Farklı pH ve sıcaklık değerlerinin Pichia pastoris'de rekombinant ekspanzin üretimi üzerine etkisi | Effect of different pH and temperature on the production of recombinant expansin in Pichia pastoris
2017
Aytekin Akbaba, Merve | Karaaslan, Asliye | Alihanoğlu, Selin | Vardin, Hasan | Karaaslan, Mehmet
Bu çalışma kapsamında rekombinantEkspanzin üretimi amacıyla domatesten izole edilen LeExp1 geni Pichia pastoris mayalarına pPIC9Kvektörü vasıtasıyla aktarılmıştır. Ekspresyon koşulları 20, 25, 30°C ve pH 4.0,5.0, 6.0 ve 7.0 değerleri için ayrı ayrı sağlanmıştır. Fermentasyon özütlerinin Biomass analizi ve Bradfordassay deneyleri sonucunda toplam rekombinant protein miktarları ve toplam hücrekonsantrasyonları belirlenmiştir. Farklı pH ve sıcaklık değerlerininrekombinant protein üretim miktarına ve toplam hücre konsantrasyonuna olanetkileri incelenmiştir. Deneysel sonuçlara göre maksimum rekombinant ekspanzinüretimi için P. pastoris mayalarınınoptimum fermantasyon koşulları 25oC sıcaklık ve pH 7.0 olarak tespitedilmiştir.
显示更多 [+] 显示较少 [-]In this study LeExp1 gene isolated fromtomato genome was transferred to Pichiapastoris by using pPIC9K vector for production of recombinant Expansinprotein. Recombinant protein expression was carried out at 20, 25, 30°Ctemperature and 4.0, 5.0, 6.0 and 7.0 pH levels. Total protein and dry cellweight amounts was determined in fermentation medium. The effects of differentfermentation temperature and pH level in the medium on protein expression andtotal cell concentration were investigated. The optimum fermentation conditionsfor P. pastoris were determined as 25oCand pH 7.0 according to experimental results.
显示更多 [+] 显示较少 [-]