Reciprocal nuclear exchange between oocytes from one-month-old lambs and adult ewes to evaluate cytoplasmic and nuclear competence of female prepuberal gametes
2001
Ptak, G. | Loi, P. | Barboni, P. (Teramo Univ. (Italy). Dipartimento di Strutture, Funzioni, Patologia degli Animali e Biotecnologie)
英语. A number of studies have shown lower developmental ability of oocytes collected from prepuberal donors compared to their adult counterparts. The objective of this experiment was to evaluate whether this decreased competence relies on cytoplasmic or nuclear deficiency. Accordingly, oocytes collected from slaughtered animals were matured in vitro for 24 hours. Matured oocytes, following complete denudation, were incubated with Hoechst 33342 in order to visualize subsequently metaphase plate under UV light. Reciprocal transfer of metaphase plates between adult and prepuberal oocytes were made. Reconstructed oocytes were fused by electrical pulse, fertilized by ICSI and left in culture for 7-8 days. Although the manipulation procedures partially compromised developmental potential in all groups, better development in term of cleavage and blastocyst rate was obtained when oocytes were reconstructed from adult oocyte derived nucleus and lamb cytoplasm. This result suggests that incomplete nuclear maturity is responsible for reduced developmental competence in the majority of lamb oocytes
显示更多 [+] 显示较少 [-]意大利语. [Diversi studi hanno messo in luce una minore capacita' di sviluppo degli oociti raccolti da donatori prepuberi rispetto ai loro corrispondenti adulti. L'obiettivo di questo esperimento consisteva nel valutare se questa ridotta competenza risiede in carenze della componente citoplasmatica o nucleare. Con questo obiettivo, oociti raccolti da animali macellati sono stati maturati in vitro per 24 ore. Gli oociti maturi, dopo essere stati completamente denudati, sono stati incubati con Hoechst 33342 allo scopo di visualizzare successivamente la piastra metafasica in luce UV. Sono stati effettuati trasferimenti reciproci di piastre metafasiche fra gli oociti di animali adulti e prepuberi. Gli oociti ricostituiti sono stati fusi mediante pulsazione elettrica, fecondati mediante ICSI e lasciati in coltura per 7-8 giorni. Sebbene le procedure di manipolazione compromettessero parzialmente il potenziale di sviluppo in tutti i gruppi, il miglior sviluppo in termini di divisione e di raggiungimento dello stadio di blastocisti e' stato ottenuto nel caso in cui gli oociti sono stati ricostituiti a partire da un nucleo derivante da un oocita adulto e dal citoplasma di agnella. Questo risultato fa ritenere che la maturita' nucleare incompleta sia responsabile della competenza di sviluppo ridotta nella maggior parte degli oociti di agnella]
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