Establishment of RT-PCR for classical swine fever diagnosis in méxico | Establecimiento de la técnica de RT-PCR para el diagnóstico de la fiebre porcina clásica en méxico

英语. Classical swine fever (CSF) is an endemic disease in most of Mexico and results in large financial loss to the swine industry. Diagnosis is usually done with direct immunofluorescence (IF) and virus isolation (VI), though molecular techniques such as reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) have been used in other countries. RT-PCR followed by nucleotide sequencing has been widely used for genetic typing of CSF virus strains, as well as for molecular epidemiologic studies. To add another CSF diagnostic tool to those already used in Mexico, RT-PCR was established and compared with IF and VI. Tissue samples were taken from various organs of three pigs inoculated with 106DL50/2ml ALD strain of CSF virus, via intramuscular injection, and three non-inoculated pigs were used as controls. A specific 308 bp amplification product, corresponding to an E2 (gp55) gene fragment, was obtained from tissue samples of the inoculated animals, while no amplification was observed with tissue samples from uninfected pigs. The RT-PCR results agreed with those obtained with IF and VI. Because RT-PCR is highly sensitive, easy to perform and provides rapid results, it can be used as a complementary classical swine fever diagnosis test.

西班牙语; 卡斯蒂利亚语. La fiebre porcina clásica (FPC) es una enfermedad que se encuentra de manera endémica en la mayor parte del país, provocando pérdidas económicas importantes para la porcicultura. En México el diagnóstico se efectúa mediante las pruebas de inmunofluorescencia (IF) y aislamiento viral (AV), y en otros países también se utiliza la transcripción reversa-reacción en cadena de la polimerasa (RT-PCR). La RT-PCR seguida de secuenciación nucleotídica ha sido ampliamente utilizada para la tipificación de un gran número de cepas y aislados del virus de la FPC, así como para estudios epidemiológicos moleculares. Con objeto de contar con otra técnica de diagnóstico en nuestro país, se estableció la RT-PCR y se comparó con IF y AV. Para esto se utilizaron tejidos de tres cerdos inoculados experimentalmente con 106DL50/2ml de la cepa ALD de FPC por vía intramuscular y tres testigos. Por RT-PCR se amplificó un producto de 308 pares de bases (pb) correspondiente a un fragmento del gen que codifica para la glicoproteína E2 (gp55) a partir de órganos de los animales inoculados, mientras que de los órganos de los animales testigo no se observó ninguna amplificación. Los resultados de la RT-PCR concordaron con los obtenidos por IF y AV. Se concluyó que la RT-PCR puede ser utilizada como una prueba complementaria para el diagnóstico de la fiebre porcina clásica debido a su sencillez, rapidez y alta sensibilidad.