Efecto do silenciamento do factor de transcripción Nrf2 en células sinoviais humanas | Efecto del silenciamiento del factor de transcripción Nrf2 en células sinoviales humanas | Effect of Nrf2 transcription factor silencing in human synoviocytes

[Resumen] Las técnicas de cultivos celulares son herramientas fundamentales en múltiples investigaciones científicas dentro del campo de Ciencias de la Salud, de forma que permiten abrir nuevos frentes y alcanzar innumerables logros. Así, enfermedades como la artritis reumatoide (AR), caracterizadas por un importante componente inflamatorio que culmina en la destrucción tisular, pueden ser estudiadas en mayor profundidad, y ello permite el desarrollo de diagnósticos y terapias eficaces. El factor de transcripción Nrf2 se encuentra implicado en la respuesta anti-inflamatoria que tiene lugar cuando aumenta el estrés oxidativo durante el inicio y evolución de la artritis reumatoide, siendo el factor principal en la activación de genes de respuesta antioxidante. En el presente trabajo se estudiará cual es el efecto del silenciamiento artificial del factor de transcripción Nrf2 mediante interferencia por ARN (transfección). La transfección se llevará a cabo sobre un cultivo primario de células sinoviales humanas de paciente con patología AR utilizando un electroporador Amaxa, y se analizarán los efectos de la inhibición de Nrf2 en los homogenados de las células transfectadas empleando la técnica del Western-blot.

[Abstract] Cell culture techniques are essential tools in multiple scientific research within the field of Health Sciences, in this way, they allows us to open new frontiers and achieve many accomplishments. Thus, diseases such as rheumatoid arthritis, characterized by a significant inflammatory component that’s culminates in tissue destruction, can be studied in more depth, and it allows us to carry out an effective diagnosis and therapy. The transcription factor Nrf2 is involved in the anti-inflammatory response that occurs when the oxidative stress increases in the beginning and development of rheumatoid arthritis, being the main factor in the antioxidant response genes activation. In the present project we will study what is the effect of the artificial transcription factor Nrf2 silencing by RNA interference (transfection). Transfection was conducted on a primary culture of human synovial cells from patient with rheumatoid arthritis by using an Amaxa electroporator, and the effects of Nrf2 inhibition will be analyzed in homogenates of the transfected cells using the Western-blot technique.

Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2014/2015