Caracterización Molecular y de Ensayos de Patogenicidad de Colletotrichum acutatum, Agente Causal de la Antracnosis del Limón en Texas

Varias muestras de fruto, hojas y ramas de limón mexicano [Citrus aurantiifolia (Christm). Swingle] afectadas con síntomas típicos de antracnosis del limón fueron recolectadas de tres árboles en zonas residenciales de Brownsville, Texas. El hongo causante de la antracnosis, Colletotrichum acutatum J. H. Simmonds fue aislado de las muestras de hoja y de fruto. La amplificación de la región de repetición del ADN ribosomal del núcleo usando primers ITS1 y ITS4 y intron 2 del gen de la gliceraldehído 3-fosfato deshidrogenasa usando GDF y GDR del ADN del hongo resultó en amplicones de aproximadamente 520 pb y 260 pb, respectivamente. La búsqueda de similitud entre las secuencias de nucleótidos obtenidos de los fragmentos de 520 pb y 260 pb con el programa BLASTn (Basic Local Alignment Search Tool) del Centro Nacional para la Información Biotecnológica (NCBI) mostró un grado de identidad del 99% con C. acutatum y del 100% con varias especies de Colletotrichum, respectivamente. Los aislamientos del hongo fueron confirmados como de C. acutatum por amplificación selectiva de un fragmento de PCR de unas 490 bp usando el primer especie específico CaInt2 en combinación con el primer ITS4. El árbol filogenético que fue construido usando los datos de la secuencia del nucleotido ITS separo los aislados de postbloom fruit drop (PFD) y los colocó en el grupo de aislados de key lime anthracnose (KLA). Los ensayos de patogenicidad por inoculación de muestras de hojas, flor, y fruto mostraron que tanto el limón mexicano sin espinas como el limón mexicano común mostraron síntomas típicos de key lime anthracnose (KLA), mientras que hojas inoculadas del toronjo Rio Red, el Naranjo dulce Valencia, el limón Bearss, el limón pink Eureka, el limequat Eustis, el limón Ponderosa, la lima kaffir, el limón sin semilla Lisbon, y el limón Meyer no desarrollaron ninguna lesión.