Avaliação da eficácia de compostos selenados e telurados em modelo in vitro contra Haemonchus app. de bovinos e ovinos

Orientador: Prof. Dr. Marcelo Beltrão Molento

Coorientador: Dr. Irineu Romero Neto

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa : Curitiba, 26/02/2025

Inclui referências

Área de concentração: Ciências Veterinárias

Resumo: Infecções parasitárias causadas por nematódeos gastrintestinais (NGI) são responsáveis por um grande impacto na saúde de ruminantes. Os anti-helmínticos são utilizados para o controle das verminoses, mas seu uso indiscriminado tem aumentado a seleção de parasitos resistentes. Formulações com derivados de selênio (Se) e telúrio (Te) representam uma alternativa terapêutica. O objetivo desta pesquisa foi determinar o efeito do disseleneto de difenila (PhSe)2, cloreto de fenilselenila (4-CI-PhSe)2) e telurato de trico (dioxietileno 0 ,0 ’) de amonia (AS-101) contra larvas de terceiro estágio (L3) e ovos de helmintos coletados de bovinos e ovinos. Foram realizados testes de inibição da migração larval (TIML) e de eclodibilidade de ovos (TEO) em concentrações de 0,10 a 16,00 mmol L~1, além da avaliação da citotoxicidade em células LLC-MK2 (Lilly Laboratory Culture-Monkey kidney-second lineage). Ivermectina (IVM) foi usada como controle positivo e para combinação de medicamentos. Entre os helmintos identificados, Haemonchus spp. foi o mais prevalente, representando 76% nas amostras de ovinos e 64% nas de bovinos, seguido por Trichostrongylus spp. (16% e 24%, respectivamente). Já Oesophagostomum spp. e Cooperia spp. foram menos frequentes, correspondendo a 6 e 2% nos ovinos, e 9 e 3% nos bovinos. Os dados revelaram a efetiva interferência concentração-dependente de PhSe)2i 4 CI-PhSe)2 e AS-101. AS-101 alcançou a maior atividade larvicida, com concentração inibitória de 50% (Cl50) de 0,976 mmol L'1 e 1,035 mmol L'1 para ovinos e bovinos, respectivamente. PhSe)2 apresentou o melhor desempenho ovicida, com o menor Cl50 para ovinos (1,801 mmol L'1) e bovinos (1,845 mmol L"1). Adicionalmente, o composto 4-CL-PhSe)2 também exibiu atividade inibitória significativa sobre a migração de L3 e a eclodibilidade de ovos, embora necessitasse de concentrações mais elevadas em comparação aos demais. As combinações de (PhSe)2 e AS-101 com IVM tiveram um efeito aditivo de até 13,33% contra L3 do parasito no ensaio de combinação de medicamentos. As diluições foram realizadas fixando [(PhSe)2] na Ciso e variando [IVM] em Cl-io, Cl30e Cl50, e vice-versa, o mesmo ocorrendo para AS-101. Quanto à citotoxicidade, PhSe)2 apresentou o menor efeito sobre células LLC-MK2. Os resultados indicam potencial terapêutico dos compostos, representando inovação farmacológica promissora.

Abstract: Parasitic infections caused by gastrointestinal nematodes (GIN) have a significant impact on the health of ruminants. Anthelmintics are used to control helminth infections, but their indiscriminate use has led to an increase in the selection of resistant parasites. Formulations containing selenium (Se) and tellurium (Te) derivatives represent a therapeutic alternative. The aim of this research was to determine the effect of diphenyl diselenide ((PhSe)2), 4-chlorophenylselenenyl chloride ((4-CI-PhSe)2), and ammonium trichotellurate (dioxydiethylene 0 ,0 ’) (AS-101) against third-stage larvae (L3) and helminth eggs collected from cattle and sheep. Larval migration inhibition tests (LMIT) and egg hatch assays (EHA) were performed at concentrations ranging from 0.10 to 16.00 mmol L-1, in addition to cytotoxicity evaluation in LLC-MK2 cells (Lilly Laboratory Culture-Monkey kidney-second lineage). Ivermectin (IVM) was used as a positive control and in drug combination assays. Among the identified helminths, Haemonchus spp. was the most prevalent, accounting for 76% of the samples from sheep and 64% from cattle, followed by Trichostrongylus spp. (16% and 24%, respectively). Oesophagostomum spp. and Cooperia spp. were less frequent, representing 6% and 2% in sheep, and 9% and 3% in cattle. The data revealed a concentration-dependent effect of (PhSe)2, (4-CI-PhSe)2, and AS-101. AS-101 showed the highest larvicidal activity, with a 50% inhibitory concentration (ICso) of 0.976 mmol L~1 for sheep and 1.035 mmol L~1 for cattle. (PhSe)2 demonstrated the best ovicidal performance, with the lowest ICso for sheep (1.801 mmol L_1) and cattle (1.845 mmol L_1). Additionally, the compound (4-CI-PhSe)2 also exhibited significant inhibitory activity on L3 migration and egg hatchability, although it required higher concentrations compared to the others. Combinations of (PhSe)2 and AS-101 with IVM showed an additive effect of up to 13.33% against L3 in the drug combination assay. Dilutions were performed by fixing [(PhSe)2] at the ICso and varying [IVM] at IC io , ICso, and ICso, and vice versa, the same approach being applied for AS-101. Regarding cytotoxicity, (PhSe)2 showed the lowest effect on LLC-MK2 cells. The results indicate the therapeutic potential of these compounds, representing a promising pharmacological innovation.