Deteção da mutação do gene MDR1 em cães de raças portuguesas com aptidão para o pastoreio

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, área científica de Clínica

Uma deleção de 4 pares de bases no gene MDR1, mais recentemente referido como gene ABCB1, leva à formação de codões stop que fazem com que a síntese da glicoproteína P (gp-P) termine precocemente. A gp-P é uma proteína transportadora de efluxo de grande importância, sendo expressa principalmente na barreira hematoencefálica, no fígado e nos intestinos, bem como em alguns tumores. Consequentemente, os cães portadores de pelo menos um alelo mutado, apresentam alterações no metabolismo de certos fármacos e uma maior suscetibilidade à toxicidade dos mesmos. Esta mutação foi detetada em várias raças em diferentes países, sendo a maioria delas raças pastoras, como Collie e Pastor Australiano, mas também Whippet de pelo comprido e alguns cães de raças cruzadas. Até à data, segundo o nosso conhecimento, apenas se realizou um estudo em cães de raças pastoras portuguesas, onde se detetaram alguns genótipos heterozigóticos em cães da raça Barbado da Terceira. No entanto, ainda permanece por averiguar a presença desta mutação noutras raças pastoras portuguesas. Por esta razão, o principal objetivo deste estudo foi avaliar a presença da mutação MDR1 em cães de raça Rafeiro do Alentejo. As amostras de saliva para extração de DNA foram obtidas através de zaragatoas orais realizadas aos animais incluídos no estudo. O processamento da amostra incluiu a realização de PCR e sequenciação de DNA. Para avaliar se houve evidência da ocorrência de efeitos adversos que possam ser associados à administração de substratos da gp-P, foi enviado aos detentores um questionário que visava obter informação que levasse à identificação da ocorrência da mutação. A amostra populacional incluiu 42 cães da raça Rafeiro do Alentejo, 3 da raça Barbado da Terceira, 10 da raça Pastor Australiano, 4 da raça Pastor Alemão, 1 da raça Pastor de Shetland e 1 da raça Bobtail. Os resultados obtidos indicaram que todos os animais apresentavam genótipo wild-type, com exceção de um cão da raça Pastor Australiano que apresentava genótipo heterozigótico. Os resultados obtidos neste estudo não evidenciam a presença da mutação do gene MDR1 na raça Rafeiro do Alentejo, o que é positivo para os seus criadores, que assim podem reproduzir os animais sem restrições, mas também para os médicos veterinários que poderão utilizar com maior confiança os fármacos substratos da gp-P

ABSTRACT - DETECTION OF THE MDR1 GENE MUTATION IN PORTUGUESE HERDING DOGS - A 4-base pair deletion in the ATP-binding cassette subfamily B member 1 (ABCB1) gene, also known as the multidrug resistance gene (MDR1), results in stop codons that prematurely terminate the synthesis of P-glycoprotein (gp-P), a critical efflux transporter expressed mainly in the blood-brain barrier, liver and intestines, as well as in some tumors. As a result, dogs carrying the mutation exhibit impaired drug metabolism and heightened susceptibility to drug toxicity. This mutation has been detected in several breeds in different countries, being most of them herding breeds, like Collie and Australian Shepherd but also Longhaired Whippet and some mixed breed dogs. To our knowledge, only one study was conducted on Portuguese herding breed dogs and this study found some heterozygote genotypes in Barbado da Terceira dogs. However, there´s still some information lacking regarding this mutation in other Portuguese herding breed dogs. For this reason, the main objective of this study was to assess the presence of the MDR1 mutation in Rafeiro do Alentejo. Saliva samples for DNA extraction were obtained through oral swabs taken from the animals included in the study. Sample processing included PCR and DNA sequencing. To assess whether there was evidence of adverse effects that could be associated with the administration of gp-P substrates, a survey was sent to the owners with the aim of obtaining information that would lead to the identification of the occurrence of the mutation. The population sample included 42 Rafeiro do Alentejo, 3 Barbado da Terceira, 10 Australian Shepherd, 4 German Shepherd, 1 Shetland Shepherd and 1 Bobtail. The results showed that all the animals had a wild-type genotype, apart from one Australian Shepherd which had a heterozygous genotype. The results obtained in this study do not show the presence of the MDR1 gene mutation in Rafeiro do Alentejo, which is positive for its breeders, who can then breed the animals without restrictions, but also for veterinarians who will be able to use gp-P substrate drugs with greater confidence

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