Determinación de mutaciones en los genes de los receptoresTirosina cinasa (kit y pdgfra) asociados a tumores del estroma Gastrointestinal (gist)

Las alteraciones moleculares en los oncogenes c-kit y pdgfra; que codifican para los receptores de membrana tirosina cinasas, se asocian con características clínico-patológicas de pacientes con tumores del estroma gastrointestinal (GIST). Actualmente, los medicamentos están siendo desarrollados para inhibir, a nivel, molecular, la acción de los oncogenes que desencadenan el desarrollo del cáncer. En este estudio caracterizamos las mutaciones de los genes c-kit y pdgfra en pacientes con diagnóstico de GIST para determinar las mutaciones que pudieran estar asociadas a la proliferación tumoral y/o a una respuesta terapéutica específica. Se aisló el ADN de 44 tejidos de tumor fijados en formalina con diagnóstico de GIST. Los exones con mayor frecuencia de mutaciones reportadas para los genes c-kit, y pdgfrc4 fueron amplificados y evaluados por secuenciación directa. Experimentos de donación fueron realizados para caracterizar todos los posibles aletos mutantes presentes en las células tumorales. Las secuencias de aminoácidos fueron inferidas y alineadas a una secuencia de referencia del Genebank para determinar el sitio y el tipo de mutación. Encontramos la mayor frecuencia de mutaciones en el exón 11 (77%) del gen c-kit. Las mutaciones encontradas en el exón 11 fueron heterogéneas mientras que, el exón 9 presentó un único tipo de mutación (p.A502Y503dup). En el gen pdgfra se observó sustituciones y deleciones, siendo la más frecuente p.D842V. Todas las mutaciones encontradas han sido previamente asociadas a GIST, inclusive se observaron mutaciones asociadas a. GIST con síndromes familiares. Un 66% de los pacientes de alto riesgo presentaron mutaciones entre los residuos 556-560 del exón 11 del gen c-kit. Es interesante observar que las mutaciones entre los residuos 556-560 comprenden la región de la yuxtamembrana que regula entre la conformación activa e inactiva del receptor. Nuestros resultados sugieren que el sitio y tipo de mutación activan constitutivamente a los receptores KIT y PDGFRc PDGFRc. Estudios clínicos han determinado cómo el tipo y sitio de mutación en estos genes, influyen en la respuesta objetiva y la resistencia a las drogas que actualmente se emplean. Una evaluación a nivel molecular de los casos con GIST permite una mejor interpretación del pronóstico y evolución clínica del proceso tumoral al determinar las mutaciones que desencadena una inadecuada señalización intracelular y por ende un descontrol del ciclo celular.