Application of a multispectral assay for evaluation of the morphofunctional status of immunocompetent cells in cattle with retroviral diseases | Использование микроспектрального анализа для оценки морфофункционального статуса иммунокомпетентных клеток при ретровирусных заболеваниях крупного рогатого скота

Microspectral analysis (MA) is a highly informative way to study the morphofunctional status of cells, including immunocompetent ones. Purpose of the study is to apply it for studding of bovine lymphocytes in cattle with enzootic leukemia and viral immunodeficiency, which is important for diagnostics and differential diagnostics of diseases, as well as for analyzing of animal homeostasis and making a prognosis of the disease. Leukemia and immunodeficiency are classified as hematopathological processes. There was used the hematological method as a comparative method. Spectral analysis of stained with a Leukodif 200 kit agranulocytes was carried out using the universal color analyzer microscope-spectrophotometer LOMO MSFU-K. The value of the light absorption intensity was measured in the visible-light spectrum from 300 to 700 nm. The results of MA showed that for cows' lymphocytes with combined pathology (BLV/BIV), the absorption values in the spectrum of eosin U and azure II were 351.2 ± 17.6 and 751.4 ± 37.6 counts, respectively. For animals with BLV and BIV mono-infection, these indicators were 253.3 ± 12.7; 383.3 ± 19.2 and 371.5 ± 18.5; 500.2 ± 24.9 counts. In intact cows, these indicators were registered at the level of 210.3 ± 10.5 and 173.6 ± 8.6 counts. In intact animals, the acidic and basic components ratio in the cell was uniformly proportional, the ratio coefficient was 0.83 ± 0.04. For BIV- , BLV- and BLV/BIV - infected animals, this coefficient was 1.34 ± 0.06, 1.51 ± 0.08 and 2.13 ± 0.11, that was in 1.6, 1.8 and 2.6 times higher than in intact animals, which might be an indicator of metabolic acidosis in the cell. Changes indicating homeostatic disorders of the infected animal's organism at the cell level detected with MA for the first time, correlate with the results of hematological analysis revealed signs of hypoxia and inflammation. /Микроспектральный анализ (МА) - высокоинформативный способ оценки морфофункционального состояния клеток, в т. ч. иммунокомпетентных. Цель исследования - использование МА для изучения лимфоцитов крупного рогатого скота при энзоотическом лейкозе и вирусном иммунодефиците, что имеет значение для лабораторной диагностики и дифференциальной диагностики болезней, а также для оценки состояния гомеостаза организма животного и составления прогноза заболевания. Лейкоз и иммунодефицит относят к гематопатологическим процессам. В качестве компаративного метода использовали гематологический метод исследования. Спектральный анализ окрашенных набором Лейкодиф 200 агранулоцитов осуществляли с помощью универсального цветоанализатора микроскопа-спектрофотометра ЛОМО МСФУ-К. Регистрировали величину интенсивности поглощения светового пучка в области спектра от 300 до 700 нм. Результаты МА показали, что для лимфоцитов коров с сочетанной патологией (BLV/BIV) значения поглощения в спектре эозина У и азура II составили 351,2 ± 17,6 и 751,4 ± 37,6 counts соответственно. Для животных с BLV- и BIV-моноинфекцией эти показатели составили 253,3 ± 12,7; 383,3 ± 19,2 и 371,5 ± 18,5; 500,2 ± 24,9 counts. У интактных коров данные показатели регистрировались на уровне 210,3 ± 10,5 и 173,6 ± 8,6 counts. У интактных животных соотношение кислотных и основных компонентов в клетке было равномерно пропорциональным, коэффициент соотношения составил 0,83 ± 0,04. Для BIV- , BLV- и BLV/BIV- инфицированных животных этот коэффициент в среднем составил 1,34 ± 0,06; 1,51 ± 0,08 и 2,13 ± 0,11, т.е. оказался в 1,6; 1,8 и 2,6 раза выше, чем у интактных, что может являться индикатором метаболического ацидоза в клетке. Впервые выявленные методом МА изменения, свидетельствующие об изменении гомеостаза организма инфицированных животных на уровне клетки, коррелировали с результатами гематологических исследований, обнаруживших признаки гипоксии и воспаления.