Hiperparasitismo en los abulones Haliotis rufescens, Haliotis fulgens y Haliotis corrugata por Candidatus Xenohaliotis californiensis y el bacteriófago pCXc: Aislamiento, caracterización y distribución | Hyperparasitism in the abalones Haliotis rufescens, Haliotis fulgens and Haliotis corrugata by Candidatus Xenohaliotis californiensis and by the bacteriophage pCXc: Isolation, characterization and distribution

Candidatus Xenohaliotis californiensis (CXc) es una bacteria intracelular del orden de las Rickettsiales postulada como el agente causal del Síndrome de Deshidratación (SD) en el abulón. Esta bacteria ha sido listada por la Organización Mundial de Salud Animal como un agente de declaración obligatoria por las mortalidades masivas de abulón negro (Haliotis cracherodii) ocurridas en California, EUA y su capacidad de infectar a otras especies de abulón. Debido a la naturaleza intracelular de CXc, la carencia de líneas celulares apropiadas y la inexistencia de metodologías específicas para su aislamiento, este parásito no ha sido cultivado in vitro y se encuentra pobremente caracterizado. Por otra parte, se ha detectado que CXc en abulón rojo (Haliotis rufescens) de cultivo y en abulón negro silvestre de California, están infectados con un fago, mismo que tampoco ha sido caracterizado. Se desconoce si este hiperparasitismo afecta a poblaciones de cultivo de abulón rojo o poblaciones naturales de abulón azul (Haliotis fulgens) y abulón amarillo (Haliotis corrugata), las cuales sostienen la industria abulonera en la península de Baja California. La distribución y prevalencia del hiperparásito eran desconocidas. Toda esta información es fundamental, no solo para entender mejor la interacción biológica de este hiperparasitismo, sino también para obtener información de utilidad práctica que contribuya al control del SD. Los objetivos de este estudio fueron desarrollar una metodología para separar y cultivar a CXc, caracterizar morfológicamente y genéticamente al fago de CXc y, determinar si las poblaciones de cultivo de abulón rojo y las poblaciones silvestres de abulón azul y abulón amarillo están afectadas por este hiperparásito. Se logró la separación de CXc, debido a su característico desarrollo dentro de vacuolas membranosas (Vm) que resultaron ser resistentes a la acción mecánica del proceso de filtración desarrollado. Este sistema permitió separar un promedio de 20 Vm por filtro de 28 µm y 43 Vm por filtro de 10 µm. Las Vm aparentemente mantuvieron su integridad física. Esta metodología es la única reportada hasta el momento que permite separar las Vm de una bacteria del orden Rickettsiales. Se probaron 15 medios de cultivo axénicos para CXc, incluyendo medios enriquecidos con sustratos para el cultivo de bacterias fastidiosas y con filtrados de esófago y hemolinfa de abulón, mismos que no fueron exitosos.

Candidatus Xenohaliotis californiensis (CXc) is an intracellular bacterium from the order Rickettsiales that has been postulated as the causal agent of Withering Syndrome (WS) in abalone. This bacterium has been listed by the World Organization for Animal Health as an agent of obligatory declaration due to the massive mortalities of back abalone (Haliotis cracherodii) that occurred in California, USA and due to its capability to infect other abalone species. Due to the intracellular nature of CXc, the absence of adequate cell lines and specific methodologies for its isolation, this parasite has not been cultivated in vitro and is poorly characterized. On the other hand, a bacteriophage (phage) has been detected in CXc in cultured red abalone (Haliotis rufescens) and wild black abalone in California, USA, that reduces the pathogenicity of the bacterium. This phage has not been characterized. It is unknown if this hyperparasitism affects cultured red abalone populations or natural populations of blue abalone (Haliotis fulgens) and yellow abalone (Haliotis corrugata), species that support the abalone industry in the peninsula of Baja California. This information is fundamental, not just to better understand the biological interaction of this hyperparasitism, but also to obtain useful information to practically control WS. The objectives of this study were to develop a methodology to separate and cultivate CXc, to morphologically and genetically characterize the phage that infects CXc and, to determine if cultured populations of red abalone and natural populations of blue abalone and yellow abalone are affected by this phage. The separation of CXc was achieved, due to its characteristic development within membrane bound vacuoles (MBVs) that were resistant to the mechanical action of the maceration and filtration process that was developed. This system allowed the separation of an average of 20 MBVs per 28 µm filter and 43 MBVs per 10 µm filter. The MBVs apparently maintained their fiscal integrity. This is the only methodology that has been reported to date that allows the separation of MBVs of a bacterium from the order Rickettsiales. Fifteen different axenic media were tested for CXc including media that were enriched with substrates for the culture of fastidious bacteria and abalone filtrates of the esophagus and hemolymph, none of these axenic media were successful.