, respectively. Seric and urinary PAP levels were high in dogs with hyperplasia. | As doenças prostáticas constituem um problema comum em cães adultos e idosos. Uma das afecções mais freqüentes é a hiperplasia prostática benigna (HPB) que, tanto no cão como no homem, está associada ao avanço da idade e ao desequilíbrio hormonal. No presente trabalho foram mensurados hormônios andrógenos, estrógeno, fosfatase ácida prostática (PAP) e antígeno prostático específico (PSA) de 37 cães com idade superior a três anos, em função do aspecto microscópico da próstata. Encontraram-se baixos níveis de estrógeno e altas concentrações de PSA nos animais com algum tipo de hiperplasia. Os valores de PAP sérico e urinário também foram maiores nos cães com hiperplasia.

Lingual mucosa of young mouse was examined by transmission and high resolution scanning electron microscopic images (HRSEM). The specimens were fixed with modified Karnovsky solution and embedded in Spurr resin for transmission electron microscopy. Thin sections of 80 nm were cut and examined in the Jeol 1010 transmission electron microscope. For HRSEM method, the specimens were fixed in the same solution, postfixed in osmiun tetroxide, critical point dried and coated with palladium. The samples were examined under Hitachi S-900, SEM microscope. The results revealed groups of bacteria attached to the surface of keratinized epithelial cells. These streptococcus and coccus attached on the cell membrane were noted in the three-dimensional SEM images. At high magnification, the transmission electron microscopic images demonstrated the adhesion of bacteria to the cell membrane through numerous fimbria comprising the glycocalyx. The fine fibrillar structure rising from bacteria were clearly seen. | A mucosa lingual de camundongos jovens foi examinada através de imagens de microscopia eletrônica de transmissão e de varredura de alta resolução. Os espécimes foram fixados em solução modificada de Karnovsky e emblocadas em resina Spurr para a microscopia eletrônica de transmissão. Cortes finos de 80 nm foram feitos e examinados em um microscópio eletrônico de transmissão Jeol 1010. Para a microscopia eletrônica de varredura de alta resolução os espécimes foram imersos na mesma solução, pós fixados em tetróxido de ósmio, secos e cobertos com paládio. As amostras foram examinadas em um microscópio eletrônico de varredura Hitachi S-900. Os resultados revelaram grupos de bactéria aderidos à superfície queratinizada das células epiteliais. Estes estreptococos e cocos aderidos à membrana celular foram notados em imagens tridimensionais. Em aumentos maiores, as imagens de microscopia eletrônica de transmissão demonstraram a adesão de bactéria à membrana celular através de numerosas fimbrias compondo o glicocalice. A estrutura fibrilar emergindo da bactéria foi claramente observada.