Mjerenje endotoksina u kućnoj prašini metodom end-point Limulus amebocitnog lizata | Endotoxin Measurement in House Dust Using the End-point Limulus Amoebocyte Lysate Method

Endotoxin je dio stanične stijenke gram negativnih bakterija, a po sastavu je lipopolisaharid. Široko je raspostranjen u okolišu, kako općem tako i radnom. U članku se opisuje priprema uzoraka i mjerenje endotoksina u 16 uzoraka gradske kućne prašine (Zagreb, Hrvatska) metodom end-point kromogeni Limulus amebocitni lizat test (LAL-test). Kućna prašina skupljana je u celulozne filtere usisavanjem podova spavaćih i dnevnih soba. Uzorci su do dana mjerenja čuvani smrznuti u hladnjaku na –20 °C. Ekstrakcija je provedena pomoću 0,05 % otopine Tween-20 u vodi bez endotoksina (endotoxin-free water). Serijska Serijska water razrijeđenja uzoraka mjerena su u duplikatu pomoću analizatora IASON Libertas (IASON Laboratory Medicine, Austria). Postignuta je zadovoljavajuća linearnost standardne krivulje (r = 0,983), odsutnost interferencije i adekvatna ponovljivost (koeficijent varijabilnosti od 0 to 8,5 %). U uzorcima prašine izmjerene su vrijednosti endotoksina u rasponu od 4,8 do 200 EU/mg, sa srednjom vrijednošću (aritmetička sredina) od 49,5 EU/mg i standardnom pogreškom od 12,1 EU/mg. Ovo su prvi opisani rezultati mjerenja endotoksina u uzorcima kućne prašine u Hrvatskoj, a u skladu su s rasponima vrijednosti izmjerenih u kućnoj prašini u drugim zemljama.

Endotoxin is a lipopolysaccharide, a part of Gram-negative bacteria cell membrane commonly present in general and many occupational environments. This paper describes sample preparation and endotoxin measurement in 16 samples of house dust from urban homes (Zagreb, Croatia) using end-point chromogenic Limulus amoebocyte lysate (LAL) bioassay. House dust was collected on cellulose filters by vacuuming bedroom and living room floors, and was kept frozen until assayed. Samples were extracted from filters with a 0.05 % solution of Tween-20 in endotoxin-free water. Serial dilutions of samples were measured in duplicates. The linearity of the standard curve was satisfying (r=0.983), as well as the recovery (92 and 110 %) and repeatability (coefficient of variation from 0 to 8.5 %). The endotoxin levels found in the house dust samples ranged from 4.8 to 200 EU/mg, with the arithmetic mean of 49.5 EU/mg (standard error of the mean of 12.1 EU/mg), and were in the range of house dust endotoxin values obtained by other authors.