Artrite-encefalite caprina: infecção experimental via inseminação artificial e acompanhamento clínico e sorológico.

Resumo: Desde os relatos dos primeiros casos da síndrome da Artrite-Encefalite Caprina (CAE) até o isolamento e identificação do vírus (CAEV) como o agente causador, os pesquisadores vêm buscando um maior conhecimento da doença, como a comprovação das formas de transmissão e os métodos laboratoriais capazes de auxiliar no diagnóstico e controle da infecção. Visando contribuir com estas questões, foram realizados dois experimentos na Embrapa Caprinos e Ovinos, sendo um para avaliar a transmissão do CAEV pelo sêmen via Inseminação Artificial (IA), e o outro para comparar os testes de diagnóstico, Imunodifusão em Gel de Agarose (IDGA) e Western Blot (WB), e correlacionar os resultados dos testes com os sinais clínicos da doença. Para tanto, 30 cabras Sem Raça Definida com idades entre um e três anos, sorologicamente negativas para o CAEV, tiveram o estro sincronizado utilizando-se dois protocolos: um grupo recebeu esponjas intravaginais e outro implantes subcutâneos auriculares. Para as inseminações foram dividas em três grupos de 10 animais e inseminadas com sêmen de um reprodutor Anglo-Nubiano (soronegativo), coletado por vagina artificial, dividido em três alíquotas e diluído em MEM com 2% de soro fetal bovino e glicose, sendo que em uma alíquota o meio de diluição portava o vírus cepa padrão CAEV-Cork, com título infectante 106 TCID50/mL e em outra o título de 102 TCID50/mL. A terceira alíquota foi diluída no mesmo meio sem o vírus para controle negativo. Aos 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300 e 360 dias após as inseminações as fêmeas foram monitoradas clinicamente e pelos testes de diagnósticos IDGA e WB. A transmissão foi confirmada aos 30 dias após as IAs em duas cabras por IDGA e em doze por WB. Aos 60 dias, todas as fêmeas (20) que receberam o sêmen contaminado apresentaram anticorpos anti CAEV através do teste de WB. As cabras do grupo controle permaneceram soronegativas durante todo o período experimental segundo os dois testes de diagnóstico. Todos os animais infectados mantiveram-se clinicamente saudáveis e sem nenhum sintoma característico da CAE durante 12 meses de infecção. Com base nesses resultados, pode-se concluir que o vírus foi transmitido pela inseminação artificial com sêmen contaminado. Além disso, os animais inseminados com sêmen contaminado representam importantes fontes de infecção do CAEV, agravado pelo fato da doença não manifestar sintomas clínicos por um longo período de tempo e que o IDGA, que é o teste usualmente utilizado e recomendado pela OIE e pelo MAPA, não detecta os animais no início da infecção e apresenta elevada ocorrência de animais falso-negativos. [Caprine Arthritis-Encephalitis: experimental infection by the artificial insemination and clinical and serological monitoring]. Abstract: Since the reports of the first cases of the Caprine Arthritis-Encephalitis (CAE) syndrome to the isolation of the virus (CAEV) as the causative agent identification, the researchers are seeking rapid knowledge of CAE, evidence of transmission and laboratory methods that are able to assist in the diagnosis of infection.To complement these issues, two experiments were conducted at Embrapa Goats and Sheep in the period of October 2008 to October 2009. An experiment aimed to evaluate the transmission of CAEV via artificial insemination, and the other to identify which diagnostic test, immunodiffusion in agarose gel (AGID) or Western Blot (WB), would be able to detect seroconversion earlier, and their correlation with clinical signs of disease. Therefore, 30 undefined breed goats, serologically negative for CAEV. Were estrus synchronized using two protocols, one group received intravaginal sponges and other subcutaneous ear implants. For the inseminations were divided into three groups of 10 animals and inseminated with semen from an Anglo-Nubian (seronegative), collected by artificial vagina, divided into three aliquots and diluted in MEM with 2% fetal calf serum and glucose, and in a medium dilution rate was carrying the virus standard strain CAEV-Cork, with infective titles of 106TCID50/mL and another 102TCID50/mL. The third aliquot was diluted in the same medium without virus for negative control. The transmission was confirmed 30 days after the IAs in two goats by AGID and twelve by WB, 60 days in all females (20) who received the contaminated semen, had CAEV antibody test through the WB. At 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300 and 360 days after insemination females were accompanied by diagnostic tests AGID and WB, and clinically. The transmission was confirmed 30 days in two goats by AGID and twelve by WB. Twelve months after the insemination, all females who received the negative control expressed anti-CAEV antibodies throughout the experimental period. All the infected animals remained clinically healthy and without any symptoms of CAE. Based on these results, we can conclude that the virus was transmitted by artificial insemination with contaminated semen. Moreover, the animals inseminated with semen contaminated represent important sources of CAEV infection, aggravated by the fact that the disease did not manifest clinical symptoms over a long period of time and that the AGID, which is the test commonly used and recommended by the OIE and the MAP not detect the animals at the onset of infection and has a high occurrence of falsenegative animals .

葡萄牙语. Dissertação (Mestrado em Zootecnia. Área de concentração: Reprodução de ruminantes) - Universidade Estadual Vale do Acaraú (UVA), Sobral. Orientadora: Alice Andrioli Pinheiro, Embrapa Caprinos e Ovinos (CNPC)