Proteínas de unión a actina en Plasmodium falciparum
1996
Forero de Lleras, C.I.
西班牙语; 卡斯蒂利亚语. La invasión del Plasmodium falciparum, el agente causante de la malaria en humanos, implica un movimiento de penetración del parásito a los eritrocitos. Con el objetivo de determinar el motor molecular implicado en dicho proceso se utilizaron 2 estrategias diferentes: la primera consistió en preparar columnas de afinidad con actina polimerizada (actina F), para cromatografiar extractos del parásito marcados radioactivamente con L-[35S] metionina, y seleccionar proteínas de unión a actina que posteriormente, fueron identificadas por medio de anticuerpos específicos. En la segunda se utilizó la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y oligonucleótidos degenerados, diseñados con base en secuencias concenso de miosinas, para buscar un fragmento de este gen en el genoma total del parásito y posteriormente clonarlo y secuenciarlo. Los resultados obtenidos confirman contundentemente la existencia de un motor molecular basado en actina-miosina, en la invasión del parásito a los eritrocitos. Esta afirmación está sustentada en primer lugar por el hallazgo de un gen de miosina en P. falciparum, pero por homología de su secuencia parcial se clasifica dentro de la clase I, subgrupo 1 de las miosinas no convencionales, caracterizadas por su capacidad de generar movimientos sobre filamentos de actina en diferentes funciones celulares y, adicionalmente, por la determinación medio de Western Blot y anticuerpos específicos, de alfa-actinina, tropomiosina y espectrina en el parásito, proteínas que son reconocidas moduladoras de las funciones de la actina en el citoesquelto, lugar donde se encuentra toda la maquinaria necesaria para el óptimo funcionamiento de los motores celulares
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